摘要：目的 :建立一种新的前胶原基因探针制备方法 ,并用其检测HSC的前胶原mRNA表达。方法 :从NCBIGeneBank查询Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ型前胶原基因的序列 ,根据基因序列用OLIGO软件设计其引物 ;RT PCR扩增基因 ,并用不对称PCR方法和DIG dUTP标记前胶原基因探针 ,用其原位杂交检测HSC前胶原基因表达。结果 :用所设计的引物和RT PCR扩增得到目的基因 ,制备了DIG标记的前胶原基因探针 ,并用其检测到HSC的前胶原基因表达。结论 :建立了一种新的、较简易的前胶原基因探针标记方法 。

摘要：目的 :为解决中晚期肝癌临床切除率低、手术创伤大、转移率高等问题 ,设计了选择性胆管支、门静脉支联合结扎的方法 ,对大鼠移植性肝癌模型进行了治疗性研究 ,并观察了瘤周纤维增生特点。方法 :应用 R- 35大鼠肝癌瘤株制备 Wister大鼠移植性肝癌模型 ,分组实施含瘤肝叶的门静脉支胆管支联合结扎术及对照手术。对比观察大鼠病死率、转移率、治疗成功率 ;原位杂交检测α1( I)、α1( IV)型前胶原 m RNA表达及定位情况。结果 :手术组瘤周纤维包裹紧密与对照组相比病死率 31 .3%∶ 68.8%、腹腔转移率 31 .3%∶ 62 .5 %、肝内转移率 1 2 .5 %∶ 43.8%、腹腔转移合并肝内转移率 6.3%∶ 37.5 %、肺转移率 0∶ 1 8.8%、治疗成功率为 43.8% ;癌周纤维化早期 ,Ito细胞及 MF主要对α1( IV)前胶原 m RNA做出表达 ,中期α1( I)前胶原 m RNA杂交信号开始出现并增多 ,后期二者趋于稳定。结论 :联合结扎法可使肝癌团块周围发生广泛的肝纤维化 ,有效的包裹和限制了肝癌细胞团的膨胀性生长 ,显著地降低了肝癌病死率、腹腔和肝内转移率及肺转移率 ;Ito细胞是癌周纤维化过程中胶原生成的先驱细胞 ,激活后的 Ito细胞可进一步转变为 MF和 Fb,成为癌周纤维化过程中的主要胶原生成细胞 。