摘要：设计合成了一种用于检测半胱氨酸的新型荧光探针乙二醛(N-羟乙基-1,8-二甲酰亚胺-4-萘基)单腙(NAD),该荧光探针对半胱氨酸表现出较高的灵敏度和选择性.当半胱氨酸加入NAD溶液中,会形成分子内氢键,抑制C■N的异构化,导致荧光增强.此外,探针NAD可应用于细胞内半胱氨酸的检测,表明该类型探针在生物检测应用方面具有较大的潜力.

摘要：糖蛋白与糖肽在复杂生物体系中丰度一般较低,为了在糖蛋白质组学研究中深入和全面分析鉴定糖基化位点与糖链,通常需要进行富集前处理操作。该文设计并合成了一种半胱氨酸基麦芽糖修饰亲水硅胶分离介质(Cys-Mal@SiO_2),将其装填入固相萃取柱中制备新型亲水固相萃取柱。在以人免疫球蛋白G酶解液为样品进行富集鉴定时,Cys-Mal@SiO_2鉴定糖肽的质谱信号强度和信噪比比半胱氨酸修饰硅胶(Cys@SiO_2)、麦芽糖修饰硅胶(Mal@SiO_2)和商品化ZIC-HILIC更高。在复杂的鼠肝蛋白质提取物的糖蛋白质组学分析中,Cys-Mal@SiO_2共鉴定出1 551条糖肽,属于466个糖蛋白的906个N-糖基化位点,比Cys@SiO_2和Mal@SiO_2鉴定糖肽数、蛋白质数和N-糖基化位点数分别多211、67、127个和289、76、193个。将Cys-Mal@SiO_2成功应用于低丰度糖肽的选择性富集与鉴定,在糖蛋白质组学研究中体现出良好的应用潜力。

摘要：半胱氨酸是人体重要生物成分,一种新型的吲哚菁类比率型荧光探针的水平与多种疾病相关,对半胱氨酸浓度进行快速、准确的响应,就显得尤其重要.本研究基于经典的半胱氨酸响应机理,半胱氨酸的巯基与丙烯酸酯发生迈克尔加成,再进一步发生分子内环化,可特异性识别半胱氨酸.设计合成了一种新型比率型荧光探针,结果发现,该探针能特异性识别半胱氨酸,检出限可达到75 nmol·L^-1,在30 min内能完全响应,稳定性好,能稳定存在于细胞内,对细胞毒副作用小.因此,该探针在解决了水溶性差这一问题的基础上,能快速地对细胞内半胱氨酸的浓度进行精确分析,为多种疾病的研究提供了新手段,为化学材料的发展提供了新的思路.

摘要：半胱氨酸(Cysteine,Cys)作为生物体内一种重要的含巯基氨基酸,与细胞代谢、氧化还原稳态密切相关,然而过量的半胱氨酸可能会导致类风湿性关节炎、阿尔兹海默病等。因此,开发一种能选择性识别半胱氨酸的荧光探针具有重要的研究意义。本文设计合成了一种以姜黄素-二氟硼为基本骨架,2-氯-5-硝基苯甲酰基为识别位点的荧光探针分子1,并将其用于半胱氨酸的识别。结果表明,探针能高选择性识别Cys,荧光强度与Cys浓度在10~70μmol·L^(-1)范围内呈良好的线性关系,检出限为2.9μmol·L^(-1)。同时,Cys的加入会引起探针溶液颜色肉眼可见的显著变化,由黄色变为无色。此外,该探针能模拟检测水样中添加的半胱氨酸,在自来水、河水样品中的半胱氨酸的回收率为98%~109%。

摘要：模仿热反应肉味香精制备体系,对猪肉酶解液中半胱氨酸、其它氨基酸、还原糖间的Maillard反应进行研究。根据初级Maillard反应阶段形成的中间体,设计4类反应体系:"半胱氨酸+木糖+甘氨酸"、"半胱氨酸-Amadori+甘氨酸"、"2-木糖基噻唑烷-4-羧酸+甘氨酸"、"甘氨酸-Amadori+半胱氨酸"。采用固相微萃取/GC-MS分析4类体系热反应产物的挥发性成分,共鉴定出含硫类、含氮杂环、呋喃类28种化合物。通过GC-O嗅闻发现对肉香味贡献较大的主要为含硫类和吡嗪类化合物。比较各类化合物含量及化合物种类,结果在含有酶解液的复杂反应体系中,与甘氨酸和木糖发生反应形成甘氨酸-Amadori途径相比,初级Maillard反应阶段,半胱氨酸和木糖发生反应形成2-木糖基噻唑烷-4-羧酸及半胱氨酸-Amadori中间体,是半胱氨酸产生肉香味物质的重要途径。

摘要：巯基氨基酸水平异常与多种疾病相关,其检测仍存在一定的局限,研究检测巯基氨基酸的荧光探针具有一定的价值.以苊为原料合成了61个1,8-萘酰亚胺衍生物,研究了该类化合物的荧光性能及其作为半胱氨酸含量测定的荧光探针的可能性.紫外光谱分析表明1,8-萘酰亚胺衍生物上N-取代基对最大吸收波长无明显影响;荧光光谱(FL)的性能测试显示硝基萘酰亚胺衍生物N-甲基-4-硝基-1,8-萘二甲酰亚胺(4a)~4-硝基-N-间氟苯基-1,8-萘二甲酰亚胺(4s)无荧光,氨基萘酰亚胺衍生物N-甲基-4-氨基-1,8-萘二甲酰亚胺(5a)~4-氨基-N-间氟苯基-1,8-萘二甲酰亚胺(5s)有强烈黄色荧光,而马来酰亚胺萘酰亚胺衍生物N-甲基-4-(1H-吡咯-2,5-二酮-1-基)-1,8-萘二甲酰亚胺(6a)~4-(1H-吡咯-2,5-二酮-1-基)-N-(间氟苯基)-1,8-萘二甲酰亚胺(6s)有微弱蓝色荧光,其中7个马来酰亚胺萘酰亚胺衍生物探针对半胱氨酸(Cys)溶液有荧光点亮效应.对7个探针加入21种其它氨基酸作为干扰项的测试显示探针对半胱氨酸检测有良好的选择性.研究了不同pH值下荧光强度,检测探针与半胱氨酸的响应时间,以及探针溶液荧光强度随氨基酸浓度的变化,其线性相关系数均达到0.95以上,探针对半胱氨酸的各项指标均表现出了较好的灵敏性.Hela细胞荧光成像验证了7个荧光探针应用于细胞内半胱氨酸的检测同样效果良好.

摘要：基于三苯胺母体的强供电子能力,设计合成了一种共轭性良好的新型半胱氨酸(Cys)荧光探针。采用荧光光谱法和紫外-可见光谱法研究了目标探针T-Probe对半胱氨酸(Cys)的光谱响应。结果表明:目标探针分子与Cys作用后,荧光发射波长有约20 nm红移,荧光强度发生明显的增强,在365 nm紫外灯下,溶液由青色变为蓝色;探针分子选择性识别Cys的检测限为98.4 nmol/L,且灵敏度较高。

摘要：报道二肽和三肽α－酮酸酯的设计、合成和对半胱氨酸蛋白酶的抑制作用。它们的ｐ２位都是亮氨酸，Ｐ１与Ｐ３位是不同的氨基酸残基，具有不同的末端氨基保护基和不同的酯基。Ｐ１位氨基酸残基的性质对抑制能力有影响，由二肽扩大到三肽对抑制能力无显著提高，改变氨基保护基对不同的二肽和三肽系列有不同影响，改变酯基性质对抑制能力略有影响。这一系列α－酮酸酯是半胱氨酸蛋白酶ｃａｌｐａｉｎ的有效、专一抑制剂。

摘要：【目的】研究环酰亚胺水解酶(Imidase,CIH)中的两个半胱氨酸残基的反应性及功能。【方法】设计了3个半胱氨酸突变酶:CIH7,108、CIH7、CIH108。将天然酶以及突变酶基因分别与麦芽糖结合蛋白(MBP)基因在大肠杆菌(Escherichia coli)中进行融合表达,融合蛋白经纯化后得到了电泳纯的样品。使用5,5'-二硫代双(2-硝基苯甲酸)(DTNB)对天然酶CIH的巯基基团进行修饰,并分析了DTT对分子状态的影响。进一步研究了经H2O2处理后CIH及其突变酶的锌离子结合能力及分子状态。【结果】酶活测定表明CIH7,108和CIH7的活力基本丧失,而CIH108仍保持了72%的酶活性。CIH中的两个半胱氨酸残基以游离形式存在,不形成链内或链间二硫键。CIH与CIH108为四聚体结构且具有一定的锌离子结合能力,CIH7,108为多聚体,CIH7为单体及多体的混合物且都不具备锌离子结合能力,随着H2O2浓度的增加,CIH中的链内二硫键及CIH108中的链间二硫键逐渐增加。【结论】说明Cys7是结合锌离子和稳定CIH分子结构的必要残基。

摘要：本试验旨在研究饲粮半胱氨酸水平对离乳期梅花鹿生长性能、营养物质表观消化率、血清生化指标和抗氧化能力的影响,以确定离乳期梅花鹿饲粮半胱氨酸的适宜水平。采用单因素试验设计,将16只3月龄、平均体重(24.42±3.86) kg的雄性梅花鹿仔鹿随机分为4组,每组4个重复,每个重复1只。对照组(Ⅰ组)饲喂半胱氨酸水平为2.8 g/kg的基础饲粮,试验组分别饲喂半胱氨酸水平为4.8 (Ⅱ组,基础饲粮+2.0 g/kg半胱氨酸)、6.8 (Ⅲ组,基础饲粮+4.0 g/kg半胱氨酸)和10.8 g/kg(Ⅳ组,基础饲粮+8.0 g/kg半胱氨酸)的试验饲粮。预试期15 d,正试期30 d。结果表明:1)与Ⅰ组相比,Ⅳ组的平均日采食量显著降低(P<0.05)。2)与Ⅰ组相比,Ⅱ组和Ⅳ组的有机物和干物质表观消化率显著提高(P<0.05),Ⅳ组的中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维表观消化率显著提高(P<0.05)。3)与Ⅰ组相比,Ⅳ组的血清低密度脂蛋白含量显著提高(P<0.05),Ⅲ组的血清碱性磷酸酶活性显著提高(P<0.05)。4)与Ⅰ组相比,Ⅱ组的血清过氧化氢酶活性显著提高(P<0.05),Ⅱ组、Ⅲ组和Ⅳ组的血清丙二醛含量显著降低(P<0.05),Ⅱ组和Ⅳ组的血清谷胱甘肽过氧化物酶活性显著提高(P<0.05)。由此可见,在本试验条件下,饲粮半胱氨酸水平为4.8 g/kg时可提高离乳期梅花鹿的干物质和有机物表观消化率及抗氧化能力。