摘要：目的:确定黄芪药材中黄酮类成分超声提取的最佳前处理条件。方法:以毛蕊异黄酮苷和芒柄花素的含量为指标,采用正交设计法对超声时间(10、20、30min)、溶剂中甲醇含量(50%、75%、100%)以及提取次数(1、2、3次)等影响因素进行考察,确定最优提取条件,并同浸泡提取和索氏提取作比较。结果:提取黄芪药材中黄酮类成分的最佳前处理方案为甲醇超声处理2次,每次20min。超声提取的效率优于浸泡提取和索氏提取。结论:同其他方法比较,超声提取作为黄芪中黄酮类成分的提取方法,具有效率高、时间短和操作简便的优点。

摘要：目的采用3种方法提取微小隐孢子虫卵囊DNA,并用于PCR检测以进行比较。方法微小隐孢子虫卵囊经多次冻融加热破壁后,采用螯合树脂(Chelex-100)、酚/氯仿和基因组DNA纯化系统试剂盒3种方法提取微小隐孢子虫卵囊DNA,并根据微小隐孢子虫基因序列(L16996)设计一对寡核苷酸引物,分别对3种方法制备模板进行PCR扩增分析。Chelex-100提取的DNA也用于观察PCR检测的敏感性。结果3种方法制备的微小隐孢子虫卵囊模板用于PCR检测均获得1条446 bp条带,Chelex-100提取的DNA用于PCR检测的敏感性至少达0.5个卵囊。结论3种方法提取的微小隐孢子虫卵囊DNA均可用于PCR检测,Chelex-100法是一种高效而快速的微量提取DNA方法,适用于对隐孢子虫DNA的检测。

摘要：【目的】优化酶法提取玉竹多糖的工艺。【方法】在单因素实验的基础上,采用响应面分析法对影响酶法提取玉竹多糖得率的主要因素(酶解时间、酶解温度和酶用量)进行优化,建立了影响因素与玉竹多糖得率之间的函数关系。【结果】玉竹多糖酶法提取的最佳工艺为:木瓜蛋白酶加酶量为6.5 g/L,酶解温度为50℃、酶解时间为125 min,在此条件下,玉竹多糖得率达到100.89 mg/g,试验结果与模型预测值相符。【结论】Box-Behnken设计结合响应面分析法可以很好地对玉竹多糖酶法提取工艺进行优化。

摘要：背景:蝰亚科、蝮亚科和眼镜蛇科等蛇毒中存在着一类能直接溶解纤维蛋白(原)的酶,称为纤维蛋白(原)溶酶(纤溶酶),可做为溶解在心肌梗死、中风等期间形成的血栓的抗栓药物。目的:分离纯化江浙蝮蛇毒纤溶酶,并分析其部分生物化学和药理性质。设计:对照观察实验。单位:广西医科大学蛇毒研究所。材料:实验于2003-07/2005-06在广西医科大学蛇毒研究所完成。昆明种小鼠,体质量18～25g,平均(20±2)g,鼠龄三四个月,由广西医科大学实验动物中心提供。蛇毒冻干粉由广西医科大学蛇毒研究所提供。方法:应用DEAESepharoseCL-6B阴离子交换柱和HiPrepSephacrylS100柱分离纯化纤溶酶,以高效液相色谱仪和聚丙烯酰胺凝胶电泳检测纯度、相对分子质量,应用等电聚焦电泳测定等电点,然后测定氨基酸组分及部分药理性质。主要观察指标:纤溶酶相对分子质量、等电点和氨基酸组成,抑制剂对纤溶酶的作用,出血活性实验,纤溶酶对家兔体内抗凝活性的作用。结果:纳入30只鼠和12只兔全部进入结果分析。分离得到相对分子质量为59100,等电点为4.98,SDS-PAGE为一条带,高效液相色谱分析为单一峰的纤溶酶。该组分属于金属蛋白酶类。氨基酸组成分析表明它含较多的酸性氨基酸。有微弱的出血毒性。具有较强且持久的溶栓效果。结论:分离纯化得到了一种有微弱出血毒,具有较强抗凝活性的单一组分的酸性金属蛋白酶。

摘要：背景:基质金属蛋白酶是一类可促进肿瘤生长和转移的蛋白分解酶家族,其活性可被组织金属蛋白酶抑制因子所抑制。其中组织金属蛋白酶抑制因子3的抑制作用更为重要。目的:旨在从人胎盘中完全分离纯化天然组织金属蛋白酶抑制因子3,并建立组织金属蛋白酶抑制因子3酶联免疫测定方法。设计:单一样本观察。单位:沈阳医学院中心实验室。材料:人胎盘来自沈阳医学院附属奉天医院妇产科(家属知情同意);基质金属蛋白酶1来自富士药品研究所。方法:实验于2001-03/2002-05在沈阳医学院中心实验室完成。①利用4mol/L尿素Tris缓冲液(pH8.0),制备胎盘匀浆液。②匀浆液经CM52阳离子交换树脂层析和SephacrylS-200凝胶过滤二步柱层析。③SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测相对分子量及纯度。④Westernblotting鉴定纯化蛋白的性质。⑤免疫荧光法测定组织金属蛋白酶抑制因子3对基质金属蛋白酶1的抑制率。主要观察指标:①聚丙烯酰胺电泳法所示蛋白带相对分子质量。②Westernblot的显色结果。③组织金属蛋白酶抑制因子3对基质金属蛋白酶1的抑制率。④纯化后组织金属蛋白酶抑制因子3的回收率。结果:①人胎盘分离纯化的组织金属蛋白酶抑制因子3分为非糖化和糖化两种,相对分子质量分别为24000和27000两种。②非糖化和糖化的组织金属蛋白酶抑制因子3对基质金属蛋白酶1的抑制活性分别为1.1×1010mol/L和1.2×1010mol/L。胎盘来源的组织金属蛋白酶抑制因子3对基质金属蛋白酶1的抑制活性明显高于重组的组织金属蛋白酶抑制因子3。③二步层析后组织金属蛋白酶抑制因子3的回收率为23.4%。结论:人胎盘胞外基质来源的组织金属蛋白酶抑制因子3是由非糖基化蛋白和糖基化蛋白组成;两种纯化的组织金属蛋白酶抑制因子3对基质金属蛋白酶1具有明显的抑制活性,且显著高于重组金属蛋白酶抑制因子3。

摘要：背景:脂肪干细胞是目前组织工程研究中的热点种子细胞,但由于其缺乏特异性的表面标记,故目前尚缺乏有效的纯化方法。通过纯化取材的脂肪来提高干细胞纯度是一种简单可行的方法。目的:分析在原代培养脂肪干细胞前,如何对取材的脂肪组织进行纯化。设计、时间及地点:观察对比动物实验,于2007-12/2008-03在上海市第六人民医院上海市实验医学动物中心完成。材料:选用4周龄SD大鼠,用于获得腹股沟处的脂肪组织。方法:解剖SD大鼠腹股沟处取材的脂肪组织,游离出其表面血管及内部的血管分支。剔除内部血管的同时将分布在血管周围的椭圆形结节组织一并切除。主要观察指标:对椭圆性结节行苏木精-伊红染色,显微镜下观察以确定其组织类型。分别对经过纯化处理和未纯化处理的脂肪组织行苏木精-伊红染色,显微镜下观察其组织结构上的差异。结果:①椭圆性小结节经苏木精-伊红染色后在显微镜下观察证实为淋巴组织。②纯化的脂肪组织结构一致,细胞成分单一;未纯化的脂肪组织结构紊乱,细胞种类多样、成分复杂。结论:脂肪干细胞原代培养所用的脂肪组织中含有多种组织成分,在剔除脂肪组织表面的血管、皮肤和肌肉组织的同时应一并剔除组织内的血管及其周围淋巴结。

摘要：目的:依据蔓荆子中有效成分的理化性质,优选蔓荆子的提取工艺条件。方法:采用L9(34)正交试验设计,以药材中总黄酮和紫花牡荆素的提取率作为考察指标,采用UV法和HPLC法测定,所得结果进行方差分析,综合两个指标结果确定最佳工艺。结果:蔓荆子药材粗粉,用20倍量的95％乙醇作提取溶剂,回流提取3次,每次1 h为最佳工艺。结论:优选出的工艺稳定,方法可行。

摘要：目的:星点设计-效应面法优选槐花的提取工艺。方法:以乙醇浓度、料液比、提取温度、回流时间为自变量,芦丁提取量为因变量对自变量各水平进行多元线性回归和二项式拟合,用效应面法选择较佳工艺条件,并进行预测分析。结果:确定最佳工艺参数为乙醇浓度100%,料液比为1:30,提取温度为90.0℃,提取时间为210min,提取1次。预测值与预测值偏差率为2.21%,二项式拟合复相关系r=0.930。结论:星点设计-效应面法优选槐花的提取工艺,预测性良好。

摘要：解化学实验题的新思路陕西师大附中刘孝元高考化学试题中的实验题考查考生对实验的基本操作、观察记录实验现象、分析处理实验有关数据、处理实验安全、识别实验装置图、设计简单实验等方面的能力。因而实验题能考出考生的观察能力、操作能力、分析能力和设计能力的程度。...

摘要：合成一个有机化合物常常可以有多种路线,由不同的原料,通过不同的途径,获得我们要得到的目标分子,这些路线如何选择呢?根据什么原则进行选择呢?这是有机合成要解决的首要问题。比较简单的如丙酮的合成,我们比较熟悉的反应是,可以由丙烯催化氧化得到丙酮: