摘要：目的筛选并优化冻干保护剂组合,建立可室温稳定储存的、不影响试剂检测灵敏度的Cas12a鼠疫菌核酸检测冻干体系,为其应用于动物鼠疫监测的现场快速检测奠定基础。方法以鼠疫耶尔森氏菌pla基因为靶基因,选择9种常用冻干保护剂加入核酸检测试剂中,筛选有明显保护效果的4种保护剂进行优化。按照正交实验设计原则设计保护剂组合,通过37℃加速破坏实验及26℃室温稳定性实验对复合保护剂进行保护效果和灵敏度评价。结果加入蔗糖、山梨醇和海藻糖3种保护剂的冻干检测体系可在37℃稳定存放2周。室温下存放3个月后体系检测信号强度与37℃加速破坏1周时基本相当,同时检测方法的灵敏度依然能达到10-5 ng/μL,说明Cas12a检测试剂加入筛选得到的保护剂冻干后,可在室温下稳定保存至少6个月。结论本研究构建的室温稳定CRISPR/Cas12a鼠疫菌检测体系可在室温下稳定存放至少半年,能够满足鼠疫菌现场快速检测中对试剂稳定性的需求。同时,本研究获得的复合保护剂组分对构建其它室温稳定CRISPR/Cas12a核酸检测体系具有重要参考价值。

摘要：目的:找到一种冻干赋形剂,能有效用于蛇毒中抗肿瘤活性物质ACTX- 6的保护作用。方法:采用正交实验设计原理和方法,以海藻糖、丙氨酸、NaCl作为冻干赋形剂的组成,筛选了它们的配比,考察样品冻干后的电泳区带和细胞毒性。结果:所找到的赋型剂的配方不仅可以使ACTX- 6在冻干后电泳区带和细胞毒性都不改变,并且能够明显改善样品蛋白对动物的毒性,腹腔注射的LD50 在加了保护剂后得到提高,静脉给药时局部组织坏死现象得到改善。

摘要：利用从云南富源泡菜中分离得到的发酵乳杆菌FYa1制作直投式发酵剂,FYa1泡菜用直投式发酵剂的最佳离心条件为离心转速3000 r/min、离心时间15 min、离心温度15℃,在此条件下,FYa1离心存活率达到34.57%。通过Plackett-Burman设计和Box-Behnken设计优化最佳冻干保护剂配方,最佳配比为海藻糖8.5 g/100 mL、蔗糖8.5 g/100 mL和谷氨酸钠2.5 g/mL。此条件下,冻干菌粉的存活率为(68.53±0.09)%,FYa1发酵剂的含菌量为(2.0±0.05)×10^8 CFU/g。FYa1泡菜用直投式发酵剂具有优秀的发酵性能,在发酵过程中展现出良好的复活能力。研究结果为云南传统泡菜的科学加工和产品质量提升提供一定的科学理论和应用依据。

摘要：采用改良乙醇注入法制备了尼莫地平脂质体,运用均匀设计试验优化了脂质体处方,并考察了冷冻干燥工艺与处方因素对其冻干脂质体性质的影响。在优化冻干工艺条件下,甘露醇和蔗糖合用为冻干保护剂,可得到外观良好、易于重建的冻干脂质体,冻干前后的约物包封率分别为97．1%和96．2%,粒径分别为175．1nm和227．9nm。—20℃及4℃贮存3个月,粒径和包封率无显著变化。采用大鼠在体鼻腔循环游流法,考察了尼莫地平鼻用脂质体及其冻干重建制剂的鼻黏膜吸收规律。结果表明不同药物浓度脂质体及冻干重建脂质体的鼻黏膜吸收速率常数K无显著性差异,药物吸收呈一级动力学特征。

摘要：目的优化丹参酮ⅡA冻干乳的处方。方法采用高压乳匀法制备丹参酮ⅡA冻干乳,以粒径和综合评分为指标,以麦芽糖和β-环糊精的用量及冻干乳剂体积为考察因素,采用星点设计-效应面法优化处方。结果优选的处方为:以20%麦芽糖、0.2%β-环糊精为冻干保护剂,冻干体积为0.4 m L;所制丹参酮ⅡA冻干乳的外观结实、平整,加水再分散性好,粒径为375 nm。结论所建数学模型预测性良好,适合丹参酮ⅡA冻干乳的处方优化。

摘要：以植物乳杆菌DMDL9010为研究对象,采用单因素实验并应用Box-Behnken设计对冻干保护剂配方进行优化,研究了该菌株在冻干过程中离心条件和冻干保护剂对冻干菌株存活率的影响。结果表明:在8 000 r/min离心30 min,菌泥活菌数可达最大值3.135×10~9mL^(-1);当冻干保护剂质量分数为:脱脂乳粉12.0%,细菌学蛋白胨7.95%,海藻糖15.2%时菌株存活率最高,经验证菌体数最高可达3.78×10~8g^(-1),冻干存活率达13.38%。

摘要：为制备高活性嗜热链球菌MN002冻干菌粉,对富集培养后不同离心条件下嗜热链球菌MN002的存活率进行了研究。同时,以菌体浓缩倍数为指标,对蛋白溶解剂进行了组合筛选。进而通过单因素实验和二次正交旋转组合设计实验,考查了11种不同冻干保护剂对嗜热链球菌MN002的冻干保护效果,以获得嗜热链球菌MN002真空冷冻干燥的最佳保护剂配方。结果表明,嗜热链球菌MN002在离心转速为8000 r/min,离心温度4℃条件下,菌体离心存活率最高。同时,以0.15%六偏磷酸钠和0.5%柠檬酸钠作为组合蛋白洗脱液,可大大提高MN002菌体浓缩倍数。试验确定嗜热链球菌MN002的最佳保护剂配方为:5%蔗糖、2%甘油、0.8%谷氨酸钠、1%抗坏血酸、5%海藻糖,在此条件下,嗜热链球菌MN002菌体存活率可达84.8%。