摘要：基于“新农科”动物生产类专业创新型复合畜牧人才培养的需求,将CRISPR/Cas9介导的基因敲除小鼠模型引入动物分子遗传标记实验课程中,设计了基因缺失分子标记检测与分析实验,采用基于PBL的混合式教学模式,学生能系统掌握基因组DNA提取、PCR扩增技术、琼脂糖凝胶电泳分析、基因型判定等相关理论和实验技术,将多门专业课程的实践环节有机结合,促进了学生理论知识与实验技能的融会贯通,激发了学生的学习热情,提升了专业认同感,培养了综合素质和创新能力。

摘要：以种间杂交组合８８－１１０［８３－４－９６（毛葡萄，抗霜霉病）ｘ粉红玫瑰（欧洲葡萄，感霜霉病）］的Ｆ１代（６０个单株）及其自交或互交所得的３个巴代为试材，应用ＢＳＡ、ＲＡＰＤ和ＳＣＡＲ方 法研究了葡萄抗霜霉病基因的分子标记。共筛选了２８０个Ｏｐｅｒｏｎ引物，其中１６０个引物扩增 出了清晰的 ＤＮＡ条带，发现了 ＲＡＰＤ标记 ＯＰＯ０６－１５００与葡萄抗霜霉病主效基因（ＲＰｖ－１）紧 密连锁，经 Ｍａｐｍａｒｋｅｒ软件连锁分析， ＯＰＯ０６－１５００与 ＲＰｖ－１的遗传距离为 １．７ｃＭ。将该 ＤＮＡ 片段克隆并测序。据其两端序列，设计了一对长度为 ２６ｂｐ的特异引物分别扩增供试材料，获 得了与该 ＲＡＰＤ标记相同大小的一条带，将 ＲＡＰＤ标记转化为 ＳＣＡＲ标记 ＳＣＯ０６－１５００，并证 实了此ＳＣＡＲ标记的通用性，且可用于葡萄抗病育种中杂种对霜霉病的抗病性鉴定。

摘要：在家畜的人工授精育种体制中，孙女设计和女儿设计是多数研究者所推崇的连锁检测方法。本研究采用ＬＯＤ值的数学期望（ＥＬＯＤ）和衡量参数估计精确性的Ｆｉｓｈｅｒ信息测度来比较两种试验设计的连锁分析效率。结果表明，在对连锁信息贡献方面（ＥＬＯＤ），孙女设计具有女儿设计无法比拟的优越性，重组率估计的准确性在连锁紧密时（ｒ＜０．１５），孙女设计要好些；连锁松散时，女儿设计的Ｆｉｓｈｅｒ信息要高。

摘要：为确定感染性克隆质粒免疫小鼠拯救获得的病毒量与诱导抗体之间的关系,以选择最佳免疫剂量,本研究建立了一种快速、灵敏的TaqMan荧光定量PCR检测方法。根据pcDNA3.1(+)-PCV1-2m-V5质粒的ORF2和V5标签序列设计特异性引物和探针,并将该质粒作为阳性标准品,优化荧光定量PCR条件后,按10倍倍比稀释,建立标准曲线,进行灵敏性、特异性和稳定性验证;而后,应用该方法对免疫不同质粒浓度的6组小鼠,分别在免疫后1~9周进行病毒血症检测;同时,应用ELISA方法分别对PCV2抗体滴度进行检测。结果表明,试验建立的荧光定量PCR方法具有良好的灵敏性、特异性和稳定性,检测范围可达1.29×10^1~1.29×10^9拷贝/μL;病毒血症可持续至第5周,抗体可维持至第8周。通过分析抗体滴度变化与病毒载量消长关系,确定使用200μg作为小鼠的最佳免疫剂量。本试验为感染性克隆质粒进一步在本体动物(猪)体内评估免疫效果奠定基础。

摘要：【目的】本研究建立了林麝标记辅助选择技术体系,为林麝的品系选育提供理论依据。【方法】通过基因克隆研究林麝胰岛素样生长因子(IGF-1)的基本功能和蛋白质结构,采用PCR-SSCP技术检测IGF-1基因在林麝中的多态性,分析其与产仔数的关联效应。【结果】①IGF-1基因序列全长465 bp,编码153个氨基酸残基,经生物信息学分析,发现该蛋白含有15个磷酸化位点,是一个分泌性蛋白,大部分位于细胞膜上,含有Insulin家族典型的保守结构功能域;②本试验设计IGF-1基因的PCR-SSCP扩增片段长度均为300 bp左右,引物扩增片段用10%的聚丙烯酰胺凝胶进行检测,发现扩增片段没有特异性条带。为证明PCR-SSCP扩增结果,选择其中一条引物对所得的毛发样品进行扩增,测序发现所有PCR产物的序列完全一致,没有多态性。【结论】研究表明不能选择IGF-1基因作为林麝的分子遗传标记,但为林麝产香性能的分子遗传标记选育提供了基本思路。