摘要：菜豆豆荚中的凝集素(Phytohaem agglutinin,PHA)是其食用过程中致使人中毒的主要因素。为探究菜豆种质资源中PHA含量差异,挖掘与PHA含量显著相关的功能标记,测定了64份菜豆品种两年中PHA含量变化,设计并筛选出60对SSR(Simple sequence repeats)标记,对菜豆种质进行群体遗传结构分析,并利用TASSEL 2.1软件中的一般线性模型(Generalized linear model,GLM)对菜豆凝集素的含量性状进行关联分析。结果表明,64份菜豆品种中,2018年凝集素含量为0.015~1.564 mg·g^(-1),平均值为0.721 mg·g^(-1),2019年凝集素含量为0.041~1.850 mg·g^(-1),平均值为0.737 mg·g^(-1);60对SSR标记共检测到219个等位位点;遗传相似系数(Genetic similar cofficient,GS)为0.694时,64份菜豆种质可聚为2个类群。关联分析显示,两个等位位点与菜豆凝集素含量性状显著相关(P<0.05),对表型的变异贡献率分别为15.23%和15.05%。

摘要：以黑木耳为原料,采用磷酸缓冲液浸提,在料液比、浸提时间、浸提温度等单因素试验的基础上,设计正交试验,以研究黑木耳凝集素的最佳提取工艺。结果表明,以磷酸盐缓冲液为提取剂,料液比1 g∶15 m L,提取温度为30℃,提取时间为16 h条件下,黑木耳凝集素的凝集活性最高,达到0.742。

摘要：为了获得新的掌叶半夏凝集素家族基因,以掌叶半夏叶片为材料,根据GenBank中已报道的天南星科凝集素基因序列设计引物,PCR法扩增获得3个掌叶半夏凝集素基因,分别暂命名为PPA15、PPA324、PPA533。其中,PPA15的全长为729 bp,编码243个氨基酸;PPA324的全长为774 bp,编码258个氨基酸;PPA533的全长为777 bp,编码259个氨基酸。利用分析软件和网站等工具对克隆的3个基因进行生物信息学分析,结果显示,PPAs与GenBank中收录的天南星科半夏基因具有较高同源性,同时具有单子叶植物特有的甘露糖结合位点,推测它们属于同一基因家族。克隆的3个基因均具有信号肽特征,由N端25个氨基酸残基组成,具有典型的跨膜结构域,推测定位于胞内膜结构。构建pET-28b(+)-PPAs原核表达载体,利用大肠杆菌BL21(DE3)进行原核诱导表达,SDS-PAGE结果表明,重组蛋白分子量约28.0 ku,与预期一致。试验结果为进一步研究掌叶半夏凝集素家族蛋白的功能奠定了基础。

摘要：硫磺菌凝集素是一种从硫磺菌子实体中提取的、能凝集红细胞的蛋白质。本文以硫磺菌为原料,采用磷酸缓冲溶液浸提,对氯化钠浓度、液料比、提取温度、提取时间、浸提p H五个因素进行单因素实验,并设计四因素三水平的正交实验,以研究硫磺菌凝集素的最佳提取工艺。研究结果表明:氯化钠浓度为0 mol/L,液料比为30∶1 m L/g,提取温度为15℃,提取时间为10 h,浸提p H为7.5的条件下,硫磺菌凝集素的凝集活性最高,达到0.5870,蛋白得率为0.576%。

摘要：【目的】获得双孢蘑菇凝集素基因,了解双孢蘑菇凝集素家族蛋白的功能。【方法】根据已报道的双孢蘑菇凝集素基因序列设计引物,以总DNA为模板扩增双孢蘑菇凝集素基因。将长432 bp的基因亚型克隆后连接至携带His标签的原核表达载体pET-28a,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,表达产物经亲和层析纯化后,进行Western blot印迹分析。【结果】扩增的凝集素基因大小为432 bp,重组表达质粒pET-Lectin构建正确,重组凝集素蛋白在大肠杆菌BL21(DE3)中的表达产物约为18 kDa,重组蛋白纯化后纯度达95%以上。【结论】本研究首次扩增双孢蘑菇凝集素基因,并获得纯度较高的双孢蘑菇凝集素蛋白,可利用凝集试验检测其生物学活性,为目的基因的深入研究提供参考依据。

摘要：以猴头菇为试材,采用磷酸缓冲液(PBS)浸提法制备提取液,在浸提剂pH值、料液比、浸提时间、浸提温度等单因素试验的基础上,采用正交实验设计,研究了猴头菇凝集素的最佳提取工艺。结果表明:最佳的提取工艺以PBS(0.10 mol/L,pH 6.5)为提取剂,料液比1∶15(g/mL),提取温度4℃,提取时间24h。在此条件下,猴头菇凝集素的凝集活性达到0.586,提取率达到1.35%。

摘要：采用响应面法对液体深层培养的正红菇(Russula vinosa)菌丝体产胞内凝集素的培养条件进行了优化.通过单因子实验确定最适碳源和氮源为淀粉和酵母膏,在此基础上,通过Plackett-Burrman设计对影响其产胞内凝集素的相关因素进行评估并筛选出具有显著效应的淀粉、酵母膏、装液量3个因素,通过最陡爬坡实验及响应面分析法确定了产凝集素的最适条件:ω(淀粉)3.04%,ω(酵母膏)0.3%,ω(KH2PO4)0.2%,ω(MgSO4)0.1%,装液量73mL,转速250r/min,初始pH5,发酵时间5d.在此条件下,菌丝体产胞内凝集素的总活力可达72127.3u,与初始培养条件下的凝集素总活力相比提高了1.88倍.

摘要：采用DEAE-SepharoseFF离子交换层析和Superdex20010/300GL凝胶过滤层析技术,从泥鳅血清中分离出两种天然凝集素MSL-I和MSL-Ⅱ。SDS-PAGE检测表明,MSL-I及MSL-Ⅱ均显示两条蛋白质着色带。采用凝胶过滤法测得MSL-I相对分子质量为25000,MSL-Ⅱ相对分子质量为82000。根据凝胶过滤测定及SDS-PAGE检测结果可知,MSL-Ⅱ由相对分子质量分别为29000和13600两种亚基组成,MSL-I的亚基组成有待进一步研究。MSL-Ⅱ能结合多种糖,其中对乳糖的亲和力最强。MSL-Ⅱ具有较强的热稳定性,在pH4～11范围内具有凝集活性,最适pH为6～8。

摘要：以草菇菌丝体为试材,以凝集素提取液的总活力为指标,在单因素试验的基础上,利用3因素3水平的Box-Benhnken中心组合试验和响应面分析法设计优化了草菇菌丝凝集素的超声波提取工艺。结果表明:超声功率为310W、超声处理时间为36min、液料比为4.5∶1,是草菇菌丝凝集素超声波提取的最佳工艺;在该条件下,其20g草菇菌丝的凝集素提取液的总活力为76 386U。

摘要：以苦杏仁为研究材料,展开杏仁凝集素提取条件优化的试验,并对部分性质进行研究。结果表明,杏仁凝集素粗提液对人B型血的血凝效果较好;浸提液PBS＋CaCl_2的凝集活性最高;采用均匀设计的方法优化杏仁凝集素的提取工艺,得到回归方程为：Y=0.162 1＋0.139 0X_1-0.016 44X_1~2＋0.015 96X_2X_3,最佳组合为：X_l（时间）20.65 h,X_2（料液比）1︰13（g/m L）,X_3（饱和硫酸铵质量分数）80%,理论凝集活性为0.854 6,经验证试验得到杏仁凝集素粗蛋白的凝集活性为0.685 4。杏仁凝集素具有双糖和糖衍生物的专一性,而没有单糖的专一性;pH在4.5~9.5,温度30℃~50℃时具有较高的活性。