摘要：本研究通过不同温度对大鲵胚胎发育的影响，结合实际养殖条件设计相关孵化器，旨在提高大鲵孵化率，并为大鲵规模化人工养殖创造条件和提供理论指导。

摘要：研究了碱性蛋白酶水解制备大鲵活性肽的工艺条件以及大鲵活性肽的理化性质。以水解度为指标,通过Box-Behnken实验设计方法,确定最佳工艺条件为:酶解温度50℃,酶解时间1.5 h,酶添加量70 U/g,p H8.91,液料比2∶1(m L/g),蛋白酶解液的水解度值为DH=19.61%±0.12%。所得大鲵活性肽的蛋白质含量为52.40%±1.28%。HPLC分析可知该大鲵活性肽的分子量多分布在1000.00 u以内。在30 mg/m L,大鲵活性肽对羟自由基和超氧阴离子自由基的清除率分别为81.83%、56.27%。

摘要：通过体外消化法测定大鲵皮体外消化率;使用Box-Behnken设计响应面实验,优化大鲵皮胶原蛋白提取工艺;并对胶原蛋白冻干样的功能性质进行研究。结果表明:经胃蛋白酶和胰蛋白酶处理的大鲵皮,其体外消化率高达96.66%;以加酶量、超声时间和提取时间为三因素,胶原蛋白提取率为响应值,利用响应面设计优化大鲵皮胶原蛋白提取率,其最优化参数为加酶量1000 U/m L料液、提取时间33 h以及超声时间12 min,此条件下最优大鲵皮胶原蛋白提取率为71.94%,与模型预测值(73.32%)较一致;在20℃、相对湿度43%和81%条件下,大鲵皮胶原蛋白能长时间保留20%水分;大鲵皮胶原蛋白在0.4 g/100 m L浓度,溶液p H7以及溶液盐离子浓度为1.25 mol/L时有最佳起泡性;当溶液p H4,盐离子浓度为0.25 mol/L时鲵皮胶原蛋白有最佳乳化性。

摘要：为探明Sox基因在物种进化中的保守性及其性别分型,以大鲵雌、雄个体为材料,参照Sox基因HMG-box保守区的序列,设计简并引物扩增,两因子均在雌、雄个体内得到217 bp PCR扩增产物,不存在性别差异。将二者编码的氨基酸序列与NCBI中其他物种Sox基因编码的氨基酸序列进行比对,其中一个基因与人、斑马鱼、家鼠、鸡、热带爪蟾、扬子鳄Sox11基因的同源性均为90%,另一个基因与罗非鱼、鸭嘴兽、家鼠、红鳍东方鲀、斑马鱼、鸡、人、非洲爪蟾和大鲵Sox14基因的同源性均为90%,故根据大鲵的学名,将这2个基因分别命名为adSox11和adSox14c。adSox11和adSox14c在大鲵精巢、卵巢、肾脏和心脏中均有不同程度表达,而在胃和肝脏中几乎不表达。

摘要：根据嗜水气单胞菌的溶血素(Hly A)、外膜蛋白(Omps)及丝氨酸蛋白酶(Ahp A)基因,分别设计3对特异性引物。通过3重PCR法对三对基因进行克隆与生物信息学分析。溶血素、外膜蛋白及丝氨酸蛋白酶基因的开放阅读框分别为1 863 bp、1 071 bp及894 bp,分别编码621、357及298个氨基酸。同时,对其氨基酸序列进行系统进化树构建、蛋白理化性质分析、蛋白信号区域和结构区域分析、蛋白二级结构预测、蛋白三级结构预测及蛋白免疫原性分析。本研究对大鲵源致病性嗜水气单胞菌主要毒力基因进行生物信息学分析,为进一步研究嗜水气单胞菌保护性抗原多样性而提供理论基础。

摘要：采用酶法水解大鲵蛋白制备蛋白粉,以水解度为指标,通过单因素试验和正交设计试验,研究了饲养大鲵蛋白的水解条件。结果表明:采用碱性蛋白酶:木瓜蛋白酶=1:3(g/g)为试验用酶,水解的最佳条件为料液比1:7、酶浓度2400 U/g、pH7.5、水解时间5 h、水解温度55℃,该条件下水解度可达36.18%。

摘要：根据Gen Bank中柱状黄杆菌16S r RNA序列,设计1对特异性引物,PCR扩增获得16S r RNA基因片段,并克隆到p MD-18T载体上作为阳性标准品。通过对SYBR Green I荧光定量PCR反应条件的优化,建立了黄杆菌的SYBR Green I荧光定量PCR诊断方法 ,以此为基础研制试剂盒。试剂盒扩增产物的熔解曲线分析只出现1个单特异峰,无引物二聚体,对嗜水气单胞菌、荧光假单胞菌、迟缓爱德华、弗氏柠檬酸杆菌均无阳性信号扩增,重复性好,灵敏度可达12拷贝/μL。结果表明,研制的柱状黄杆菌SYBR Green I实时荧光定量PCR试剂盒具有特异、灵敏、快速、重复性好等特征,适合于大鲵临床样品的检测。

摘要：为查明2010年以来陕西省养殖大鲵发病导致肺脏、肾脏囊肿的病原,在无菌条件下从发病大鲵内脏器官分离致病菌,结果从肝脏中分离到一株弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii),从肺脏、肾脏中未分离到致病菌。病理组织学观察结果显示,病鲵的肺泡、肾小管等上皮细胞变性、坏死,肝细胞广泛性空泡变性。透射电镜观察结果表明,肺脏、肾脏存在大量聚集或分散的病毒颗粒,病毒颗粒切面呈正六边形,对角直径约150nm,形态与虹彩病毒相似。根据已知虹彩病毒主要衣壳蛋白基因序列设计特异引物,提取病鲵的肝脏、肺脏、肾脏组织的DNA进行PCR扩增,将扩增片段进行序列测定与分析,结果表明该序列和推导的氨基酸序列与已报道的大鲵虹彩病毒(CGSIV)主要衣壳蛋白基因的核苷酸序列和氨基酸序列的同源性均为99%。综合试验结果判定引起病鲵肺脏、肾脏囊肿的病原是大鲵虹彩病毒。

摘要：建立一种快速诊断致病性嗜水气单胞菌的PCR法。根据嗜水气单胞菌的16S rDNA、外膜蛋白、溶血素及丝氨酸蛋白酶基因设计4对引物,经PCR反应条件优化后进行检测。结果表明,仅嗜水气单胞菌呈阳性,其检测敏感性高,可检测100 fg的DNA模板。20株大鲵源嗜水气单胞菌经四重PCR法检测时,有18株呈阳性。其中,毒力基因种类较多的阳性菌株经人工感染试验和胞外产物活性检测时显示出较高的致病性。利用该PCR法进行的其他检测中,还发现33份人工感染样本全部呈阳性,34份疑似样本有21份呈阳性,说明四重PCR法可应用于临床检测。本研究建立的四重PCR法具有高度敏感性和特异性,可用于嗜水气单胞菌快速诊断。

摘要：一、养殖池设计自然界大鲵生活在海拔300－800m的山区溪流中，有喜阴怕风、喜静怕惊、喜洁怕脏的特点，人工建造大鲵养殖池最好仿照大鲵自然界的生活状况来进行，可以选择山涧溪流和自然洞穴，也可在溪流通过的山壁开挖人工洞穴。