摘要：背景:目前已经证实肌腱具有内在愈合的潜能,但不同区域的肌腱组成细胞在修复过程中的增殖能力及行为差异还有待进一步研究。目的:研究不同区域的肌腱组成细胞在体外培养过程中的增殖能力及行为学差异。设计:重复测量设计。地点和对象:南通医学院第二附属医院骨科。白色纯种Leghorn鸡15只,雌雄不拘,体质量约400g,购自南通医学院动物中心。方法:将鸡Ⅱ区趾深屈肌腱立体分割成区:腱外膜组织、外膜下腱组4织、亚中心腱组织、中心腱组织。两相同区域肌腱组织按间隔0.5,1,排列方式培养于式培养孔。2mm3种24孔培养板中,每种排列方5完整肌腱段组织也以相同方式培养作为对照。每天计数每种排列方式细胞游出数目、方向及来源,培养第9天作组织学检查。主要观察指标:①不同区域的肌腱组织细胞增殖能力及其行为。②立体分割的肌腱段组织体外培养后的组织学变化。结果:细胞游出最早、数目最多的组织为腱外膜组织,其他依次为亚中心腱组织、中心腱组织、外膜下腱组织。两腱外膜组织间距越小细胞游出越早,而其他区域的肌腱组织则相反。组织学检查显示培养第9天的完整肌腱段组织,表面腱外膜细胞明显增殖;外膜下腱组织、亚中心腱组织内的腱内膜细胞与培养前相比,差异无显著性意义(t=2.31,P>0.05);中心腱组织的腱内膜细胞84?

摘要：目的:设计并合成聚乙二醇修饰负载槲皮素的聚多巴胺(PDA)类黑色素纳米粒子(PPQ),检测其物化表征及活性氧(ROS)清除能力,并进一步探究其改善子宫内膜异位症能力。方法:采用透射电子显微镜(TEM)、水合粒径(DLS)、Zeta电位分析PPQ的形貌、粒径大小;利用紫外光谱(UV-Vis)分析PPQ中槲皮素的载药浓度及包封率;利用总抗氧化能力的检测试剂(DPPH和ABTS)检测槲皮素、聚乙二醇修饰PDA(PEG-PDA)及PPQ的ROS清除能力;将人子宫异位子宫内膜上皮细胞系(hEM15A)分为对照组及刺激组,并将刺激组分别用槲皮素、PEG-PDA及PPQ进行孵育处理,进一步采用激光共聚焦、细胞毒性试验、细胞活性染色、细胞EdU增殖染色试验及子宫内膜异位症小鼠模型评估PPQ清除ROS改善子宫内膜异位症的作用。结果:TEM及DLS结果提示制备的PDA、PEG-PDA及PPQ为100 nm左右的圆球颗粒,其电位分别为-30、-32、-35 mV左右。紫外光谱提示槲皮素的载药率和包封率分别为≤23%和≤85%。总抗氧化能力检测试剂结果提示槲皮素、PEG-PDA及PPQ均可减少氧自由基的含量,且随着浓度升高其含量越少,同时PPQ展示出最好的ROS清除能力。激光共聚焦实验结果提示:相比于对照组,IL-1β可显著上调hEM15A细胞内ROS水平(P<0.001),而槲皮素、PEG-PDA及PPQ都会降低IL-1β处理的hEM15A细胞内ROS水平(P<0.001),且相比于槲皮素和PEG-PDA,PPQ在细胞内可更有效清除ROS(P<0.001)。细胞毒性试验、细胞活性染色及EdU增殖染色试验结果表明:相比于对照组,IL-1β可显著降低hEM15A细胞的存活率、增殖能力及增加细胞死亡率(P<0.001),而槲皮素、PEG-PDA及PPQ可增加IL-1β处理的hEM15A细胞存活率及增殖能力,降低死亡率(P<0.001),且相比于槲皮素和PEG-PDA,PPQ对处理的细胞效果最显著(P<0.001)。在体试验显示:PPQ在子宫内膜异位症区域有良好的富集作用,且相比于对照组,PPQ可缩小子宫内膜异位症区域的体积(P<0.001),同时显著降低其ROS水平(P<0.001)。结论:PPQ具有良好的清除ROS功能,是治疗子宫内膜异位症的一种潜在新方法。

摘要：目的构建针对人胃泌素基因的shRNA干扰表达载体,观察胃泌素基因表达抑制对人胃癌细胞系BGC823细胞增殖和迁移能力的影响。方法根据人胃泌素序列设计并构建3个靶向人胃泌素基因的shRNA真核表达载体,以脂质体转染的方法将胃泌素干扰质粒转染至人胃癌细胞系BGC823,经G418筛选出稳定转染的阳性细胞。通过RT-PCR技术筛选出表达抑制最强的稳定转染胃癌细胞系。应用流式细胞仪技术检测其细胞周期变化情况。采用Trans-well小室法检测细胞体外迁移能力。结果经测序证明胃泌素shRNA基因已成功插入Psilencer3.1质粒中,构建的干扰质粒能够显著抑制胃泌素的表达。胃泌素基因的表达下调将胃癌细胞阻滞在G1期,且穿过Trans-well小室膜的细胞数显著下降。结论干扰胃泌素的表达可显著抑制胃癌细胞的增殖和迁移能力。

摘要：设计针对B7-H3 1041以及996位点的shRNA,构建相应慢病毒B7-H3载体,研究其表达下调对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)生物学行为的影响。针对B7-H3mRNA序列设计2对不同位点的shRNA,克隆连接至慢病毒载体中,与穿梭载体LV3共转染至人肾上皮细胞系293T细胞并包装病毒,逐孔稀释法测定病毒滴度。用聚凝胺浸染HUVEC细胞株,real-time PCR、FACS测定靶细胞B7-H3及其蛋白表达抑制情况,CCK-8法检测细胞增殖能力,Transwell实验分析其迁移能力。结果显示,慢病毒载体可抑制B7-H3及其蛋白的表达,抑制率超过84.7%;CCK-8实验显示B7-H3表达降低后HUVEC的增殖和迁移能力明显降低。以上发现可为进一步研究该分子的生物学功能及其在RA中的作用奠定基础。

摘要：肾脏是一高度复杂的器官,由超过30种以上不同类型的细胞组成,如肾小管上皮细胞、间质细胞、肾小球细胞和血管细胞。这些细胞和组织的增殖速率、更新和再生的能力差异较大,即使是肾单位的不同成分,增殖能力也各不相同。肾小球脏层上皮细胞（或足细胞）属终末分化类细胞，

摘要：肾脏是一个高度复杂的器官，由超过30种以上不同类型的细胞组成，如肾小管上皮细胞、间质细胞、肾小球细胞和血管细胞等。这些细胞和组织的增殖速率、更新和再生的能力差异较大，即使是肾单位的不同成分，增殖能力也各不相同。肾小球脏层上皮细胞（或足细胞）属终末分化类细胞，几乎没有增殖能力。若足细胞因坏死、凋亡或分解而失去，邻近的足细胞不会通过增殖来替代，而近曲小管正常生理状态下能缓慢更新，一旦发生损伤，肾小管细胞即发生广泛性的增殖。现在有6．5％-10．0％的普通人群患有不同程度的肾脏疾病，许多难治性肾脏疾病即使积极治疗，最终仍然进入尿毒症阶段。

摘要：阐明宿主细胞密度和病毒感染复数(MOI)对SARS冠状病毒增殖的影响,为SARS灭活疫苗的研究奠定基础。采用析因设计方法,考虑MOI(0.01、0.05和0.1)与细胞密度(2×104、4×104和8×104/cm2)2个3水平实验因素,在各水平组合条件下培养SARS病毒,以组织培养半数感染量(TCID50)作为观测指标,分析SARS冠状病毒滴度在不同增殖条件下的差异。结果表明,MOI、宿主细胞密度和二者之间的交互作用对SARS病毒滴度的影响分别具有非常显著性差异(F=12.70,P<0.01)、显著性差异(F=6.94,P<0.05)和非常显著性差异(F=8.22,P<0.01)。在0.01MOI和8×104/cm2条件下,病毒滴度达5.57×105TCID50/mL。说明SARS冠状病毒在培养细胞中的增殖能力显著依赖于宿主细胞密度、病毒感染复数和二者的交互作用。

摘要：目的从设计合成的变构系列多肽(structure-altering polypeptide,SAP)中筛选出最佳多肽XA5,探究其可能对肺癌细胞活性的影响,为后续对老年耐受性差的肺癌患者提供基础。方法挑选以上系列的XA5多肽和腺癌细胞系A549进行体外实验验证。CCK-8验证其对肺癌细胞活性影响,Transwell实验和划痕实验验证其对侵袭性转移能力的影响,微管聚合实验检测微管蛋白聚合判断优选多肽是否阻止微管聚合等特异性抗微管效能验证。结果经细胞直接计数实验证实,3组不同剂量组的XA5细胞干预后细胞数量均较对照组下降(P<0.05),CCK-8实验证实添加XA5多肽后,细胞活力较对照组明显下降(P<0.05)。Transwell实验中,每组XA5细胞迁移细胞数较对照组明显下降(P<0.001),验证其对肺腺癌细胞侵袭有明显抑制能力。因其中2组剂量组(20μg/mL、40μg/mL)的划痕距离较对照组延长(P<0.001),明确了XA5多肽抑制肺癌细胞转移的能力,以上抑癌性能均与剂量呈正比。微管聚合检测发现XA5多肽可以明显抑制微管蛋白聚合。结论设计合成的SAP系列多肽XA5经体外实验验证其具有高效抑制肺癌细胞数量、抑制其细胞的迁移和入侵能力并抑制微管聚合,是一款在老年耐受差肺癌患者中具备广阔开发前景的抗肺癌药物。

摘要：目的：观察肠道部分缺血再灌注(I/R)损伤过程中外周血淋巴细胞凋亡及其在植物血凝素(PHA)刺激下增殖能力的变化。方法：大耳白兔55只,分为肠部分I/R组、假手术对照组、正常对照组,用自行设计的血流阻断器阻断SMA血流50%,维持4h,制作肠道部分缺血再灌注损伤动物模型。采用流式细胞术(AnnexinV/PI双染法)测定外周血淋巴细胞凋亡变化,采用免疫组织化学方法观察外周血淋巴细胞caspase-3蛋白的表达,采用MTT比色法测定外周血淋巴细胞增殖能力。结果：肠道缺血期外周血淋巴细胞凋亡率明显升高,肠道再灌注期后外周血淋巴细胞凋亡比例骤然减少；外周血淋巴细胞caspase-3表达与凋亡改变呈相同趋势；肠部分I/R损伤后外周血淋巴细胞增殖能力明显降低。结论：肠道部分I/R损伤后,外周血T-淋巴细胞增殖功能明显受抑,外周血淋巴细胞凋亡变化与细胞内caspase-3的表达有关。