摘要：依据淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒(LCMV)主要保护性抗原CD8+T细胞表位VRRPQASGVYMGNLTAQ和卵清白蛋白(OVA)CD8+T细胞表位SIINFEKL,设计、合成两条编码LCMV和OVACD8+T细胞表位的寡核苷酸片段,经退火后,克隆入绿色荧光蛋白表达质粒pYAGFP,经PCR扩增和序列测定分析,证实成功构建T细胞表位与绿色荧光蛋白融合表达的重组质粒pYAGFPL＿O,将此重组质粒pYAGFPL＿O转化减毒鼠伤寒沙门氏菌X4550,获得重组沙门氏菌X4550(pYAGF PL＿O)。用SDS＿PAGE电泳测得重组菌表达的融合蛋白约为30kD。同时,荧光显微镜下观察到X4550(pYAGFPL＿O)发出黄绿色荧光。这些结果表明LCMV和OVAT细胞表位已成功表达。重组菌X4550(pYAGFPL＿O)的获得为研究沙门氏菌载体携带外源抗原的T细胞应答规律及调控机理打下了重要基础。

摘要：目的:研究姬松茸中分离纯化的低分子量多糖(ABP-AW1)促进卵清白蛋白(ovalbumin,OVA)抗原诱导小鼠脾淋巴细胞亚群效应细胞的应答格局的影响。方法:ABP-AW1和OVA皮下两点免疫ICR小鼠,于0,15 d各免疫一次,第28天分离培养脾淋巴细胞,MTT法测定脾淋巴细胞增殖,FCM(flow cytometry)分析免疫鼠脾中T淋巴细胞亚群CD4+T和CD8+T的百分含量;免疫鼠脾淋巴细胞体外给予同种抗原再刺激24 h,分析ABP-AW1对脾CD69+CD4+T淋巴细胞的表达及胞内因子IFN-γ+CD4+T的调节作用。结果:ABP-AW1能增强OVA诱导的Th淋巴细胞亚群CD4+T细胞,CTL淋巴细胞亚群CD8+T细胞增殖;ABP-AW1也能增进CD4+T细胞早期活化标志CD69+百分比增加,诱导CD4+T胞内Th1型细胞因子IFN-γ分泌水平增多。结论:ABP-AW1佐剂上调脾脏中淋巴细胞亚群的增殖,特别是Th1细胞的募集和活化,研究结果为设计理想的免疫佐剂提供了基础研究数据资料。