摘要：为了提高内生真菌CH1 Geomyces sp.次级代谢产物乙基长春胺的产量,首先采用单因素试验法考查环氧合酶抑制剂萘普生、羟化酶诱导子过氧化氢、前体物色氨酸、色胺、马钱子苷及裂环马钱子苷对内生真菌CH1产乙基长春胺的影响;在单因素试验的基础上,采用SPSS(统计产品与服务解决方案)19.0设计L_(18)(3~6)正交试验,进一步优化各前体物和诱导子的质量浓度,并在最优条件下进行试验验证。研究结果表明:在内生真菌CH1发酵液中添加前体物和诱导子均对内生真产乙基长春胺有显著影响(显著性概率P小于0.05);当萘普生、色氨酸、色胺、马钱子苷和裂环马钱子苷质量浓度分别为8,100,95,105和25 mg/L,过氧化氢质量浓度为20μg/L时,能有效提高乙基长春胺的产量,在此条件下进行验证试验,乙基长春胺产量可达5.09mg/L,与不加前体物质相比提高2.63倍。

摘要：利用Plackett-Burman设计和响应面设计方法对Hd3菌株的发酵条件进行了优化研究,确定了最佳培养基组成及培养条件.试验结果表明：Hd3菌株的摇瓶培养基配方为葡萄糖24.71 g/L,MgSO4.7H2O 1.08 g/L,土豆244.17 g/L.发酵条件为pH 6~7,250 mL三角瓶装90 mL发酵液,接入9×103cfu/mL菌量,31℃培养9 d.

摘要：Epichloë内生真菌存在于许多禾草的地上部分组织中,地上内生真菌和地下土壤微生物都能影响植物的生长,但关于二者同时对植物生长和竞争力影响的研究却很少。本文旨在研究地上部分内生真菌对宿主禾草的生长和竞争能力的作用是否受到土壤微生物的影响。本文以感染Epichloë内生真菌(EI)和不感染内生真菌(EF)的羽茅(Achnatherum sibiricum)以及大针茅(Stipa grandis)为植物材料,采用湿筛法获得具有不同多样性的微生物接种物。试验采用3因素随机区组设计:一是羽茅的内生真菌感染状况,包括EI和EF;二是土壤接种物的微生物组成,包括混合微生物组分(高多样性)和小型微生物组分(低多样性);三是种植方式,包括单独种植、单种和混种。植物种植16周后测定了植物生长和竞争状况。当羽茅单株或单种种植时,内生真菌对羽茅的生长和种内相互作用无显著影响,但内生真菌显著缓解了土壤微生物对羽茅单株种植时的抑制作用。当羽茅与大针茅混种时,内生真菌和土壤微生物对羽茅的种间竞争力具有显著的交互作用,当接种小型微生物组分时,内生真菌显著提高了宿主植物的种间竞争力;而当接种包含大型微生物的混合微生物组分时,内生真菌对宿主种间竞争力无显著影响。方差分析表明,内生真菌和土壤微生物交互作用对羽茅种间竞争力的贡献比内生真菌和土壤微生物的贡献均大。

摘要：为了实现内生真菌Shiraia *** 14菊粉酶基因在大肠杆菌中的高效表达,建立有效的包涵体复性技术,获得有活性的重组菊粉酶,本研究通过提取Shiraia *** 14的总RNA,反转录合成cDNA,设计PCR引物扩增出菊粉酶基因,将其克隆至pET-22b（＋）载体后转入*** BL21（DE3）,利用SDS-PAGE法检测IPTG诱导表达后重组蛋白的表达情况,并进一步检测了包涵体复性及重组酶酶活情况,最终成功获得了相对分子量为62.07 kD的重组蛋白,成功复性包涵体,复性率为25.23%,重组菊粉酶活力为6.84 U/m L。本研究为活性重组菊粉酶的获得及包涵体复性提供了新的方法和依据。

摘要：内生真菌枫香拟茎点霉(Phomopsis liquidambaris,B3)能够与水稻建立互惠互利关系,但是两者之间的互作关系是否会受到土壤中有效磷含量的影响尚不清楚。本研究以水稻-B3共生体系为研究对象,在低磷(LP)、中磷(MP)、高磷(HP)三个磷水平中分别设置未接菌组(E-)、接菌组(E+),共六个处理,探讨在室外盆栽试验与温室试验下,不同磷水平对植物-内生真菌互作关系的影响。室外盆栽试验表明,在低磷水平下,接种B3显著促进水稻生长,水稻产量提高7.05%;在中高磷水平下B3对水稻生长的作用减弱。为排除土壤中复杂环境的影响,设计温室试验,结果表明,在低磷水平下,与未接种处理相比,接种B3的水稻根冠比提高22.48%,磷含量增加39.98%,同时,B3显著增强叶绿素的含量以及水稻根部蔗糖、葡萄糖、果糖积累量,然而,低磷环境会限制B3在水稻根部的定殖量;在中磷和高磷水平下,B3定殖量高但对水稻的促生作用减弱。以上结果表明,在低磷水平下,B3与水稻之间是低丰度互作平衡关系,在该条件下,B3在水稻根部的定殖量低但能显著促进水稻生长;而在中高磷水平下,B3与水稻是高丰度互作平衡关系,B3在水稻根部定殖量高,虽然没有促生作用但可能具有其他优势。本研究有利于解释磷是否以及如何影响内生真菌与水稻的互作关系。

摘要：对从药用植物胜红蓟茎部组织中分离获得的一株内生真菌进行形态学与ITS分类学鉴定;采用单因素实验及正交设计优化该菌株生长的最适条件;探究发酵液不同极性提取物(乙酸乙酯提取物EAE、乙醇提取物EE和石油醚提取物PEE)黄酮、多酚含量与其体外抗氧化活性[1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、2,2’-二氮-双(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)(ABTS)自由基清除能力和Fe^(3+)还原能力]的相关性.该菌株为Letendraea ***07;WZ07菌丝生长的最适条件为温度为28℃,pH为5.0,淀粉20 g/L,尿素0.5 g/L,磷酸二氢钾1 g/L,硫酸镁0.5 g/L,VB6或肌醇10 mg/L;3种有机溶剂提取物黄酮和多酚含量差异显著(P<0.05),其中EAE含有的黄酮和多酚含量最高,分别为11.97 mg/g、14.70 mg/g;提取物均具有清除DPPH、ABTS自由基和还原Fe^(3+)的能力,且均呈量效关系,EAE抗氧化活性能力最强,在浓度为2mg/mL时,对清除DPPH自由基率可达87.23%,其IC_(50)为242.13μg/mL;清除ABTS自由基率为94.72%,与阳性组维生素C清除能力相当,其IC_(50)为58.38μg/mL;Fe^(3+)还原力OD值为0.78,其IC_(50)为325.17μg/mL.相关性分析显示不同提取物的黄酮和多酚含量均与抗氧化活性呈正相关关系,表明黄酮和多酚类成分可能是WZ07菌株起抗氧化活性的功效因子.(图7表10参51)

摘要：【目的】研究内生真菌菌株YCEF005、YCEF053固态发酵培养基。【方法】通过单因素试验和正交试验设计优化固态发酵培养基基质组成;通过单因素试验和均匀试验设计及神经网络结合遗传算法优化基质外加组分和接种量。【结果】优化的YCEF005培养基基质组成(质量比)为麸皮50%、豆饼粉10%、米糠20%、玉米碎粒20%;YCEF053培养基基质组成为麸皮60%、豆饼粉10%、米糠10%、玉米碎粒20%。YCEF005基质外加组分和接种量(/kg基质)为蔗糖12.96 g、蛋白胨12.70 g、NH4NO3 4.00 g、KH2PO4 1.50 g、Ca SO4 10.00 g、Mg SO4 0.48 g、含水量500 g、接种量24 m L。YCEF053基质外加组分和接种量(/kg基质)为蔗糖13.37 g、蛋白胨14.02 g、Na NO33.85 g、KH2PO4 1.23 g、Ca SO4 10.89 g、Mg SO4 0.52 g、含水量480 g、接种量20 m L。在优化培养基上发酵7-9 d获得最大发酵生物产量。【结论】通过对固态发酵培养基的优化提高了发酵的生物产量。

摘要：本实验通过形态学鉴定和PCR扩增r DNA-ITS序列分析,确定两株长白内生真菌Ra-R-32、ZPRa-S-2的种属,采用正交设计优化其DPPH抗氧化发酵条件,并通过测定DPPH·清除能力、·OH-清除能力、Fe2+螯合能力、O-·2清除能力及亚硝酸盐清除能力等方法对其抗氧化活性综合评价。实验显示,Ra-R-32和ZPRa-S-2分别隶属于Hypocrea longipilosa和Aspergillus sydowii;Ra-R-32培养的最佳条件为:葡萄糖35 g/L,蛋白胨3 g/L,p H8,35℃,装液量100mL/250mL;ZPRa-S-2培养的最佳条件为:蔗糖35 g/L,牛肉膏3 g/L,p H 6,30℃,装液量150mL/250mL。最佳发酵时间都为10 d。它们的DPPH·清除能力、·OH-清除能力、O-·2清除能力较强,其中,Ra-R-32的EC50值分别为4.72、7.50、1.60 mg/m L;ZPRa-S-2的EC50值分别为2.88、8.99、4.12 mg/m L。结果表明优化条件下二株菌均具有良好的抗氧化能力。

摘要：以愈创木酚、α-萘酚、没食子酸、L-酪氨酸和单宁酸等5种酚类物质为底物,采用鉴别培养基筛选法从14株茶树内生真菌中初筛获得4株产多酚氧化酶的真菌。根据变色圈的大小、颜色深浅和摇瓶发酵的结果复筛获得产多酚氧化酶能力较强的菌株CSN-13。对菌株CSN-13产酶营养条件进行初步分析,结果表明,在供试的6种碳源物质中,以麸皮对菌株CSN-13产多酚氧化酶的促进作用最为明显;供试的5种氮源物质中,以硝酸铵的促进作用最为明显;在发酵培养基中添加茶水,对产酶有明显的促进作用。采用正交设计对CSN-13产酶发酵培养基进行初步优化,优化后的培养基配方为:麸皮(40 g·L-1)、硝酸铵(15 g·L-1)、茶水(4 g·L-1)、KH2PO4(2 g·L-1)、Mg SO4·7H2O(0.5 g·L-1)、无水Ca Cl2(0.075 g·L-1)、Cu SO4·5H2O(0.01 g·L-1)。采用优化后的培养基,菌株CSN-13在28℃下培养5 d,酶活力达到241 U·m L-1·min-1,比优化前提高8.5倍。茶树内生真菌菌株CSN-13及其发酵产酶培养基的研究为多酚氧化酶的进一步开发打下了基础。

摘要：自药用植物苦参中分离得到具有良好抗病效果的内生真菌BS002菌株,对该菌株发酵培养基的条件进行了探究.在单因素试验基础上,应用Plackett-Burman设计,得出主要影响因素有结晶乙酸钠、葡萄糖、马铃薯的含量;采用响应面分析法借助Box-Behnken试验设计,对内生真菌BS002菌株发酵条件进行优化,确定最佳条件为：装液量100mL/250mL锥形瓶,马铃薯246.47 g/L,葡萄糖27.81 g/L,结晶乙酸钠1.95 g/L,接种量107 cfu/mL,温度25℃,酵母膏1.o g/L,转速150 r/min,时间4d,菌丝干重可达10.398 g/L.