摘要：目的构建针对人基质金属蛋白酶-1(MMP-1)基因的特异性短发卡RNA(shRNA)真核表达载体,并观察其在人骨肉瘤细胞MG63中对MMP-1基因表达的抑制作用。方法培养骨肉瘤细胞MG63,根据MMP-1基因cDNA编码序列,设计并合成针对MMP-1基因的特异性RNA干扰片断,将其克隆入pSilencer 3.0-H1 neo质粒,构建MMP-1基因shRNA真核表达载体siRNA MMP-1。与阴性对照质粒分别转染MG63细胞,G418筛选稳定转染的细胞系。采用RT-PCR、Western blot检测MMP-1 mRNA和蛋白的表达水平,同时进行体外侵袭试验。结果成功构建了MMP-1基因shRNA真核表达载体siRNA MMP-1。获得了稳定转染siRNA MMP-1载体和阴性对照载体siRNA neg的细胞系,并发现MG63/siRNA MMP-1细胞MMP-1mRNA和蛋白表达均受到明显抑制,细胞侵袭能力也显著下降。结论特异性shRNA能够明显抑制MMP-1基因在MG63细胞中的表达,这为进一步研究MMP-1在MG63细胞中的生物学功能和作用机制奠定了实验基础。

摘要：目的探讨中国北方汉族人群基质金属蛋白酶1(MMP1)基因多态性与慢性阻塞性肺疾病(COPD)易感性的关系。方法应用聚合酶链反应限制性片段长度多态性法(PCRRELP)检测MMP1基因型在59例中国北方汉族人COPD患者和109例健康人中频率的分布,用回顾性病例对照实验设计分析人群对COPD易感性的相对危险度及相应可信区间。结果COPD患者MMP1基因的突变型(2G/2G)、杂合型(2G/1G)、野生型(1G/1G)频率分布分别为54.2%(32/59)、37.3%(22/59)和8.5%(5/59),健康人为71.5%(78/109)、20.2%(22/109)和8.3%(9/109)。以野生型(1G/1G)与杂合型(2G/1G)为参考组,MMP1基因突变型(2G/2G))与参考组相比,OR=0.467,95%CI=0.237～0.924,差异有统计学意义(P<0.05)。结论MMP1基因突变型(2G/2G)降低中国北方汉族人群对COPD的遗传易感性。

摘要：目的:通过研究静脉动脉化皮瓣对基质金属蛋白酶-1(MMP-1)的表达,探讨间歇式正压对静脉动脉化皮瓣愈合的影响。方法:设计兔腹部静脉动脉化皮瓣模型,施加间歇式正压,并于术后1,4,7d进行标本采集,用免疫细胞化学方法观察静脉动脉化皮瓣对MMP-1的表达。结果:术后早期实验组表达MMP-1明显高于对照组,晚期实验组表达MMP-1呈下降趋势,对照组则仍呈上升趋势,至术后第7天,二者表达已无统计学差异。结论:术后早期实验组皮瓣分泌较多的MMP-1,能更为有效地去除损伤组织,有利于创面愈合;晚期因实验组皮瓣接近愈合,因此其MMP-1的表达呈下降趋势。

摘要：目的:检测MDI301对正常细胞和高糖细胞中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)和I、III型前胶原蛋白表达的影响。探讨MDI301对糖尿病皮肤溃疡和足溃疡的治疗潜力。方法:采用Real time PCR检测人成纤维细胞中MMP-1、MMP-2和TIMP-1 mRNA的表达水平;ELISA方法检测细胞培养基中TIMP-1蛋白表达量;Western blot检测I型和III型前胶原蛋白表达水平。结果:MDI301能降低高糖细胞中MMP-1和MMP-2 mRNA的表达(P<0.05),增加TIMP-1 mRNA和细胞培养上清中TIMP-1蛋白的表达(P<0.05);同时还能增加高糖细胞中I和III型前胶原蛋白的表达量(P<0.05)。结论:MDI301可能会对糖尿病患者体内MMP-1、MMP-2、TIMP-1和I、III型前胶原蛋白的表达有相似的作用,使其有望用于糖尿病皮肤溃疡和足溃疡的治疗。

摘要：目的探讨基质金属蛋白酶-1(MMP-1)短发夹RNA(shRNA)的慢病毒表达载体在人舌鳞癌细胞株CAL27中对MMP-1表达及细胞侵袭、转移的作用。方法设计合成用于干扰人MMP-1的shRNA并与载体PLKO.1连接,构建重组的慢病毒载体质粒PLKO.1/MMP-1-shRNA,稳定感染CAL27细胞。Western blot检测CAL27细胞中MMP-1蛋白表达,划痕实验和Transwell实验分别检测CAL27细胞的迁移和侵袭能力。结果成功构建慢病毒载体PLKO.1/MMP-1-shRNA;其能明显下调CAL27细胞中MMP-1蛋白表达,抑制CAL27细胞迁移和侵袭能力。结论慢病毒载体PLKO.1/MMP-1-shRNA能有效抑制MMP-1表达、细胞迁移和侵袭。MMP-1可能是舌鳞癌细胞转移的重要调节因子。