摘要：该文旨在设计并合成一系列升麻素衍生物,并筛选出活性较好的衍生物,并进一步对其抗类风湿性关节炎的作用机制进行初步研究。采用药物拼合原理合成升麻素有机酸酯衍生物和升麻素三氮唑衍生物,对其结构进行鉴定;筛选升麻素衍生物对脂多糖（LPS）诱导的RAW 264.7细胞的抗炎作用;并构建完全弗氏佐剂（CFA）诱导的大鼠佐剂性关节炎模型,测定大鼠体质量、踝关节肿胀度、关节炎指数、脏器指数、炎症因子和相关蛋白的表达水平,采用苏木素–伊红（HE）染色观察踝关节滑膜组织病理变化,最后将化合物与核心靶点进行分子对接验证。结果显示,共得到21个升麻素衍生物,经鉴定均为新化合物,在6.25μmol/L～50μmol/L药物浓度下,这些化合物对RAW264.7细胞存活率均在≥85%以上,有5个化合物NO抑制率的IC50值优于升麻素和地塞米松(地塞米松IC50为13.10μmol/L)。与空白组相比,模型组大鼠体质量极显著降低（P<0.001）、足趾肿胀度显著提高（P<0.01）、血清炎症因子水平显著提高（P<0.05）、脏器指数显著提高（P<0.05）。与模型组相比,化合物15高剂量组的大鼠体质量显著提高（P<0.01）、足趾肿胀度显著降低（P<0.01）、血清炎症因子水平显著降低（P<0.05）、脏器指数显著降低（P<0.01）,其中化合物15高剂量组疗效较好,且优于甲氨蝶呤。与模型组相比,化合物15高剂量组关节滑膜病坏、炎性细胞浸润经给药后得到明显改善,此外该组大鼠踝关节滑膜组织中p-p38/p38表达水平显著降低（P<0.01）、p-ERK/ERK表达水平极显著降低（P<0.001）和Cleaved Caspase-3表达水平显著降低（P<0.01）,化合物15与关键靶点具有较好的亲和力。该研究得出,化合物15可治疗由完全弗氏佐剂（CFA）诱导的大鼠佐剂性关节炎,其作用机制可能与调控MAPK信号通路有关。

摘要：目的:建立HPLC-DAD法同时测定中药防风中升麻苷、升麻素、5-O-甲基维斯阿米醇苷、印枳树皮苷、防风灵和亥茅酚苷6个主要有效成分的含量。方法:采用正交设计优化提取方法,以提取时间、方法、次数、溶剂比为主要影响因素,以6个分析物的总量为评价指标;分析物的色谱分离用Dikma DiamonsilTMC18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)、Dikma Easy Guard C18保护柱(20 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇-水为流动相,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min-1,检测波长为254 nm,柱温为25℃。结果:确定最佳提取方法为甲醇30倍量回流提取2次,每次2 h。6个分析物的线性范围分别为:升麻苷50～1000 mg·L-1(r=0.9999),升麻素10～200 mg·L-1(r=0.9999),5-O-甲基维斯阿米醇苷20～500 mg·L-1(r=0.9999),印枳树皮苷5～100mg·L-1(r=0.9995),防风灵5～100 mg·L-1(r=0.9991),亥茅酚苷10～200 mg·L-1(r=0.9995);平均加样回收率(n=3)均在95.6%～106.8%,RSD均在1.3%～4.8%。结论:该方法准确,灵敏度高,重复性好,成本低,可用于防风中上述6个主要有效成分的含量测定。