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猪伪狂犬病毒囊膜糖蛋白gb主要抗原表位区基因的克隆及原核表达: 收藏
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引用; 《中国动物检疫》2009年第12期26卷 27-28,36页; 作者：罗飞陈义平陆明哲彭大新周洁李宇琴徐宝娟南文龙中国动物卫生与流行病学中心诊断液研究室山东青岛226032 扬州大学兽医学院江苏扬州225009; 参照GenBank发表的猪伪狂犬病毒囊膜糖蛋白gb主要抗原表位的编码区基因序列,设计一对引物,通过PCR扩增后,将约为600bp的目的片段克隆到pGEM-T载体上,酶切后插入原核表达载体pET-32(a)的T7启动子下游,构建的重组质粒pET-gb经IPTG诱导,在...; 参照GenBank发表的猪伪狂犬病毒囊膜糖蛋白gb主要抗原表位的编码区基因序列,设计一对引物,通过PCR扩增后,将约为600bp的目的片段克隆到pGEM-T载体上,酶切后插入原核表达载体pET-32(a)的T7启动子下游,构建的重组质粒pET-gb经IPTG诱导,在大肠杆菌BL21(DE3)中获得了高效表达。SDS-PAGE结果显示,表达产物分子量约为42.4KDa,主要以包涵体形式存在。BandScan分析表明,表达量约占菌体蛋白的60.5%。利用His亲和层析方法得到了纯化的表达产物。Western blotting结果显示,重组蛋白能与阳性血清发生特异性反应,具有较好的抗原反应原性,可以作为检测用抗原。; 来源：详细信息评论

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