摘要：背景:一些实验证明多糖在感染、炎症、细胞间黏附和信号传导、免疫识别、细胞增殖分化及维持细胞正常结构和功能生理、病理等方面均起重要作用。但植物多糖对胃肠道黏膜的保护作用有待进一步研究。目的:观察不同浓度的四君子汤总多糖对大鼠小肠上皮株IEC-6细胞增殖的影响。设计:观察对比实验。单位:广东省中医院中心实验室。材料:①细胞株:正常大鼠小肠上皮细胞株IEC-6(***-1592)由美国ATCC(AmericanTypeCultureCollection)购得,主要来源于小肠隐窝细胞。②试剂和药品:DMEM培养基,牛胰岛素,庆大霉素,胎牛血清,DPBS均为GIBCO公司产品;细胞增殖试剂盒(MTT)为Roche公司产品;消炎痛为Sigma公司产品。四君子汤总多糖按药典处方比例取党参,白术,茯苓和甘草适量,加水浸泡后,煮沸提取4h,重复1次,合并提取液,减压浓缩,高速离心除去不溶物,提取液置玻璃纸中逆向流水透析2h,再于提取液中加乙醇至浓度约80%,保存过夜后分取沉淀,合并所有沉淀,采用Sevag法除去粗多糖中的蛋白,冻干后得到的总多糖。方法:①将IEC-6细胞株于干冰中取出,迅速放入37℃水浴中解冻后,加入已装有DMEM培养液的T-150培养瓶后放入CO2培养箱中,于37℃,饱和湿度,体积分数为0.05的CO2环境下培养。细胞隔天换液1次,每5～7天进行传代,传代比例为1∶7。第15～20代细胞用于实验。②IEC-6细胞以1×104/孔的浓度接种于96孔细胞培养板上,接种后6h,各培养孔内依次加入浓度为50,100,200mg/L四君子汤总多糖,即为四君子汤总多糖3个剂量组。每天定时取出1板,按试剂盒说明书以MTT法进行细胞增殖检测。以未加任何干预措施的IEC-细胞作为正常对照组,在相应时间点以MTT法进行细胞增殖检测。③将IEC-6细胞按1×104/孔的浓度接种于96孔细胞培养板中,接种后次日更换以无血清培养液DMEM,24小时后,各培养板中分别加入消炎痛以及四君子汤总多糖,其中,消炎痛使用浓度为40mmol/L,即为消炎痛组。四君子汤总多糖使用3个剂量分别为50,100,200mg/L,即为四君子汤总多糖50,100,200mg/L组。药物作用20h后,按试剂盒使用说明书进行MTT法细胞增殖检测。以未加任何干预措施的IEC-细胞作为正常对照组,在各相应时间点以MTT法进行细胞增殖检测。主要观察指标:MTT法测定四君子汤总多糖不同作用时间对IEC-6细胞生长的影响结果;MTT法测定四君子汤总多糖对消炎痛所致的IEC-6细胞生长抑制的影响结果。结果:四君子汤总多糖不同剂量于不同的培养时间对IEC-6细胞的生长均有促进作用;IEC-6细胞在给予消炎痛40mmol/L作用24h后,细胞增殖的吸光度明显低于正常对照组(0.17±0.02,0.31±0.03;P0.05)。结论:四君子汤总糖具有促进IEC-6细胞增殖的作用,它可能通过对小肠上皮细胞增殖的影响而发挥对肠道黏膜吸收和免疫功能的调整作用。

摘要：目的:从海洋中草药海螵蛸(乌贼骨)中提取分离得到多糖活性物质。对粗多糖中主要的活性组分CPS-1进行纯化,得到成分相对均一的天然活性多糖。方法:用热水抽提法提取海螵蛸多糖粗品,并对提取工艺进行正交设计,优化提取方法。对粗品组分进行总糖量测定。用DEAE-Sepharose F.F柱及Sepharose CL-6B柱对海螵蛸多糖粗品进行分离。通过活性检测实验确定活性部分。最后使用Sephacryl S-300柱进一步纯化。用HPLC来检测精品多糖的纯度。标准曲线法测定相对分子质量。结果:成功得到海螵蛸粗多糖。经过离子交换柱DEAE-Sepharose Fast Flow和Sepharose CL-6B柱及分子筛Sephacr-yl S-300柱的进一步分离纯化和活性跟踪,最后得到相对均一的活性精品多糖CPS-1,其含糖量达93.6%,相对分子质量为1×106。结论:不同的提取条件影响海螵蛸多糖的得率。不同性质的分离材料能够将相对分子质量及电荷有差异的多糖分离,达到分离的目的。精品多糖CPS-1是从海洋中草药海螵蛸中得到的均一多糖组分。

摘要：背景:药物治疗是肿瘤治疗的主要手段之一,近年来从天然植物中寻找低毒抗癌活性成分的研究广受重视。其中,多糖类成分通过调节机体免疫而发挥抗癌作用的机制已经得到公认,但从诱导细胞凋亡等多个角度探讨多糖的抗癌机制将为癌症治疗提供新的理论依据。目的:观察羊栖菜多糖对不同组织肿瘤的抑制作用及其对肿瘤治疗的组织特异性,并从细胞凋亡角度探讨其作用机制。设计:以6种不同的肿瘤细胞为观察对象的体外平行对照实验及动态测定实验。单位:哈尔滨商业大学药物研究所博士后科研工作站。材料:实验于2002-11/2003-10在哈尔滨医科大学药理研究室完成。药物选用羊栖菜多糖,5-氟尿嘧啶;细胞株选用处于对数生长期的人肝癌Bel-7405、人宫颈癌克隆cc-801、人乳腺癌MCF-7、人直肠癌COLO-205、人胃癌SGC-7901、人食管癌Eca-109。方法:采用四甲基偶氮唑盐法和集落形成实验法观察羊栖菜多糖的体外抗肿瘤作用;采用流式细胞仪观察羊栖菜多糖对肿瘤细胞周期及细胞凋亡的影响;采用Fluo-3/AM探针标记,激光共聚焦技术观测细胞内Ca2+浓度。主要观察指标:羊栖菜多糖对6种细胞的对细胞抑制50%的药物浓度和集落形成率;对SGC-7901细胞的凋亡率测定、细胞周期分析及细胞内Ca2+浓度含量测定。结果:①羊栖菜多糖的体外抗肿瘤作用:羊栖菜多糖对6种人胃癌细胞株均有一定的抑制作用,而尤以对人胃癌(SGC-7901)和直肠癌(COLO-205)效果最为明显。②羊栖菜多糖对SGC-7901人胃癌细胞周期及细胞凋亡的影响:通过对给药后4,8,12,24,485个时间段细胞凋亡的观察,发现羊栖菜多糖组各时间段G0/G1期细胞都多于空白对照组,羊栖菜多糖给药12h后,凋亡指数较相应时间段空白对照组明显升高(12.17±0.88,1.43±0.32;20.33±0.69,1.56±0.67;18.77±0.68,1.55±0.46,P<0.01)。③羊栖菜多糖对SGC-7901细胞内Ca2+浓度的影响:给药前SGC-7901细胞内Ca2+浓度处于一个相对恒定的浓度。给药后Ca2+浓度迅速升高然后又降低,加入CaCl2后Ca2+浓度又升高。结论:羊栖菜多糖对人胃癌细胞和直肠癌细胞效果较好,这一作用是通过诱导肿瘤细胞凋亡达到的。羊栖菜多糖可阻滞SGC-7901人胃癌细胞内G0/G1期进入S期,升高细胞凋亡指数。羊栖菜多糖能通过引起肿瘤细胞内钙库Ca2+的释放而升高肿瘤细胞内Ca2+浓度,从而达到诱导肿瘤细胞凋亡而抗肿瘤的作用。

摘要：目的:比较多糖铁复合物胶囊和生血宁片纠正维持性血液透析(MHD)患者肾性贫血的疗效。方法:选取2016年4月至6月本院透析中心MHD治疗且满足缺铁性贫血标准的患者,以随机区组设计法分为多糖铁复合物组和生血宁组,接受3个月治疗。在治疗前及治疗后的第1、2、3个月分别检测血常规、铁代谢指标,并记录不良反应发生率,观察和比较两组治疗达标率,并对两组患者行成本-效益分析。结果:每组有30例患者完成随访。3个月治疗后,两组患者血常规和铁代谢指标均较前改善(P0.05)。成本效益分析提示,使用多糖铁复合物治疗贫血有更低的成本和更高的效益(P<0.05)。结论:多糖铁复合物胶囊能较好地纠正贫血和改善铁代谢,成本效益比较低,可有效减少医保支出,对于MHD患者是良好的口服补铁方式。

摘要：目的:研究调胃颗粒的水煎煮提取工艺。方法:采取正交设计L9(34)方法,以主药白芍中芍药苷的含量、总多糖的含量及提取干膏综合评分为考察指标,筛选出最佳提取条件。结果:最佳提取工艺为A2B3C3,即加水8倍量,每次1.5h,煎煮3次,影响提取的强弱顺序为C>B>A,其中煎煮次数(C)影响最大,对出膏率有显著意义(P<0.05)。结论:采取正交设计筛选出的提取方法较好,工艺可行。

摘要：目的设计正交试验提取二至丸中的多糖类成分并测定多糖含量,将提取物制成颗粒剂。方法2022年9—12月采用传统的水提醇沉法提取二至丸中的多糖类成分,进行L9(34)正交实验设计,探究料液比、提取温度、提取时间、提取次数对多糖提取率的影响,优选多糖提取物的最佳提取工艺;以葡萄糖为标准,采用苯酚-硫酸法进行样品多糖含量测定;并将提取的多糖提取物进行湿法制粒。结果探究的四个因素对多糖提取率的影响程度为:提取次数>提取时间>提取温度>料液比;最佳提取工艺为:料液比1∶10(g/mL),提取温度95℃,提取时间3h,提取次数3次;所制多糖颗粒剂质量评价结果均符合2020版《中国药典》标准。结论该研究优化了二至丸中多糖类成分的提取工艺,为二至丸的进一步开发利用提供科学依据。

摘要：为建立当归药材产地现代干燥加工方法体系,该研究以3种酚酸(酯)类、6种苯酞类及多糖类化学成分的组成及含量为评价指标,利用主成分分析法,结合干燥后样品外观性状等指标,对经不同干燥加工方法所得当归药材样品品质进行综合评价,并在此基础上对其工艺参数进行了优化。结果显示,经控温控湿、中短波红外及微波真空干燥法加工后的当归药材所含绿原酸、阿魏酸显著高于新鲜样品及产地传统干燥方法加工样品;多元统计方法分析结果显示,采用控温控湿干燥法加工样品,其整体化学特征与产地传统干燥方法加工样品较为近似,可作为当归药材产地现代干燥加工的适宜方法。以产地传统干燥加工方法所得当归药材样品为参照,采用正交试验设计法对当归药材控温控湿干燥工艺参数进行了优化,综合考虑能耗、干燥时间等其他参数,最终确定当归药材产地现代干燥加工适宜工艺为:采用控温控湿干燥法,第一阶段干燥温度40~45℃,相对湿度25%以下,干燥目标水分50%,缓苏时间12~24 h,第二阶段干燥温度60~65℃,相对湿度20%以下,风速35~40 Hz。该研究为当归药材产地现代干燥加工方法的选择以及工艺参数优化提供了支撑,也为根及根茎类药材产地加工共性技术的形成提供了有益探索和实践。

摘要：目的确定提取糖肾颗粒中多糖的最佳工艺。方法采取正交设计法以提取时间(A),加入水量(B)和提取次数(C)作为因素。结果A因素和C因素对多糖含量的影响具有显著意义,B因素的影响不大。结论最佳提取工艺为A2B1C2,即提取2次,时间为每次1h,加水量分别为10倍量和8倍量。

摘要：目的用水提醇沉法从木菠萝粉末中提取木菠萝多糖。方法Sevage法脱蛋白,用硫酸—苯酚法测定木菠萝多糖含量。测定波长为495nm,正交试验设计选择得到木菠萝多糖的最佳显色条件。结果在10-60μg/ml范围内吸光度与被测物含量呈良好的线性关系,r=0.9999。测得多糖含量为5.53%,稳定性RSD=2.26%,回收率为102.16%。结论该方法简便、快速、准确、灵敏度高。

摘要：目的 利用响应面分析法对麦冬多糖的提取工艺进行优化.方法 根据 Box-Behnken 中心组合设计原理,采用响应面分析法优化提取温度、提取时间、提取次数及料液比 4 个因素对麦冬多糖得率的影响,利用Design-Expert 8.05b软件对试验数据进行回归分析.结果 麦冬多糖的最佳工艺条件为提取温度93℃,提取时间2 h,提取次数3次,料液比1：15 g/ml.结论 在此条件下,麦冬多糖的提取率为5.440%,与理论预测值的相对误差为7.328%。