摘要：采用高通量测序法从单环刺螠基因组中开发微卫星标记,并通过一个秦皇岛单环刺螠野生群体对其进行多态性评价,利用获得的多态性引物对秦皇岛、烟台、潍坊、青岛、大连5个不同海区的野生单环刺螠群体进行了遗传多样性及遗传结构分析。结果表明:本实验设计的50个微卫星标记能稳定扩增的有38个,其中22个微卫星位点在5个群体中均表现为高多态性,等位基因数(Na)介于24—44之间,多态信息含量(PIC)介于0.921—0.967之间。5个群体总的平均有效等位基因数(N_e)范围为6.629—8.850,平均观测杂合度(Ho)和平均期望杂合度(He)范围分别为0.790—0.912、0.851—0.896,大连群体的杂合度最大(H_e=0.8962),潍坊群体的最小(H_e=0.8510),其中有12个微卫星位点在不同群体中出现显著偏离Hardy-Weinberg平衡的现象。平均遗传分化指数(FST)表明,群体分化水平处于中等分化水平(FST值为0.0880—0.1136);聚类分析显示烟台群体先与青岛群体聚为一支,再与秦皇岛群体聚类,然后跟潍坊群体聚为一支,大连群体单独聚为一支;遗传距离模式(IBD)显示单环刺螠群体的地理距离与遗传距离间不存在显著的线性关系。本研究开发的22对微卫星标记可以用于单环刺螠遗传结构分析研究,为下一步单环刺螠种质资源保护和人工繁育提供参考依据。

摘要：单环刺螠纤溶酶(UFE)是由本实验室分离纯化出的1组包括4个分子量组分的纤溶酶,各个组分均有提高受试机体继发性纤溶活性的能力,并具有显著的抗凝活性和纤溶活性以及较好的生物安全性。根据该纤溶酶Ⅱ的N-末端氨基酸序列设计简并引物,通过3-’RACE PCR获得该组分蛋白质的部分编码序列,进一步通过5-’RACE PCR获得单环刺螠纤溶酶基因全长cDNA编码序列906 bp,其中开放阅读框795 bp。该基因全长cDNA BLASTx比对结果表明,其编码产物与丝氨酸蛋白酶家族成员具有较高的同源性,通过PROSITE的ScanProsite软件分析得出,该蛋白质含有1个trypsindomain(第32-264位),在NCBI的CDD数据库中分析结果显示该酶是1种胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶。

摘要：利用热水浸提的方法进行单环刺蜢（海肠）废弃内脏中多糖的提取。采用单因素试验和L9（3^4）正交试验设计，研究不同pH值、料液比、提取时间和提取温度对单环刺蜢内脏多糖提取率的影响。并采用Fenton体系测定单环刺蜢内脏多糖对羟自由基（·OH）的清除作用。单环刺蜢内脏多糖提取的最佳工艺条件为pHl0、料液比1：40（g／mL）、时间3h、温度60℃。单环刺蜢内脏多糖在质量浓度为50μg／mL时，对羟自由基清除能力可达60％，且具有剂量效应。

摘要：为更好地利用单环刺螠原料,开发了一种天然、美味的调味料。文章以单环刺螠体壁及内脏的酶解液为主要原料,基于美拉德反应,以氨基酸态氮减少量和感官评分为评价指标,利用Plackett-Burman试验在单因素试验的基础上筛选出显著影响因素,结合Box-Behnken中心组合设计进行响应面优化试验。结果表明,单环刺螠调味料的最佳工艺条件为葡萄糖:木糖1:2、p H7、反应温度113℃,在此条件下,调味料呈现出纯正的海鲜风味,同时具有明显肉香和酱香。

摘要：为探索单环刺螠担轮幼虫对温度、盐度变化的适应性,本研究设计了10、13、16、19(对照)、22、25、28℃共7个温度实验组,8、14、20、26、32(对照)、35共6个盐度实验组,及温度、盐度正交实验(温度13、16、19、22℃分别与盐度14、20、26、32、35做交互)。结果表明:温度、盐度对单环刺螠担轮幼虫的生长、存活具有显著影响;综合生长、存活指标,得到担轮幼虫的较适温度范围为13~22℃,水温19℃生长、存活最优;由19℃向高温突变较低温突变,担轮幼虫存活率较低但生长较快;但19℃向上突变幅度为6℃时担轮幼虫短时间内死亡,向下突变幅度为9℃时存活率低(10℃实验组96h存活率仅为12.1%);担轮幼虫的较适盐度范围为20~35,盐度32生长最优、盐度26存活最优;由盐度32向低盐度突变较高盐度突变,担轮幼虫生长较快、存活率较高;但盐度32向下突变幅度为24时担轮幼虫短时间内死亡;盐度是影响担轮幼虫生长及存活的主要因子。本研究得出了单环刺螠担轮幼虫生长及存活的适宜温度、盐度变化范围,为单环刺螠人工育苗提供重要的基础资料。

摘要：以单环刺螠内脏为原料,利用酶解法提取制备单环刺螠内脏多肽。在单因素试验的基础上,根据BoxBehnken的中心组合试验设计原理,运用Design Expert8.0.5数据统计分析软件,采用三因素三水平的响应面分析法,以多肽得率为响应值,研究加酶量、时间、温度对单环刺螠内脏多肽得率的影响,并优化提取工艺。确定酶解法提取单环刺螠内脏多肽的最佳工艺条件为:料液比1∶10(g/mL),加酶量3.22%,酶解时间3.17 h,温度44.3℃,在此条件下水解度可达17.79%。

摘要：目的以单环刺螠为研究对象,克隆其泛素基因并分析其器官表达规律,为其功能的进一步研究提供理论依据。方法采用BLAST方法在单环刺螠转录组中获得泛素基因序列,设计引物扩增其开放阅读框(open reading frame,ORF)并经测序对其进行验证,随后对序列进行多序列比对和进化分析,进一步确定序列的准确性,最后采用q RT-PCR方法对泛素基因在单环刺螠各器官的表达规律进行分析。结果克隆获得单环刺螠泛素基因,其ORF为234 bp,编码76个氨基酸,氨基酸序列与其他物种的泛素极其相似。单环刺螠泛素基因在体腔液中表达量最低,在后肠和中肠的表达量是体腔液表达量的2. 39倍和2. 78倍,体壁的表达量是体腔液表达量的3. 46倍,而肛门囊表达量达到体腔液表达量的4. 55倍。结论本研究成功克隆获得单环刺螠泛素基因,其在单环刺螠各器官的表达规律:体腔液<肠道<体壁<肛门囊。

摘要：为了制得高档单环刺螠调味品,使其基料营养更丰富、游离酸氨基酸含量最大化,以单环刺螠为原料,研究了酶的种类、料液比、酶解时间、酶解温度、pH值及超声时间对水解度的影响。首先,通过单因素试验探究了水解度与各个因素的关系,并根据单因素试验结果,通过Aimplex lattice试验设计方法优化单环刺螠的酶解工艺。结果表明,超声时间54.95 min,料液比1∶52,酶添加量3.17%,酶解时间3.16 h,pH值8.58,酶解温度50.48℃,此时的水解度为31.48%,效果最佳。通过单因素试验和响应面试验优化出最佳超声条件为酶解时间3.16 h,pH值8.58,酶解温度50.48℃,此时的水解度(DH)值为34.19%。