摘要：从患暴发性死亡的斑鳢病灶中分离出一株弹状病毒。取病鱼肝、脾、肾组织过滤液接种EPC、FHM细胞,连续传至第3代后28℃培养35h出现细胞病变(CPE),测得病毒半数细胞感染量为10 5.746/0.1 mL。将病变细胞制成超薄切片,透射电镜下观察到细胞质中存在大量呈子弹状的病毒颗粒,大小约53 nm×140 nm。用上述组织过滤液及F3代细胞培养病毒液回归感染健康斑鳢均能显示与自然发病鱼相似的症状,死亡率达100%。根据鳜鱼弹状病毒(Siniperca chuatsi rhabdovirus,SCRV)N蛋白保守序列设计的引物对斑鳢病毒的基因组RNA进行RT-PCR扩增,得到大小约400 bp的阳性片段。对该片段克隆、测序后与GenBank中序列进行BLAST比对,发现该基因序列与SCRV同源性最高,为94%。选取GenBank中已登录的病毒性出血败血症病毒(VHSV)、鳢弹状病毒(SHRV)、鲤春病毒血症病毒(SVCV)、鳜鱼弹状病毒(SCRV)、传染性造血器官坏死病毒(IHNV)、狂犬病毒(RV)、牙鲆弹状病毒(HIRRV)相关序列构建系统进化树,结果表明,该基因序列与SCRV聚为一支。由于该病毒粒子的形态大小与SCRV(100 nm×200 nm)存在一定差异,暂将其命名为斑鳢弹状病毒(CHRV)。

摘要：2003年国内某火鸡场发生了一种以侵害15～25日龄雏火鸡为主的急性传染病，主要表现为腹泻，十二指肠、直肠充血和出血，盲肠肿大，肠道内充满黄绿色内容物，死亡率约为10％～20％。取病死火鸡肝、脾、肠匀浆，取上清液通过尿囊腔接种15日龄SPF鸡胚。连续传代至第5代，收集接种后72h内死亡或存活鸡胚的卵黄和肠道，用于病毒分离和提纯。试验中发现该病毒能凝集兔红细胞，不能凝集鸡红细胞。经电镜观察，在病毒提纯液中发现有圆形或椭圆形、带花冠状纤突的病毒粒子，初步诊断为火鸡冠状病毒感染。进而设计针对火鸡冠状病毒S2基因引物，进行RT-PCR扩增，结果扩增出预期大小的片段。运用所分离病毒进行动物回归试验，感染火鸡出现与自然病例一致的临床症状和病理变化，并能从发病火鸡分离出该病毒。以上结果表明所分离的病毒为火鸡冠状病毒。此病毒的分离在国内尚属首例。

摘要：目的:从自然界中分离鉴定产 3α 羟类固醇脱氢酶(3α hydroxysteroiddehydrogenase, 3α HSD)的睾丸酮丛毛单胞菌,并在大肠杆菌(***.)中克隆表达 3α HSD。方法:将池塘泥浆样品接种到以雄酮为唯一碳源的培养基中,对分离到的菌株根据形态学和生理生化特征进行初步鉴定。为进一步鉴定该菌株,根据睾丸酮丛毛单胞菌中的 3α HSD的基因设计引物,PCR扩增细菌基因组DNA,将扩增片段插入到载体pET15b中,构建重组质粒pET15b,并在***. BL21 (DE3 )pLysS中进行诱导表达,对表达得到的蛋白进行鉴定并测定其酶活力。结果:一系列生化反应和培养特征证实,该菌与睾丸酮丛毛单胞菌的符合率为 85%,最适生长pH值为 7. 0,最佳生长温度为 30℃。在***. BL21 (DE3 )pLysS中经诱导表达得到了相对分子质量约为 29×103具有酶活性的融合蛋白,可催化雄酮(3α 羟类固醇)脱氢。结论:从池塘泥浆中分离到一株产 3α HSD的睾丸酮丛毛单胞菌,并在***.中表达得到了具有酶活性的融合 3α HSD。这为利用金属螯和亲和层析纯化融合 3α HSD,并进一步建立以其为工具酶的血清总胆汁酸酶循环测定方法奠定了基础。

摘要：表达了基因重组抗CD20嵌合抗体并对其生物学活性进行了初步鉴定。设计合成轻、重链可变区序列;提取血液RNA,通过RT-PCR得到人κ、IgG1的轻、重链恒定区序列。运用重叠延伸PCR,连接可变区与恒定区,将轻、重链基因连接至pIRES双表达载体。将质粒以阳离子脂质体转染CHO细胞,ELISA挑选阳性克隆,共获得7株表达较高的克隆,表达量约为2mg/L。扩大培养阳性克隆anti-CD20-1B3,收获上清,以蛋白A进行亲和层析纯化表达蛋白。SDS-PAGE检测表明纯化纯度达到95%,蛋白相对分子量与理论值吻合。以CD20+细胞Raji、Daudi、Ramous检测,表明该抗体能与CD20抗原特异性结合,体外杀伤试验说明抗体能够杀伤CD20+淋巴瘤细胞。

摘要：佤族是没有文字的,甚至也没有为后人留下什么古老的文物以证明自己的古老。因此,这个崇尚年轻的古老民族为后人留下了许多难以解开的迷。沦源崖画就是其中的一个。沦源崖画因为发现于云南西南部沦源县的崖壁上而得名。据初步鉴定,这些分别挂在十四堵崖壁上的文化在连绵的群山中沉睡了3000年之久!至于崖壁上用一串串人、牛、猴、象等图案组合成的画面向人们展示了什么却不得而知。3000年有多长,在这里繁衍了一代又一代后人,的阿佤人不知道。

摘要：本研究旨在建立一种快速鉴定分枝杆菌的三重PCR方法,并比较分析其在临床检测中的可靠性。根据已发表的结核分枝杆菌、牛分枝杆菌和非洲分枝杆菌rv3036c基因,结核分枝杆菌rv1970f基因(RD7)和牛分枝杆菌pncA基因的序列,改造并设计合成了3对特异性扩增引物,建立了一种能对分枝杆菌样品进行初步鉴定的三重PCR方法。结果显示该方法可针对rv3036c、rv1970f和pncA基因分别扩增出大小为500、125和249bp的目的片段,能特异性检测出结核分枝杆菌(500和125bp两条带)和牛分枝杆菌(500和249bp两条带),并可将结核分枝杆菌、牛分枝杆菌与其他分枝杆菌加以区分。本方法的检测灵敏度为50pg/μL模板基因组DNA。对86株抗酸染色阳性菌进行三重PCR鉴定,鉴定结果与细菌16SrDNA和ITS序列测定结果一致,检测准确度为100%,优于生长特征和生化试验鉴定。

摘要：为了制定火灾后桥梁的维修措施,需对火灾后桥梁进行检测评估。以某火灾后钢筋混凝土桥梁为背景,介绍该桥检测评估主要内容。根据混凝土颜色改变、火灾裂缝、锤击反应、混凝土脱落、受力钢筋露筋、受力钢筋粘结性能及结构变形等方面对火灾后桥梁进行初步鉴定。初步确定受损区域等级后,采用表观检测法和热分析法相结合的方式对火灾温度进行评定,采用钻芯法对混凝土强度进行测定,对露筋区域的钢筋进行钢筋屈服强度测试,结合各项测定结果,综合判定混凝土及钢筋刚度满足设计要求。最后为检验桥梁火灾后的承载能力,对桥梁进行了静动载试验。

摘要：用自行设计的嗜酸乳杆菌16 S r RNA的特异性引物和建立的PCR方法对初步鉴定为嗜酸乳杆菌的鸡源分离株进行检测。PCR检测结果表明分离株和嗜酸乳杆菌参考株扩增出大小一致的目的片段。

摘要：轻钢结构厂房因其多方面的明显优势而使用广泛,但其对火灾的敏感度较高,因此可靠的表面防火涂料非常重要。2009年标准化协会推出《火灾后建筑结构鉴定标准》(CECS252:2009),文章采用此标准并结合一处轻钢结构厂房经火灾后的结构进行了初步鉴定和详细鉴定的案例,严格分级和提出对钢构件的初步处理意见,供类似鉴定工程借鉴参考。

摘要：文章结合工程实例,对火灾后钢筋混凝土结构进行初步鉴定和详细鉴定,并提出相应的加固处理措施。