摘要：目的设计针对可引起风湿热的A群链球菌M1、3、6、18四个血清型的重组多肽疫苗,合成并克隆该重组多肽疫苗的核苷酸序列。方法从美国疾病预防和控制中心(CDC)数据库获得A群链球菌1、3、6、18四个血清型M蛋白型特异性序列,根据文献报道并结合生物信息学的方法,筛选每一个血清型的特异性序列中与人体组织蛋白无同源性的区段,将其按1-3-6-18型的顺序串连,在串联序列的C-端加上一个四个血清型所共有的与人体组织蛋白无交叉表位、且具有一定免疫原性的保守序列J14。对设计的多肽疫苗的氨基酸序列进行与人体组织蛋白的BlastP比对、亲水性分析、二级结构分析、空间结构分析以及B细胞表位预测。采用DNAWORK2.0在线软件设计一组寡核苷酸引物,OverlapPCR方法合成该多肽疫苗的核苷酸序列,并在5′端和3′端分别引入BamHⅠ和HindⅢ的酶切位点,将该序列双酶切后克隆至pUC18载体上,并测序。结果软件分析显示,设计的多肽疫苗与人体组织蛋白无同源性,有较好的亲水性,二级结构与空间结构均与天然M蛋白相似,在每一个血清型的区段都可能存在B细胞表位。成功扩增出了该多肽疫苗的DNA序列,并获得了一个与设计序列完全一致的重组克隆载体。结论已成功设计了一种四价重组A群链球菌多肽疫苗,为其重组表达和免疫原性的研究奠定了基础。

摘要：设计基于B细胞表位和T细胞表位的禽传染性支气管炎病毒(IBV)多肽疫苗EpiA,并利用基因工程重组技术将EpiA在大肠杆菌中表达、纯化。ELISA和Western blot法验证其免疫原性后,将重组蛋白配以弗氏佐剂免疫鸡,并以灭活苗、GST和PBS为试验对照组。细胞免疫效应采用流式细胞仪(FACS)对免疫鸡外周血中CD4+,CD8+T淋巴细胞进行计数,IBV特异性抗体采用ELISA法进行检测,并进行攻毒试验。结果显示,成功设计了多肽疫苗EpiA:ELISA和Western blot证明所表达的融合蛋白能与标准IBV阳性血清产生特异性抗原-抗体反应,而且该融合蛋白能有效激发鸡体特异性体液和细胞免疫,与对照组差异显著(P≤0.01)。攻毒试验表明,多肽疫苗保护率可达73%,大肠杆菌生物合成重组抗IBV多肽疫苗将为IBV疫苗研究制备提供了新的途径。

摘要：从Adam等发现针对口蹄疫病毒的多肽疫苗,到Lerner建立多肽疫苗合成的方法,再到联合T、B细胞表位多肽疫苗设计的出现,新型疫苗的研制快速发展。

摘要：目的根据贵州省手足口病患儿肠道病毒71型(EV71)分离株的VP1结构蛋白序列研制多肽疫苗并研究其对小鼠的免疫保护作用。方法 2013年3月1日至2015年12月31日从贵州省手足口病患儿的咽拭子样本中分离到17株EV71毒株,其VP1氨基酸序列一致(共297个氨基酸),据此设计并合成多肽片段(除最后一段为27个氨基酸外,其余均为20个氨基酸);用感染EV71的手足口病病愈患儿的阳性血清,通过间接ELISA法筛选出免疫原性较好的多肽片段,制成多肽疫苗;用多肽疫苗免疫ICR健康雌鼠,并设未免疫的对照(Con);将雌鼠的子代小鼠随机分为注射和不注射EV71病毒颗粒的2个亚组;注射病毒2 d后处死所有小鼠,分别取小鼠的骨骼肌、小肠和脑组织,通过RT-PCR检测病毒感染情况,同时HE染色后在显微镜下观察病理改变。结果共设计并合成19段含交叉序列的多肽片段,从中筛选出3段免疫原性较好的(P2:VSRALTHALPAPTGQNTQVS;P4:ALQAAEIGASSNASDESMIE;P8:YANWDIDITGYAQMRRKVEL),制成多肽疫苗并免疫雌鼠,取雌鼠的子代小鼠进行后续试验。RT-PCR结果显示,各感染病毒亚组的骨骼肌、小肠和脑组织中均能检测到EV71病毒,而未感染病毒亚组均检测不到;病理结果显示,未接种多肽疫苗母鼠的子代小鼠在感染EV71病毒后,骨骼肌、小肠和脑组织均出现明显的炎性改变;接种多肽疫苗母鼠的子代小鼠骨骼肌、小肠和脑组织的炎性改变明显减轻,3种多肽疫苗对EV71所致炎症的改善作用无明显差异;接种多肽疫苗母鼠的未注射病毒亚组子代小鼠骨骼肌、小肠和脑组织中均未检测到EV71病毒,也未观察到明显的炎性改变。结论本研究成功制备VP1抗原表位多肽疫苗并在动物实验中证实了其有效性和安全性,可为今后相关疫苗的研制提供方法学借鉴。

摘要：根据A型口蹄疫病毒(FMDV)的VP1基因序列及国际上公认的抗病毒中和表位,并结合对口蹄疫病毒的研究成果,设计了A型FMDV的重组多肽疫苗.分别选择VP1上21～40位和137～160位氨基酸对应的基因序列为表位基因,组成137～160-21～40-137～160的串连结构,并以大肠杆菌β-半乳糖苷酶为大分子载体,构建重组质粒pLM99,在大肠杆菌中表达得到高含量的融和蛋白.体外免疫原性检测表明,所表达的融和蛋白与标准A型阳性血清有特异性抗原/抗体反应,即说明该融和蛋白具有免疫反应性.免疫豚鼠的实验结果表明,融合蛋白能在豚鼠体内诱导中和抗体,并使70%的豚鼠能抵抗病毒的攻击.

摘要：利用肿瘤抗原多肽疫苗进行肿瘤的临床免疫治疗已成为肿瘤根除性治疗的重要发展方向,随着诱导机体免疫应答的各类不同肿瘤抗原的不断发现,多种肿瘤多肽疫苗已进入临床试验,并取得一定的效果,但高效广谱的疫苗还有待于进一步研究,文中总结了设计选用肿瘤多肽疫苗的依据和原则,着重阐述了用作疫苗的肿瘤抗原的选择及其发展方向,为研究肿瘤抗原多肽疫苗提供参考。

摘要：本文介绍近年来代表肿瘤相关抗原、病毒和寄生虫保护性表位的多肽疫苗的研究进展,主要是多价抗原肽、分支多肽、融合或重组多肽、T细胞表位和肿瘤抗原肽疫苗设计方面的进展,它们虽然尚未实际使用,但目前正在探索其潜力.

摘要：根据病原体抗原基因中具有免疫原性的表位氨基酸序列,通过化学合成技术可制备该病原体的多肽疫苗。相较于灭活和减毒疫苗,多肽疫苗因成分简单、特异性强、安全性高、易于保存等优点成为疫苗研发的重点。然而,特异有效的疫苗候选表位的预测和筛选,仍是限制多肽疫苗设计与研发的一个重要因素。本研究综合多个生物信息学工具,构建了一个可用于预测和筛选病原体多肽疫苗候选表位的操作流程。并且,基于严重急性呼吸综合征冠状病毒2(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)的结构蛋白序列,该流程被成功地应用于其候选抗原表位的预测和筛选。最终,我们共筛选到34条关于SARS-CoV-2的T细胞候选表位,其中20条候选表位与数据库中经过验证的表位高度同源,且能够被T细胞受体(T cell receptor,TCR)识别。综上所述,本研究不仅为当下广泛蔓延的SARS-CoV-2的多肽疫苗设计提供了候选表位,还建立了一个广泛适用于多肽疫苗候选表位预测和筛选的工作流程。

摘要：端粒酶是在细胞衰老和肿瘤发生中发挥重要作用的核糖核蛋白酶，具有成为抗癌药物靶标的巨大潜力。此文以一种具有临床前景的端粒酶疫苗GV1001为例，论述了端粒酶疫苗的设计依据以及诱导机体产生抗肿瘤反应的生物学原理、免疫原性和临床疗效。结合已进行的Ⅰ／Ⅱ／Ⅲ期临床试验与取得的成果和经验，进一步将GV1001与其他针对端粒酶的免疫治疗方法相比较，对端粒酶疫苗未来的发展方向与需要解决的问题作一阐述，从而评价端粒酶疫苗成为未来肿瘤治疗标准的可行性。

摘要：端粒酶是在细胞衰老和肿瘤发生中发挥重要作用的核糖核蛋白酶，具有成为抗癌药物靶标的巨大潜力。此文以一种具有临床前景的端粒酶疫苗GV1001为例，论述了端粒酶疫苗的设计依据以及诱导机体产生抗肿瘤反应的生物学原理、免疫原性和临床疗效。结合已进行的Ⅰ／Ⅱ／Ⅲ期临床试验与取得的成果和经验，进一步将GV1001与其他针对端粒酶的免疫治疗方法相比较，对端粒酶疫苗未来的发展方向与需要解决的问题作一阐述，从而评价端粒酶疫苗成为未来肿瘤治疗标准的可行性。