摘要：为建立可快速鉴别牛结节性皮肤病病毒（LSDV）与山羊痘病毒（GTPV）的方法，通过对GenBank中公布的LSDV和GTPV的全基因序列进行比对分析，靶向LSDV基因组的保守区域设计了1对特异性的引物和2条taqman探针，经反应条件优化后，建立了一种LSDV和GTPV的双重taqman实时荧光定量pcr检测方法，并评估其敏感性、重复性、特异性。结果表明，本方法能从LSDV、GTPV、绵羊痘病毒、羊口疮病毒、牛病毒性腹泻病毒、口蹄疫病毒6种常见的牛源性疾病病原中成功鉴别LSDV和GTPV，具有良好的特异性。LSDV和GTPV基因组的最低检测下限都为3.37×10～1copies/μL。组内、组间变异系数均小于1%。运用本方法对10份临床样品进行检测，符合率达到100%。综上所述，本方法具有良好的特异性、敏感性和重复性，可快速鉴别出样品中的LSDV和GTPV，解决了目前国内容易造成的牛结节性皮肤病漏诊的问题，为全面控制国内牛结节性皮肤病疫情提供了新的技术手段。