摘要：利用分子克隆的方法构建夏侧金盏花虾青素合成相关酶基因Adkc的双T-DNA表达载体。首先设计基因Adkc、启动子E8和终止子Hsp的引物,选用植物双T-DNA表达载体pGreen-DT。其次将E8、Adkc和Hsp按顺序连接到载体上,构建Adkc双T-DNA、果实特异表达的表达载体。使用Q5超保真酶成功把Adkc和Hsp扩增到一起,经酶切和连接后将启动子E8、Adkc和Hsp成功插入植物双T-DNA表达载体pGreen-DT上。成功构建夏侧金盏花虾青素合成相关酶基因Adkc的双T-DNA表达载体。为后续研究中将该载体转入植物中表达,分析Adkc的功能及其参与的代谢途径、获得高效表达虾青素且不含抗生素基因的转基因植株做好了前期准备。

摘要：目的:克隆夏侧金盏花中Actin基因片段并分析其组织部位表达,为以Actin基因为内参研究夏侧金盏花中其它基因的表达和调控奠定基础。方法:通过比较其它植物中Actin基因序列,设计夏侧金盏花Actin基因片段的PCR引物,扩增产物经克隆和测序,获得序列信息;根据获得的序列设计半定量RT-PCR引物,分析Actin基因在夏侧金盏花不同组织部位的表达。结果:克隆获得一长度为1 009bp的夏侧金盏花Actin基因片段,命名为AdACT,并在GenBank注册,登录号为JX436162;半定量PCR研究发现其在不同组织部位的表达无显著差异。结论:本研究初步表明其可作为研究夏侧金盏花基因表达的内参基因。

摘要：目的:研究夏侧金盏花中虾青素合成相关基因Adketo和Adkc在不同组织部位的表达,从而从基因表达角度探讨这两个基因与虾青素合成的关系。方法:根据GenBank上的Adketo和Adkc基因以及内参Adactin基因的序列设计荧光定量PCR引物,通过Real-time PCR分析Adketo和Adkc基因的组织部位表达情况。结果:Adketo和Adkc基因均只在花中大量表达(3%),其余组织内只能检测到少量或微量表达(10-5～10-3)。结论:虾青素主要在夏侧金盏花的花中合成具有正相关关系,为证明Adketo和Adkc是虾青素合成相关基因添加了又一证据。