摘要：目的建立转基因苜蓿草J101品系特异性定性PCR检测方法。方法根据转基因苜蓿草品系J101 5’端外源插入片段与苜蓿草基因组DNA之间的邻接区序列设计引物,建立了转基因苜蓿草J101品系特异性定性PCR检测方法,并对本方法的特异性、灵敏度进行了测定。结果建立的检测方法特异于转基因苜蓿草J101检测,检测最低DNA浓度为(1imit of detection,LOD)为80 pg,相当于50拷贝转基因苜蓿草J101基因组DNA。结论本研究建立的转基因苜蓿草J101品系特异性定性PCR检测方法特异性好,灵敏度高,能够快速、准确地对转基因苜蓿草J101进行检测分析。

摘要：【目的】建立转基因棉花MON88701品系特异性实时荧光聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)检测方法。【方法】利用实时荧光PCR技术,根据转基因棉花MON88701品系特异性序列设计引物和探针,建立转基因棉花MON88701实时荧光PCR检测方法,并测定本方法的灵敏度、特异性及可重复性。【结果】建立的检测方法特异于转基因棉花MON88701成分的检测,灵敏度测试表明其定量下限为34拷贝;重复性试验显示其相对标准偏差在可接受范围内。【结论】本研究建立的转基因棉花MON88701品系特异性实时荧光PCR检测方法具有良好的特异性和高灵敏度,适合对转基因棉花MON88701品系进行检测。

摘要：目的建立针对我国农业部未颁发农业转基因生物安全证书的转基因苜蓿草品系J163品系特异性等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)检测方法。方法根据转基因苜蓿草品系J163 5’端外源插入片段与苜蓿草基因组DNA之间的邻接区序列设计6条引物,建立了转基因苜蓿草J163品系特异性LAMP检测方法,并对本方法的特异性、灵敏度进行了测定。结果建立的检测方法特异于转基因苜蓿草J163成分检测,检测最低DNA浓度为(1imit of detection,LOD)为16 pg,相当于10拷贝转基因苜蓿草J163基因组DNA。结论本研究建立的转基因苜蓿草J163品系特异性LAMP检测方法特异性好,灵敏度高,能够快速、准确、稳定地对转基因苜蓿草J163成分进行检测分析。

摘要：根据转基因作物59122的外源基因与玉米基因组之间的左侧侧翼序列设计具品系特异性的荧光探针及引物,以实时荧光PCR技术建立59122的品系特定量检测方法,以重组PCR技术成功获得了标准分子（整合了内标基因序列与左侧翼序列）梯度范围为10^1～10^5,定量范围为0.01%～100%;建立了玉米内源基因与侧翼序列的标准曲线,变异系数CV值、标准偏差SD以及相关系数R2均可接受;检测5个已知转基因含量（0.1%、0.5%、1%、2%、5%）的混合样品中的转基因含量,结果分别为0.12%、0.56%、1.04%、1.61%、4.66%,实验误差小于25%,结果可信。

摘要：运用实时荧光聚合酶链式反应技术(polymerase chain reaction,PCR)对转基因玉米MON863进行品种特异性检测和定量分析。通过设计玉米内源基因和外源基因边界序列特异性引物和Taqman-MGB探针,验证了内源基因的物种特异性和外源基因边界序列的品种特异性。利用已知转基因百分含量的MON863玉米作为标准品,进行荧光定量反应,建立定量标准曲线,通过标准曲线对玉米样品MON863玉米成份进行含量分析。结果表明,该方法重复性好,检测特异性强,最低检测限浓度达到0.001 ng/μL,即14个拷贝。由于使用实时荧光PCR技术,检测周期短,操作简便,可广泛运用于转基因玉米MON863的进出口检测和转基因产品的含量分析。

摘要：采用SYBRGreen实时荧光定量PCR技术，建立转基因大豆BPS—CV127-9的定量检测方法。通过设计特异引物，扩增内标准基因1ectin和***127-9的5’侧翼序列，建立2种基因的拷贝数-CT标准曲线，根据标准曲线方程计算样品中的转基因含量，并且通过熔解曲线分析扩增反应特异性。结果表明，1ectin基因和侧翼序列标准曲线线性关系良好，酽值分别为0．999和0．998，变异系数（CV）1．50％～18．51％、标准偏差（SD）0．02～0．07。检测4个已知***127-9含量（1％、0．5％、0．1％、0．05％）的转基因混合样品，实测值与实际值接近。该检测方法具有快速、灵敏、准确、特异、高通量等优点，可以作为转基因大豆BPS—CV127-9的定量检测方法。

摘要：根据转基因玉米品系MIR604外源插入片段与玉米基因组序列设计和筛选品系特异性引物,并对反应体系和反应条件进行优化,最终建立转基因玉米品系MIR604的品系特异性LAMP检测方法。对该方法进行了灵敏度、特异性和稳定性评价,评价结果表明:该方法定性检测低限为0.5%,特异性和稳定性均达到100%。

摘要：为了促进转基因产品标识制度的顺利实施,对未获我国农业部批准的转基因水稻LL62品系进行精准定量检测方法研究,以保障我国进出口转基因农产品的检测监管。基于转基因水稻LL62品系外源插入片段和水稻基因组DNA的3'端旁侧序列设计数字PCR检测体系,建立了精准定量检测方法。结果显示,设计的引物探针反应效率高,基于此建立的数字PCR方法高度特异于转基因水稻LL62品系检测;方法可重复性好,生成微滴数相对标准偏差(RSD)值介于0.60%-11.11%;准确度高,3个混合样品(10%、1%和0.1%)测定值与真实值之间的偏差(bias)分别为0.12、0.09和0.10,相对标准偏差(RSD)介于0.09%-10.31%。建立的转基因水稻LL62品系微滴数字PCR定量检测方法简便快捷、特异性强、重复性好、准确度高,可准确有效地对农产品和食品中转基因水稻LL62成分进行精准定量分析。

摘要：根据转基因大豆A5547-127品系外源插入片段与植物基因组序列设计品系特异性引物,筛选最佳引物并对反应体系和反应条件进行优化,最终建立了转基因大豆A5547-127品系成分特异性LAMP的快速检测方法。对该方法进行了特异性、灵敏度和稳定性测试。结果表明:该方法能快速、特异性检测出转基因大豆A5547-127品系成分,定性检测低限为0.5%,稳定性和特异性均能达到100%。

摘要：以我国口岸重点监控的转基因棉花T304-40品系为研究对象,根据其外源插入片段与基因组DNA3'端邻接区序列设计引物和探针,经筛选和优化后,建立了转基因棉花T304-40品系特异性实时荧光定量PCR检测方法。对方法的适用性测试结果表明,建立的实时荧光定量PCR检测方法高度特异于转基因棉花T304-40品系检测,反应效率达94.2%,绝对灵敏度为20拷贝基因组DNA,定量下限为25拷贝基因组DNA。以研制的检测方法建立标准曲线对盲样进行定量分析,结果表明4个盲样的测定值与设定值间的偏差均小于10%。因此,本研究建立的转基因棉花T304-40品系特异性实时荧光定量PCR方法特异性强、灵敏度高,可准确地对棉花及其制品中转基因棉花T304-40成分进行定性或定量检测分析。