摘要：目的观察口服牛视网膜S抗原对人S抗原多肽-35诱发的实验性自身免疫性葡萄膜视网膜炎(EAU)的影响。设计实验性对照研究。研究对象20只雌性纯种Lewis大鼠。方法用人S抗原多肽-35诱发EAU,提纯牛视网膜S抗原诱导口服耐受,分高剂量组(2mg/次)和低剂量组(0.2 mg/次),同时设实验对照组(胎牛血清蛋白)。主要指标EAU发病情况和脾组织白介素-4 (IL-4)和γ-干扰素(IFN-γ)的表达水平。结果口服高剂量组的Lewis大鼠的EAU发病情况较实验对照组有显著减轻(P<0.05),而且口服高剂量组Lewis大鼠脾组织IL-4的表达水平则高于实验对照组(F=4.214,P=0.017)。结论口服高剂量牛视网膜S抗原诱导的免疫耐受可以成功抑制人S抗原多肽-35诱发的实验性自身免疫性葡萄膜视网膜炎。

摘要：目的观察可诱导共刺激因子(inducible co-stimulator factor,ICOS)短发夹状RNA(short hairpin RNA,shRNA)对大鼠活化T细胞中ICOS基因的沉默效应,筛选有效干扰靶点。方法设计合成ICOS RNA寡核苷酸片段,经退火、连接等步骤克隆至线性化的pRNAT-U6.1/Neo真核表达载体上,测序鉴定。应用Lipofectamine2000将该质粒转染活化的大鼠T细胞,荧光定量RT-PCR检测ICOS mRNA表达情况,Western blot检测ICOS蛋白表达情况。结果成功构建了3个靶点的重组质粒pRNAT-U6.1/Neo-ICOS-siRNA1、2、3,荧光定量RT-PCR和Western blot显示转染这3种重组质粒的T细胞ICOS mRNA和蛋白表达均较对照组有不同程度的下降,其中1号靶点的干扰效应最为明显。在转染后的T细胞中,其抑制率分别达到了51.3%、78.3%.结论重组质粒pRNAT-U6.1/Neo-ICOS-siRNA能有效抑制大鼠活化T细胞中ICOS基因的表达,并筛选出了有效干扰靶位。RNA干扰技术有望成为研究ICOS在实验性自身免疫性葡萄膜视网膜炎中作用的有效手段。