摘要：为准确检测出视频的镜头边界,有效区分突变和渐变镜头,提出一种基于双重检测的镜头分割方法。该方法分初检和复检两个过程,初检是对视频帧进行目标与背景的分离,对目标利用Hu不变矩提取特征并进行检测;复检采用三维颜色直方图对初检结果进一步检测,得到镜头边界;根据突变和渐变镜头的过渡时间不同的特点,提出利用滑动窗口对镜头的过渡时间进行检测。实验结果表明,该方法的查全率和查准率均超过了80%,与其它方法的检测结果相比具有较高的准确性。

摘要：目的探讨重组酶聚合酶扩增(RPA)联合铕纳米粒子标记的荧光侧流免疫层析试纸条(EuNPs-LFIC)检测HPV16和HPV18的价值.方法根据HPV16和HPV18基因保守区域(L1),采用Primer5软件设计特异性引物和探针.采用荧光读数仪扫描EuNPs试纸条,对RPA扩增产物定量分析.评估EuNPs-LFIC-RPA方法的敏感度和特异性,并与qPCR检测结果对比,计算实际临床样本检出符合率.结果在37℃等温条件下,RPA反应可在10min内完成.通过读取试纸条的荧光信号强度获得定量结果.EuNPs-LFIC-RPA方法可进行病毒单拷贝基因检测,并未观察到与HPV其他亚型的交叉反应.检测临床样本248份,与PCR-反向点杂交法的一致性分别为98.38%(κ=0.92,HPV16)、97.58%(κ=0.88,HPV18)和98.79%(κ=0.96,HPV16/18),EuNPs-LFIC-RPA同时检测HPV16和HPV18的敏感度和特异性分别是94.12%和100.00%.结论建立EuNPs-LFIC-RPA方法可满足宫颈细胞样本快速筛查的要求,为高危型HPV病毒临床检测提供新方法.

摘要：目的建立快速筛查登革病毒(DENV)、乙型脑炎病毒(JEV)、寨卡病毒(ZIKV)、黄热病毒(YFV)以及基孔肯雅病毒(CHIKV)5种蚊媒病毒的重组酶介导等温扩增(RAA)方法。方法分析上述5种病毒的保守基因作为靶标区域并引入人核糖核酸酶P(RNaseP)基因作为内对照,设计6组特异性引物和探针,并根据引物二聚体和错配等生物信息学分析将6组引物和探针组合成3组双重荧光RT-RAA检测体系,在相同反应条件下进行检测。用5种病毒的体外转录RNA验证3组荧光RT-RAA检测体系的灵敏度,用疟原虫、汉坦病毒、汉城病毒以及流感病毒核酸验证方法的特异性;分别用中浓度(10^(4)拷贝/μl)、低浓度(10^(2)拷贝/μl)5种病毒的体外转录RNA验证3组双重荧光RT-RAA检测体系的重复性。结果通过生物信息学分析,将5种病毒和RNaseP组合为3组双重荧光RT-RAA检测体系,分别为DENV与ZIKV、JEV与YFV以及CHIKV与RNaseP,均在39℃反应15 min。3组双重荧光RT-RAA检测体系检测5种病毒体外转录RNA的灵敏度介于1~10^(2)拷贝/μl,其中检测DENV、ZIKV和YFV的灵敏度均为1拷贝/μl,JEV灵敏度为10拷贝/μl,CHIKV灵敏度为10^(2)拷贝/μl;3组荧光RT-RAA检测体系均与其他病毒无交叉反应。5种病毒的中浓度体外转录RNA的检出率均达到100.0%,低浓度体外转录RNA也能达到83.3%。结论本研究建立的检测方法具有良好的敏感性、特异性和重复性,可用于人体及蚊类样本中5种蚊媒病毒的筛查。

摘要：为了提高检测效率,节省时间、试剂和样本,建立了基于高分辨率熔解曲线(high-resolution melting,HRM)的双重环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术用于羊乳中牛乳成分的检测。通过引物设计优化,牛引物目标产物的T m值在80℃,羊引物目标产物的T m值在83℃,由于在传统熔解曲线中峰型有交叉重叠,同时检测存在干扰,因此使用HRM技术,实现了2种不同动物源性成分的有效区分。该方法特异性好,不需要针对牛、羊源性成分单独进行检测,当体系中存在其中一种或两种都存在时都可将其快速检出,且对其他物种没有交叉反应及假阳性现象的发生,成功应用于市售羊乳及其制品的检测。

摘要：早熟禾是优良的牧草和草坪草,近年来,从进境早熟禾上多次截获一种腥黑粉菌,但一直被鉴定为禾草腥黑粉菌Tilletia fusca。通过比较研究,作者已将该菌种名改为雀麦腥黑粉菌***。依据***和***的序列差异位点设计了6对引物,成功建立了适合菌丝检测的***和***的双重PCR方法和适合冬孢子检测的套式双重PCR方法,检测灵敏度达到10pg/μL,为早熟禾腥黑粉菌鉴定提供了快速、可靠的检测方法。