摘要：目的:观察甘草糖提取物对小肠上皮细胞(IEC-6)迁移及细胞内多胺(腐胺、精脒和精胺)含量的影响。方法:划痕法造细胞损伤后迁移模型,柱前衍生-高效液相色谱法测定细胞内多胺含量。观察甘草糖复合物对细胞迁移及细胞内多胺含量的影响;观察甘草糖复合物对二氟甲基鸟氨酸(DFMO)致细胞迁移抑制和多胺合成抑制的影响。结果:甘草糖提取物(50、100 mg/L)能促进细胞迁移;可逆转由DFMO所致的细胞迁移抑制;可提高细胞迁移过程中细胞内多胺含量;可逆转由DFMO所致的多胺含量降低。结论:甘草对胃肠黏膜损伤的修复作用可能与其提高细胞多胺含量、促进细胞迁移有关。

摘要：目的建立检测小肠上皮细胞(IEC-6)多胺含量的方法,为病理生理及药理研究中检测该细胞多胺含量提供参考。方法采用苯甲酰氯柱前衍生反相高效液相色谱法,以多胺(腐胺、精脒和精胺)含量为指标,苯甲酰氯为衍生化试剂,采用ODS-C18柱,考察和优化衍生化条件以及色谱条件。结果当衍生温度为50℃,衍生时间为8 h时,各指标成分的峰面积均较大;在柱温为25℃、流动相为甲醇∶水(55∶45)、流速1.0 ***-1、检测波长234 nm的条件下,各指标成分峰分离良好。线性范围:腐胺0.054～1.35 nmol,精脒0.046～1.15 nmol,精胺0.080～2.00 nmol,r2≥0.9995;高、中、低浓度的日内精密度:腐胺RSD 1.5%～3.2%,精脒RSD 1.2%～4.5%,精胺RSD 1.3%～4.1%;日间精密度:腐胺RSD 1.2%～2.7%,精脒RSD 1.0%～3.5%,精胺RSD0.8%～3.9%;高、中、低浓度的回收率:腐胺85%～110%,精脒88%～110%,精胺90%～108%。结论建立的苯甲酰氯柱前衍生高效液相色谱法适用于小肠上皮细胞中多胺含量的测定。

摘要：本试验旨在研究不同浓度的胰高血糖素样肽-2(GLP-2)对断奶仔猪小肠黏膜上皮细胞形态、增殖及其酶活力的影响。试验采用单因子试验设计,以体外培养的28日龄断奶仔猪回肠上皮细胞作为模型,细胞培养液中的人胰高血糖素样肽-2(hGLP-2)浓度分别为0、1×10-11、1×10-10、1×10-9、1×10-8和1×10-7mol/L,培养时间为144 h。结果表明,加入hGLP-2培养细胞96 h后,28日龄断奶仔猪回肠上皮细胞已具备单层柱状上皮细胞的典型特征,各试验组细胞数量均显著多于对照组(P<0.05),相对应的MTT OD值均极显著高于对照组(P<0.01);各试验组培养液乳酸浓度、总蛋白含量和蛋白质沉积量都显著高于对照组(P<0.05);各试验组的胞外碱性磷酸酶、乳酸脱氢酶和肌酸激酶活力都极显著低于对照组(P<0.01),各试验组的Na+-K+-ATP酶活力都显著高于对照组(P<0.05)。由此可知,GLP-2可以促进体外培养的28日龄断奶仔猪小肠黏膜上皮细胞增殖,抑制细胞凋亡,维持细胞形态的完整性。

摘要：目的筛选益气健脾中药黄芪和白术促进小肠上皮细胞(IEC-6)迁移的有效提取部位。方法以系统溶剂分离法从黄芪、白术药材分别得到糖复合物、正丁醇萃取物、醇沉上清液以及大孔树脂吸附后70%乙醇洗脱部位作受试药。IEC-6细胞接种于6孔板并培养24 h,划痕法造细胞迁移模型,划痕后加入各受试药,24 h后观察细胞迁移情况;并进一步观察具有促进细胞迁移的有效部位对二氟甲基鸟氨酸(DFMO)所致细胞迁移抑制的影响。结果 50 mg.L-1的黄芪糖复合物或白术糖复合物能促进细胞迁移(P<0.01);黄芪、白术的正丁醇萃取物、醇沉上清液、大孔树脂吸附后醇洗脱部位对细胞迁移均无明显影响;2.5 mmol.L-1的DFMO能抑制细胞迁移(P<0.01),加入DFMO同时加入100 mg.L-1黄芪糖复合物或200 mg.L-1白术糖复合物能使细胞迁移恢复至接近正常水平。结论黄芪糖复合物和白术糖复合物能促进IEC-6细胞迁移,还能使DFMO所致的细胞迁移抑制恢复至接近正常水平。

摘要：目的:观察党参、甘草的皂苷和黄酮提取部位对小肠上皮细胞(IEC-6)迁移的影响。方法:以回流提取法分别提取党参和甘草的皂苷、黄酮部位,并用D101大孔吸附树脂对各部位进行分离纯化,以分光光度法检测含量。IEC-6细胞种植于6孔板并培养24小时,划痕法造细胞迁移模型,划痕后加入各种受试药,24小时后观察细胞迁移情况。结果:党参和甘草黄酮含量(以芦丁计)分别为41.73%和50.98%;党参皂苷含量(以人参皂苷Re计)为40.57%;甘草皂苷含量(以甘草酸计)为57.01%。50mg/L的党参黄酮部位和甘草黄酮部位能促进细胞迁移(P<0.05);党参和甘草的皂苷部位对细胞迁移无明显影响。结论:党参、甘草黄酮部位有促进IEC-6细胞迁移作用,党参、甘草皂苷部位对IEC-6细胞迁移无明显影响。

摘要：本实验以小肠上皮细胞(IPEC-J2)为模型,旨在评估是否蒜臭素(DADS)和大蒜素(DATS)可缓解氧化应激和内毒素应激。实验采用2×2×2因子设计,处理分别为0或18μM的DADS和DATS,0或100μM过氧化氢应激剂,0或10μg/mL内毒素应激剂(LPS),每个处理8个重复。细胞培养在含有DADS和DATS的培养基中18小时,LPS中6小时,过氧化氢中3小时。RT-PCR方法检测细胞因子白介素IL-8、肿瘤坏死因子TNF-α、紧密连接蛋白Claudin 1、occludin、ZO-1的基因表达量。测定跨上皮电阻值(TEER)、培养液上清中过氧化氢酶和IL-8蛋白的顶端分泌量。实验结果表明,LPS刺激可显著提高IPEC-J2中TNF-α和IL-8的基因表达量(P<0.01),而添加过氧化氢和DADS+DATS无显著差异。DADS+DATS有提高IPEC-J2中ZO-1基因表达量的趋势(P=0.08),DADS+DATS和过氧化氢处理没有影响TEER值,但LPS处理有降低TEER值的趋势(P=0.02)。过氧化氢处理显著降低了细胞过氧化氢酶活性(P<0.01),但DADS+DATS预孵会显著恢复其活性(P<0.01)。LPS处理显著提高IL-8的分泌(P<0.01),但DADS+DATS预孵其分泌量进一步增长(P<0.01)。基于当前研究结果得出,DADS+DATS处理能缓解过氧化氢引起的氧化应激,同时能改变LPS处理的IPEC-J2的IL-8分泌量。