摘要：目的了解佛山市唐氏综合征、地中海贫血产前筛查与产前诊断开展情况,为建立和完善管理网络提供依据。方法采用自行设计调查问卷表,调查59家医院唐氏综合征、地中海贫血产前筛查与产前诊断开展情况。结果佛山市各级医院唐氏综合征、地中海贫血产前筛查实验室标准尚未统一,部分医院未开展唐氏综合征与地中海贫血产前筛查工作,部分医院虽开展此项工作,但未将高风险患者转运至上级医院进行产前诊断。结论应加强产前筛查与产前诊断的管理,建立完善的产前筛查与产前诊断三级管理网络。

摘要：目的建立可用于--THAI型和HPFH-SEA型地中海贫血的基因检测的实验体系。方法设计针对--THAI型和HPFH-SEA型地中海贫血的基因的Gap-PCR引物,经PCR扩增后用琼脂糖凝胶电泳方法进行分析。结果采用所构建的实验体系,可检出--THAI型和HPFH-SEA型基因型。讨论在日常检案中,应密切留意血液学检测与常规地贫基因分型试剂盒分型不一致的情况,避免--THAI型和HPFH-SEA型基因型的漏检。

摘要：目的利用PCR-HRM技术对常见β地中海贫血5种突变类型进行检测,对野生型、纯合以及杂合突变进行分析,建立一种有效地突变筛查方法。方法针对5种突变类型进行短片段扩增引物设计,用已知基因型的β地中海贫血患者基因组DNA标本进行PCR-HRM分析,并对于纯合子进行PCR产物测序验证。结果常见5种基因型纯合子以及杂合子均可以利用PCR-HRM进行区分,并得到测序验证。结论利用PCR-HRM技术可以对常见β地中海贫血进行基因突变筛查,并可以发现未知突变。

摘要：目的应用两点比浊分析原理建立红细胞渗透脆性测定法,并应用于临床对地中海贫血(地贫)的快速筛查。方法以0.35%NaCl-PBS为低渗测定试剂,在半自动生化分析仪上对在红细胞发生低渗溶血反应时的浊度变化进行动态测定,计算得出反应过程中前后两个测定点之间的相对溶血率值为地贫的筛查指标,以分子诊断结果作为金标准,分别测定183例地贫患者和157例非地贫对象血样,与红细胞脆性一管定量法(一管法)的检测结果进行比较。结果两点比浊法筛查地贫的灵敏度为86.3%;特异度为95.5%;正确率为90.6%。一管法筛查地贫的灵敏度为84.2%;特异度为93%;正确率为88.2%。以分子诊断为金标准进行比较分析,两种方法对地贫的筛查结果之间的差别无统计学意义(P>0.05),说明两点比浊法与一管法均适用于临床对地贫的筛查,两点比浊法略优于一管法。结论本研究建立的两点比浊法具有较高的特异度、敏感度和正确率,且简便、快速、成本低廉,适用于临床对地贫的快速筛查;应用本方法原理可进一步设计生产出自动化的地贫筛查设备。

摘要：目的结合多重不对称PCR技术和荧光探针熔解曲线法,建立一种快速、准确、简便的非缺失型地中海贫血基因检测方法。方法设计针对9个常见非缺失型地中海贫血基因位点(αWSα、αQSα、αCSα、βIVSⅡ654、βCD-17、β-28、βCD41-42、βCD-71-72、βCD-26)的引物对、荧光探针以及对应等位基因的靶序列;使用熔解曲线法验证荧光探针与对应等位基因的靶序列的工作效果,确认不同基因型的熔解温度;使用30份已知基因型别的临床样本,提取全血样本的DNA并PCR扩增其9个等位基因目标片段,利用对应荧光探针的熔解温度变化区分不同位点的基因型;收集疑似地中海贫血病例的血液样本200例,按照双盲对照实验原则,分别用反向斑点杂交法试剂盒和多重不对称PCR探针熔解曲线法对这200例样本进行基因分型检测,比较两种方法的结果是否一致,并对两种方法的优缺点进行比较。结果多重不对称PCR探针熔解曲线法可以同时对9个非缺失型地中海贫血的基因位点进行检测,并通过对应荧光探针的熔解温度的变化区分不同位点的基因型,检测结果与反向斑点杂交法相比较有相同的准确度,且有操作简便、耗时短、成本低、污染风险低等优势。结论本研究建立了一种基于多重不对称PCR探针熔解曲线的基因分型方法,并成功用于9个非缺失型地中海贫血基因位点的诊断,该方法是一种简便、快速、低成本的检测方法,在地中海贫血筛查中有较好的应用前景。

摘要：目的地中海贫血是一种中国南方沿海地区高发的单基因遗传疾病。由于常用检测试剂盒的检测范围并未囊括--THAI、HPFH-SEA和DBT(中国型缺失,Gγ+(Aγδβ)0)等等位基因,我们需要开发一种可快速诊断这三种等位基因的检测体系。方法针对--THAI、HPFH-SEA和DBT等位基因设计引物,采用溶解曲线法构建检测体系。结果经--THAI、HPFHSEA和DBT等位基因阳性标本验证实验表明,该体系可较好地检出这三种地中海贫血等位基因。结论该体系采用溶解曲线法为基础方法,具有速度快、分型准确和成本低的优点,适合基层应用。

摘要：目的探讨三亚市孕妇地中海贫血产前筛查与诊断的认知情况,进而分析影响产前筛查与诊断认知的主要因素,为孕妇的健康教育提供依据。方法采用自行设计的调查问卷表,对三亚市妇幼保健院门诊产前检查的957名孕妇进行调查,用χ2检验、Logistic回归分析影响因素。结果 (1)孕妇地中海贫血知晓率为41.27%(395/957),文化程度是认知的影响因素,差异有统计学意义(P<0.05),即文化程度越高的孕妇其知晓率越高,认知程度也越高。(2)通过医务人员宣教是孕妇获得有关地中海贫血知识的主要途径。(3)产前筛查和诊断的知晓率分别仅为39.29%(376/957)和29.78%(285/957),未接受地中海贫血产前筛查的主要认知原因是"不知道地中海贫血产前筛查时间"和"我们两个都很健康,我的孩子不会得这种病";不接受产前诊断的主要认知原因是"有风险,害怕流产"。结论 (1)文化程度是影响地中海贫血认知的主要因素,加强对文化程度低的孕妇的健康教育。(2)重视医务人员对孕妇的健康教育。(3)重点进行地中海贫血产前筛查时间、发生原因及产前诊断安全性等知识的健康宣教。

摘要：目的了解和分析本地区地贫基因型的分布情况,为临床提供依据,防止和降低重型地贫儿的出生率。方法α-地中海贫血基因分型检测应用跨跃断裂点PCR(GAP-PCR)的技术原理进行检测,即在待检的缺失基因片段两端设计引物进行扩增,再通过琼脂糖凝胶电泳,根据电泳片段大小判断检测样品的基因型。β-地中海贫血基因检测采用PCR体外扩增和DNA反向点杂交相结合的DNA芯片技术,按照碱基互补配对原则,通过分子杂交和显色反应,从而确定待检样品的基因型。结果 778例疑为地中海贫血患者标本,共检出地贫731例,检出率为94%。其中α-地贫基因缺失539例,占73.7%,缺失类型主要以αα/--SEA(--SEA缺失杂合子)为主,共检出485例,占阳性率的66%;-α3.7/αα(-α3.7缺失杂合子)检出27例,占阳性率的3.7%;αα/-α4.2(-α4.2缺失杂合子)检出8例;-α3.7/--SEA(-α3.7、--SEA双重缺失杂合子)检出8例,其他基因型较少检出;β-地贫基因突变192例,占26.3%,突变类型主要以CD41-42位点的单突变杂合子为主,检出87例,占阳性率的11.9%,单突变纯合子2例;其次为IVS-Ⅱ-654位点的单突变杂合子,检出53例,占阳性率的7.3%;其余突变类型依次为CD17、-28、CD71-72、CD43的单突变杂合子,双突变杂合子8例。患者中婴幼儿225人次,检出地贫186例,检出率82.6%;婚检和孕检553人次,检出地贫545例,检出率98.6%。结论本地区的地贫检出率较高,主要以α-地贫基因缺失为主,其中又以婚、孕检人群为主。由此可见对婚、孕检人群进行地贫基因检测可以更好的防止和降低重型地贫儿的出生率,从而减轻社会和家庭的负担,实现优生优育。

摘要：目的:分析73例αβ复合地中海贫血患者的基因型,血液学和临床表现之间的关系,探讨和指导复杂基因型组合的临床诊断。方法:使用标准血液学分析技术测量红细胞参数和血红蛋白成分。反向斑点杂交技术用于诊断β地中海贫血和α地中海贫血基因点突变,间隙聚合酶链反应(PCR)技术用于检测α地中海贫血缺失突变。结果:47例轻度β地中海贫血并发α地中海贫血(轻复合体)患者的临床表现与β地中海贫血携带者相同;26例重度β地中海贫血和α地中海贫血(重症)患者均为严重贫血。轻度贫血是不同的,但大多数表型是中间地中海贫血。在73例患者中,8例在β地中海贫血的突变基因类型中被鉴定,并且在α地中海贫血的突变基因类型中鉴定出5例。结论:轻型复合型的临床表现主要为轻度β地中海贫血,而α地中海贫血被掩盖;重型复合型多为中间型地中海贫血。对地中海贫血进行临床试验时,特别是对于β地中海贫血的携带者,建议常规筛查引起α地中海贫血的基因,以防止误诊和漏诊,并确保产前诊断地中海贫血的准确性。

摘要：设计了5种针对中国人常见β-地贫突变的单碱基错配引物，即在引物的3'端附近引入一个与模板错配的碱基。用此引物进行多聚酶链式反应，可使扩增产物中创造出能区别正常和突变β-珠蛋白等位基因的限制性酶切位点，藉此人工限制性片段长度多态性即可确诊样品的基因型。用此法分析了45例β-地贫DNA样品，并完成13个β-地贫高风险胎儿的产前诊断，其结果与ASO探针杂交法一致。