摘要：目的:观察缺氧诱导因子HIF-1α反义寡核苷酸(antisense oligonucleotides,ASODN)在缺氧环境下对骨肉瘤MG-63细胞HIF-1α和p53表达的影响。方法:设计针对HIF-1α亚基的mRNA反义和正义寡核苷酸(sense oligodeoxynucleotides,SODN),并建立骨肉瘤细胞体外缺氧培养模型,观察不同时相5μmol/L的HIF-1αASODN对骨肉瘤MG-63细胞HIF-1α和p53表达的影响。半定量RT-PCR方法检测HIF-1α和p53 mRNA的转录水平,免疫组化SP法和免疫印迹(Western blot)检测HIF-1α和p53蛋白表达情况。结果:与常氧组比较,单纯缺氧组及SODN缺氧组的蛋白表达水平随缺氧时间延长明显升高(P<0.05);而p53 mRNA以及蛋白的表达水平较常氧组均显著增强(P<0.05)。在ASODN缺氧组,HIF-1α蛋白表达水平显著降低(P<0.05);p53 mRNA及其蛋白的表达水平也明显减弱(P<0.05)。结论:缺氧可以通过诱导野生型p53的突变使HIF-1α稳定表达。而ASODN明显抑制HIF-1α的表达,且使突变型p53的表达水平显著下降,这说明HIF-1α可能在缺氧诱导野生型p53突变方面有一定的作用。

摘要：目的研究存活蛋白反义寡核苷酸对宣威肺腺癌细胞株(XWLC)-05增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法通过设计合成XWLC-05靶向存活蛋白反义寡核苷酸。将其分为对照组、单纯脂质体组(Lip组)、正义寡核苷酸转染组(Lip-SODN组)、反义寡核苷酸转染组(Lip-ASODN组)。转染48h后,蛋白质印迹法检测各细胞组中存活蛋白表达情况,流式细胞仪检测各细胞组凋亡率。结果转染后的XWLC-05存活蛋白表达明显下降。Lip-ASODN组细胞在12、24、48h凋亡率分别为3.01±0.26、7.89±2.63、17.24±3.92,明显高于其他组(P<0.05)。结论存活蛋白反义寡核苷酸转染能下调宣威肺腺癌细胞株XWLC-05存活蛋白表达,诱导细胞凋亡,抑制细胞增殖。