摘要：随着对分子生物学研究和抗体分子结构功能的深入研究,利用细胞工程和遗传工程对抗体分子进行改建并赋予其新的功能,进而开发了新的抗体应用领域,使单克隆抗体技术又向前发展了一步。基因工程抗体是按人类设计所重新组装的新型抗体分子,可保留或增加天然抗体的特异性和主要生物学活性,去除或减少无关结构,从而可克服单克隆抗体在临床应用方面的缺陷。

摘要：基因工程抗体(genetically engineered antibodies,GEAb)是按人工设计所重新组装的新型抗体分子,它既保留或增加了天然抗体的特异性和生物学活性,又去除或减少了无关结构,降低或基本消除抗体的免疫原性,使抗体人源化,并改善抗体的药物动力学,具有生产简单,价格低廉,容易获得稀有抗体的优点,具有广阔的临床应用前景.此技术的基本原理是,首先从杂交瘤或免疫脾细胞、外周血淋巴细胞等提取mRNA,逆转录成cDNA,再经PCR分别扩增出抗体的重链及轻链基因,按一定的方式将两者连接克隆到表达载体中,并在适当的宿主细胞(如大肠杆菌、CHO细胞、酵母细胞、植物细胞及昆虫细胞等)中表达并折叠成有功能的抗体分子,筛选出高表达细胞株,再用亲和层折等手段纯化抗体片段.

摘要：本文综述了本实验室近年来在基因工程抗体方面所做的工作:①从杂交瘤细胞基因组中筛选和鉴定出抗乙型脑炎病毒单克隆抗体的重链、轻链可变区基因,构建成人—鼠嵌合基因并在骨髓瘤细胞中表达出抗乙型脑炎病毒的人-鼠嵌合抗体;②根据文献中抗CD3单抗的序列,进行了分子设计,设计出改形抗体的分子序列,用合成和PCR补齐的方法构建了改形的单域抗体(V_H)表达载体,并在大肠杆菌中表达;③构建了外分泌型-附着型的表达单链抗体的表达载体;④克隆和测序了抗人肺腺癌、膀胱癌、CD3的单抗重、轻链可变区基因,并正在构建鼠的抗体库.

摘要：介绍了天然抗体的分子结构,对基因工程抗体的发展过程进行了回顾,陈述了各种基因工程抗体的设计思路、方法的特点,并在此基础上分析了当前基因工程抗体在临床上的应用前景。

摘要：双链抗体（Ｄｉａｂｏｄｙ），是一种新型基因工程抗体。“Ｄｉａｂｏｄｙ”一词最早由Ｈｏｌｉｇｅｒ等于１９９３年提出［１］，他们的解释是，双链抗体乃是一种小分子的双价双特异性抗体片段。我们将“Ｄｉａｂｏｄｙ”试译为“双链抗体”的理由有二：（１）前缀“Ｄｉ...

摘要：近来作为放射性核素高特异性载体的单克隆抗体(简称单抗)在临床应用的发展较慢。其主要原因是，人体内完整抗体由于具有高抗原性、不良的药代动力学等特点而影响了靶向性~[1]。另外尚缺乏简易快速高效的单抗核素标记方法。基因工程的发展为抗体的人工设计和优化提供了新思路。基因工程抗体不但保留了抗原结合性，降低了免疫原性，有良好的药代动力学和生物学分布，而且易于产业化生产~[2]。基因工程抗体和新目标抗原的发现必将加速放射免疫显像和治疗的发展。笔者就各型重组抗体的设计、结构、性质、放射性标记和在肿瘤诊疗中的应用进行综述。

摘要：通过计算机辅助分子设计的手段 ,综合序列分析和结构分析的结果对抗体的结构完成了计算机模拟 ,并对其进行了人源化的模建和改造 ,从而建立了一套快速可行的抗体人源化设计方案 .对一株抗p1 85neu/Her 2 单克隆抗体进行了克隆测序 ,并采用此方案进行了人源化设计 .此设计方案完全使用可公共访问的生物信息学工具和数据库 ,具有良好的实用性和推广价值 .

摘要：目的： 分离抗人红细胞血型Ｂ抗原单克隆抗体（ｍＡｂ） ５Ｄ１２ 可变区基因， 构建并表达其双价小分子抗体（ｄｉａｂｏｄｙ） 融合蛋白， 为用原核细胞生产抗血型Ｂ抗原工程抗体进行基础研究。方法： 设计合成抗体重、轻链可变区引物， 通过加端ＰＣＲ技术， 在ｍＡｂ ５Ｄ１２ ＶＨ 和ＶＬ基因两端引入连结短肽和适当的限制性酶切位点，体外连接构建５Ｄ１２ ｄｉａｂｏｄｙ 基因， 并将其克隆入融合表达载体ｐＧＥＸ４Ｔ２ 中， 在Ｅ－ｃｏｌｉ ＴＧ１ 中表达。运用ＰＣＲ和双脱氧核苷酸链末端终止法分析其核苷酸序列。结果： ＤＮＡ 序列分析表明， ５Ｄ１２ ｄｉａｂｏｄｙ 基因全长为６９９ｂｐ；其中ＶＨ 长３５１ｂｐ ， 编码１１７ 个氨基酸； ＶＬ 长３２４ｂｐ ， 编码１０８ 个氨基酸， 两者以五肽连接头相连； 重组体表达产物经ＳＤＳＰＡＧＥ显示， ＧＳＴ５Ｄ１２ ｄｉａｂｏｄｙ 表达产物的相对分子质量（ Ｍｒ） 为５１ ０００ 左右， 与预期结果相符。光密度扫描结果表明， ＧＳＴ５Ｄ１２ ｄｉａｂｏｄｙ 融合蛋白占菌体总蛋白的２４－６％ ， 表达产物主要以不溶性的包涵体形式存在。结论： 成功地构建并表达了５Ｄ１２ 双价小分子抗体基因，

摘要：对蛋白质的生物学功能及其在人类经济生活中的作用，以及蛋白质研究的历史进程进行概述，并着重阐述了蛋白质工程学科的创立、发展及基本原理和内容，介绍其研究现状和应用前景。

摘要：目的构建并表达抗人红细胞血型A抗原单链小分子抗体(single-chainFv)蛋白。方法设计合成抗重、轻链可变区引物,通过重叠延伸拼接PCR技术,在50AmAbV和VL基因间引入连结短肽,体外构建50AScFv基因并进行序列分析;将其克隆入表达载体pET-28a中,在大肠杆菌中诱导表达;并以免疫印迹测定重组蛋白的生物学活性。结果序列分析表明,50AScFv基因全长747bp,编码249个氨基酸;重组体表达产物聚丙烯酰胺凝胶电泳显示,融合蛋白的相对分子质量(Mr)为29000左右,与预期的结果一致,表达产物主要以不溶性包涵体形式存在;光密度扫描结果表明,重组蛋白占菌体总蛋白的16.2%,免疫印迹试验显示,重组小分子抗体保留了亲本mAb的特异性和力。结论成功地构建50AScFv基因,并在原核细胞中获得较高水平的表达,为进一步研制基因工程血型检定抗体奠定了基础。