摘要：目的:针对幽门螺杆菌与定植和致病相关的6种蛋白设计作用位点较为全面的多表位疫苗,将其构建到复制缺陷型腺病毒穿梭载体中并分析其表达情况,为后续包装腺病毒并通过动物实验验证疫苗的有效性奠定实验基础。方法:使用IEDB数据库查找和预测幽门螺杆菌UreB、OipA、HomB、HopQ、VacA和CagA的B细胞表位,采用在线工具VaxiJen v2.0、AllerTOP v2.0和AllergenFP v1.0对6种表位与接头KK随机串联得到的720组合进行抗原性和过敏原性分析,选出优势表位组合,将优势表位组合与具有黏膜佐剂活性的NSP4C融合并加Flag标签便于后续检测,综合考虑融合蛋白的抗原性、可溶性和理化性质,评选出最优疫苗蛋白,将其构建到复制缺陷型腺病毒穿梭载体中,通过转染HEK-293T细胞和Western blot实验分析其表达情况。结果:通过对表位组合的抗原性分析找到3个评分>1.0的表位组合,即优势表位组合,三者均无过敏原性。将优势表位组合、NSP4C和Flag随机组合后,选出最优疫苗蛋白NSP4C-Dec663。将NSP4C-Dec663编码序列连入pShuttle-CMV载体中,重组质粒转染HEK-293T细胞进行目的蛋白表达,Western blot结果表明NSP4C-Dec663成功表达。结论:本研究针对幽门螺杆菌设计了多表位疫苗NSP4C-Dec663,其能在HEK-293T细胞中表达,这为后续包装复制缺陷型腺病毒和进行动物实验奠定了基础。