摘要：棉花是干柱头花，花粉粒对低渗透压的溶液非常敏感，极易破裂。１９９７年我们对海南和南疆以及北疆都进行了不同花粉萌发培养基和渗透压的调节的研究工作，设计了不同品种、不同渗透压、不同糖类、不同离子浓度、不同激素组合、不同温度等多因子不同水平的试验，结果表明...

摘要：我们利用自行安装的ＰＩＧ基因枪瞬时转化水稻悬浮细胞，对其操作参数及转化条件的优化进行了研究。ＰＩＧ基因枪结构简单，操作方便，价格及维持费很低。研究结果表明，在设计参数为轰击持续时间５０ｍｓ及样品室真空度为２９～３０ｉｎ．Ｈｇ时，其它操作参数的优化值为氦气压力６０ＰＳｌ，轰击高度为１７ｃｍ，缓冲网板高度为ｇｃｍ。水稻悬浮细胞在轰击前后分别进行高渗处理（含有０．５Ｍ甘露醇的ＬＳ０．５培养基）４ｈ和１０～１６ｈ可提高转化率４倍以上，在ＤＮＡ吸附过程中，用乙醇进行后处理比用水处理可提高转化率３．８倍。另外，用金粉为ＤＮＡ载体比钨粉效果好，转化量可提高一倍以上。这些结果证实ＰＩＧ基因枪的可靠性及稳定性。这对促进ＰＩＧ基因枪在植物基因工程中的应用有着重要意义。

摘要：以CMV(黄瓜花叶病毒)外壳蛋白基因为靶标基因,针对CMV 3个常见株系(普通株系、黄化株系和坏死株系)外壳蛋白基因间高度同源序列设计引物,经RT-PCR获得目的序列,构建RNA干涉双元载体(其中目的序列反向重复插入)。以含双元载体的根癌农杆菌介导转化无菌番茄苗,培育转基因番茄。人工接种CMV验证转基因番茄抗病毒能力,荧光定量PCR分析转基因番茄中外源基因的表达效果。结果表明:RNA干涉转基因番茄呈现不同程度的抗病毒能力;对表现抗病毒能力的转基因番茄进行荧光定量PCR分析显示,转基因番茄中靶标基因的转录mRNA存在一定程度的降解,且抗病毒能力与降解程度成正相关。

摘要：本文验证ME207对白叶枯病的抗性,本研究根据受白叶枯病诱导的疣粒野生稻差减文库中的EST序列设计引物,PCR扩增获得ME207基因全长,构建含有ME207基因的高效表达载体p CAMBIA1303-ME207,对转基因植株接种白叶枯病菌Y8,在苗期和孕穗期分别对其抗性进行鉴定,发现无论是在苗期还是在孕穗期,转基因水稻比对照水稻具有明显的白叶枯病抗性。该结果进一步表明ME207对白叶枯病具有一定的抗性,为揭示云南疣粒野生稻高抗白叶枯病分子机制奠定基础,为将来培育新的抗病水稻品种提供资源。

摘要：设计基因型、DNA浓度和处理方法三个因素 ,通过花粉管通道法向番茄中导入TMV—CP和CMV—CP二价的抗病毒基因 ,试验共做 4 89朵花 ,但仅有 91朵花继续发育结果 ,而其它大部分花凋落 ,经Km(卡那霉素 )筛选 ,共得到 6株转基因植株。经PCR、SouthernBlotting检测 ,证实基因已整合到番茄基因组中。

摘要：为建立一套稳定高效的小麦叶肉细胞原生质体制备技术流程,以小麦幼苗叶片为材料,采用正交和随机设计试验分析了影响小麦叶肉细胞原生质体产量的制备因素。结果发现,酶解条件相关因素对制备原生质体产量的影响由大到小依次为酶解液甘露醇浓度、纤维素酶浓度、酶解时间和离析酶浓度;甘露醇浓度和纤维素酶浓度对原生质体产量的增长表现相互促进模式,延长酶解时间情况下低纤维素酶浓度产出的原生质体较高纤维素酶浓度破碎情况少,峰值过后的产量下降慢。研究还发现取材幼苗苗龄、光照条件和取材叶位等因素对原生质体产量也有影响。综合以上结果确定了一套优化的参数组合:以黑暗培养条件下的10 d苗龄小麦幼苗第2片真叶为材料,酶解液中的纤维素酶浓度为0.5%、离析酶浓度为0.6%、甘露醇浓度为0.5 mol/L,酶解时间为6 h,使用此参数组合制备的原生质体形状均一、破碎情况轻,产量可达(7.28±2.18)×106个/g,有活性原生质体的比例可达(95.06±2.66)%。采用PEG-Ca^(2+)介导的方法将目标基因导入制备的原生质体,结果表明GFP基因的转化效率可达(61.31±5.74)%,小麦基因Ta ATG8h和异源植物拟南芥基因At PIP2;1的蛋白质产物均定位于正确的亚细胞结构处。

摘要：为研究广谱抗环斑病毒(PRSV)海南株系转基因番木瓜育种方案,采集海南番木瓜各主要种植区的PRSV株系,以外壳蛋白(CP)、辅助成分-蛋白酶(HC-Pro)和复制酶(Nib)基因作为靶标基因,通过序列比对和运用Clustalx软件分析,得到干扰基因的保守区域和挑选出海南PRSV典型株系的代表样品。以p UCCRNAi为骨架质粒,利用代表样品的CP、NIb、Hc-Pro基因片断保守序列构建RNAi发夹结构,将发夹结构导入p CAMBIA2300-35S-OCS植物表达载体,构建出抗PRSV植物表达载体p CAMBIA2300-35S-CP-RNAi-OCS、p CAMBIA230035S-Hc-Pro-RNAi-OCS、p CAMBIA2300-35S-NIb-RNAi-OCS。实验将PRSV不同株系保守序列的分析与RNAi的高效抗病设计理念相结合,可用于创造高效、广谱抗PRSV病毒病的新种质。

摘要：目的　选用植物细胞表达轮状病毒结构蛋白 ,拟构建有效植物细胞表达系统。方法　利用PT -PCR扩增A组轮状病毒外壳蛋白VP4基因片段 ,经双酶切后与植物表达载体连接 ,转化感受态细菌TG1。利用地高辛标记探针进行斑点杂交检测 ,筛选出阳性克隆 ,拟用该克隆转化马铃薯细胞 ,研制新型轮状病毒疫苗。本研究还利用 β -葡萄糖苷酸酶 (GUS)基因转化马铃薯细胞。结果　A组轮状病毒SA11株VP4基因产物大小与设计相同 ,为 96 0bp。在被检测的未知载体中 ,有四个显紫色斑 ,可判定其为带有VP4cDNA的转化载体。用肉眼或显微镜可观察到马铃薯组织细胞中的蓝色物质。结论在转基因植物组织器官中观察到GUS的活性 ,获得外源基因转化的条件。拟用本研究构建的表达载体转化马铃薯细胞 ,研制新型轮状病毒疫苗。

摘要：以香蕉低代试管苗茎段薄层切片和香蕉吸芽薄层切片为外植体,分别设计了13个梯度,研究了香蕉在芽的再生和愈伤组织的诱导阶段对正筛选剂D-甘露糖和D-木糖的敏感性,为建立香蕉正筛选系统的遗传转化体系奠定基础。结果表明,(1)香蕉对D-木糖敏感,在D-木糖与蔗糖比例达到10∶20时,10 d开始显示出毒性,在D-木糖与蔗糖比例达到16∶14时能显著抑制香蕉芽的再生和愈伤组织的生长,当比例达到25∶5时完全抑制香蕉组织的生长,香蕉组织彻底死亡。因此,D-木糖能作为有效筛选剂对香蕉进行目的基因遗传转化;(2)香蕉对D-甘露糖不敏感,不适用于以D-甘露糖为筛选剂的遗传转化。

摘要：1月12～16日，2018哈尔滨时装周通过系列活动，不断将城市时尚基因转化为生产力，形成以哈尔滨为引领的东北三小时时尚产业生态圈，为中国服装产业的供给侧结构性改革探索一条新的发展路径。