摘要：目的探索肌肉生长抑素(myostatin,MST)及其抑制因子卵泡抑素(follistatin,FST)作为生物学标志物评估肌少症的临床价值。方法设计回顾性横断面研究,招募2021年在上海华东医院体检的20~89岁女性350人。所有研究对象接受问卷调查,行肌肉质量、脂肪量、骨密度、握力和步速测定,空腹抽血测血清MST和FST。结果血清MST随增龄变化不明显,血清FST随增龄升高。≥60岁女性中,MST与全身肌肉质量及四肢骨骼肌质量指数(appendicular skeletal muscle index,ASMI)呈正相关(r=0.236,P=0.041;r=0.289,P=0.014),FST与ASMI呈负相关(r=-0.265,P=0.030)。在校正年龄、体重指数、髋部骨密度、全身脂肪量后,多元逐步回归分析显示,仅FST与ASMI独立相关(β=-0.238,P=0.006),MST与ASMI不相关。以肌肉质量减少为状态变量,以血清FST水平为检验变量绘制受试者工作特征曲线,曲线下面积为0.753,FST截断值为17.49 ng/mL时,约登指数最大为0.46,灵敏度为77.3%,特异度为68.7%。将≥60岁女性按血清FST水平分为3组,与FST处于上三分之一的女性相比,FST处于下三分之一的女性罹患肌少症的风险显著减少(OR=0.098,P=0.036)。结论在老年女性中,FST与肌肉质量的相关性好,有望作为评估肌肉质量的生物学标志物。

摘要：参照GenBank中长角血蜱致病性Okayama株卵泡抑素基因的核苷酸序列(GenBank Accession ***248886)设计合成一对引物,从本实验室保藏的单克隆洁净长角血蜱饥饿成蜱中快速提取总RNA,通过RT-PCR扩增出814bp的卵泡抑素基因,序列比对结果显示:与长角血蜱致病性Okayama株的核苷酸序列及氨基酸序列一致性分别为97.8%和99%,将其亚克隆到表达载体pGEX-4T-1中进行表达,GST融合重组蛋白预期分子量为57kD。表达重组蛋白经MagneGSTTM蛋白纯化系统纯化后作为抗原分别与抗不同发育阶段长角血蜱(卵、幼蜱、若蜱、成蜱)多克隆抗体作为一抗进行免疫印迹,结果表明:与长角血蜱卵制备的多克隆抗体有很强的免疫反应,而与其他发育阶段(幼蜱、若蜱、成蜱)饥饿长角血蜱制备的多克隆抗体反应性很弱。以上结果表明:长角血蜱卵泡抑素蛋白在长角血蜱产卵及卵成熟发育时期的表达水平较其他发育阶段(幼蜱、若蜱、成蜱)的蛋白表达水平高。

摘要：根据猪卵泡抑素(follistatin,FS)基因编码区序列(GenBank登录号:M36512.1)设计并合成1对引物,经PCR扩增获得了FS基因成熟肽序列,将其克隆入pMD18-T载体并转化*** DH5α感受态细胞,进行PCR、双酶切及测序验证。然后将其克隆到表达载体pRSET-A的BamHⅠ和HindⅢ酶切位点之间,构建重组质粒pR-FS并转化*** BL21(DE3)感受态细胞,再经PCR、双酶切和测序验证。转化重组质粒pR-FS的重组菌经IPTG诱导后的表达产物进行SDS-PAGE分析,分子质量与预期相符,为26.1ku左右,经0.2mmol/L IPTG诱导3h之后表达量达到最高,约占总菌体蛋白的30%。表达产物可经Ni-NTA凝胶纯化。以上结果表明正确完成了猪FS基因成熟肽序列的克隆及其在大肠杆菌中的表达及纯化。

摘要：猪卵泡抑素基因(Follistatin,FS)具有调控动物生殖活动和肌肉生长的生物功能,但对猪的研究报道很少。本研究克隆了猪卵泡抑素基因两种接拼形式、比较分析其蛋白结构特征、进化关系和组织表达特性。研究结果表明,通过两对引物成功克隆了猪卵泡抑素基因的1045bp(FS-L)和964bp(FS-S)的两种接拼形式;与Genbank中的序列比对表明FS-L和FS-S的CDS序列与人、牛、家鼠、沟鼠、斑马鱼的卵泡抑素基因序列相似性在80%以上。对两种蛋白质结构域的比较发现,FS-S蛋白相比FS-L蛋白而言缺失了一个FS结构域。同源性分析表明,猪与牛的亲缘关系较近,与人、小鼠、沟鼠和斑马鱼的关系相对较远。组织表达分析表明,两种拼接形式在梅山猪不同组织中的表达存在差异,FS-L基因在梅山猪肌肉及生殖系统等组织中均有表达,而FS-S基因则主要在生殖系统中表达。表明FS-L在肌肉生长中发挥作用,而FS-S主要调控动物的生殖功能。

摘要：目的 探讨高强度间歇游泳训练对高脂饮食诱导的肥胖大鼠心肌肌肉生长抑制素(MSTN)及其抑制剂卵泡抑素(FST)蛋白表达的影响。方法 按照实验设计将24只雄性SD肥胖大鼠分为高脂饮食对照组(HS,n=9)和高脂饮食间歇训练组(HI,n=15)。HI组肥胖大鼠进行8周高强度间歇游泳训练后,称量所有肥胖大鼠的体重和心重,采用蛋白质印迹法(Western Blot)检测所有肥胖大鼠心肌中MSTN和FST的蛋白表达。结果进行8周高强度间歇游泳训练后,与HS组肥胖大鼠相比,HI组肥胖大鼠心肌MSTN的蛋白表达显著增加(0.001≤p0.05)。结论 在高强度间歇游泳训练的干预下,肥胖大鼠心肌MSTN和FST的蛋白表达显著增加,体重明显降低,但心脏重量却无明显变化,这可能与心脏的代偿性保护有关;在心肌中,FST依然是MSTN信号通路上的拮抗剂,MSTN在心肌中的信号通路可能与骨骼肌中的相同或类似。

摘要：卵泡抑素(Follistatin,FS)可通过旁分泌和自分泌的方式抑制促卵泡素(FSH)的分泌,从而影响动物的繁殖机能。本研究拟通过分析水牛的FS cDNA序列来分析其繁殖性能低的可能原因。试验参照GenBank公布的奶牛的FS cDNA序列设计引物,通过RT-PCR技术扩增目的基因,再将其亚克隆到pMD-18T克隆载体进行测序。测序结果显示本试验成功获得了水牛的FS cDNA序列。同源性及进化树分析提示FS在哺乳动物进化上高度保守。研究发现两处氨基酸的突变,这可能影响FS正常的生物学功能发挥,从而影响水牛的繁殖机能。