摘要：为了解山羊TGFB3基因的多态性,并为优秀山羊品种的选育提供理论依据,选择牛TGFB3基因组序列(NM_001101183)设计1对特异性引物,采用DNA池PCR直接测序法快速检测黔北麻羊、内蒙古白绒山羊和关中奶山羊3个山羊品种的TGFB3基因的多态性。结果表明,只在黔北麻羊TGFB3基因第1外显子212bp处发现1个多态性(SNP)位点(G-212-A)。利用生物信息学分析TGFB3基因5’侧翼调控序列,转录因子结合位点96分以上的有28个(CdxA有2个,HSF有18个,ADR1有2个,AML1a有1个,GCR11有3个,cap有1个,RY有1个),在TGFB3基因5’调控区没有发现CpG island。

摘要：旨在利用RNA干扰技术,明确Wnt10b基因对山羊前体脂肪细胞分化的影响。设计合成山羊Wnt10b siRNA序列,利用胶原酶消化法获得山羊皮下和肌内前体脂肪细胞。利用有效的siRNA序列干扰山羊皮下和肌内前体脂肪细胞Wnt10b基因表达后,检测其对细胞分化及脂肪细胞分化标志基因表达的影响。结果表明,筛选获得有效的山羊Wnt10bsiRNA序列,转染山羊皮下和肌内前体脂肪细胞后,Wnt10b被显著干扰,其mRNA表达量分别下调63%(P<0.01)和67%(P<0.01);油红O染色结果显示,干扰Wnt10b基因可明显抑制山羊皮下和肌内脂肪细胞的脂滴积聚;且干扰Wnt10b基因后,在皮下前体脂肪细胞分化过程中C/EBPβ、PPARγ、SREBP1和Pref1基因出现极显著下调(P<0.01),LPL出现显著下调(P<0.05);而在肌内前体脂肪细胞分化过程中,AP2和LPL基因出现极显著下调(P<0.01),C/EBPβ出现显著下调(P<0.05),Pref1出现极显著上调(P<0.01)。本试验发现,Wnt10b基因可能通过调控C/EBPβ、PPARγ、SREBP1和LPL的表达来促进山羊皮下前体脂肪细胞分化,通过调控AP2、LPL、C/EBPβ和Pref1的表达来促进山羊肌内前体脂肪细胞分化。

摘要：背景:颈椎病手术中常用钛合金颈椎融合器,但其出现下沉等情况常影响疗效。目的:观察自制高分子聚乙烯颈椎融合器在动物体内应用后的生物相容性和稳定性。设计:随机分组,观察对比实验。单位:郑州大学动物实验中心。材料:雌性未孕山羊20只,年龄在1.1～1.6岁。方法:实验于2001-06/11在郑州大学动物实验中心完成。①将山羊随机分为实验组10只,对照组10只。②实验组植入自制颈椎融合器,内填塞自体松质骨,对照组植入自体髂骨块。③6周后两组山羊分别摄X射线片观察椎间隙高度改变;并在麻醉状态下处死动物,将部分颈椎标本置于YJ-14生物力学试验机上测试抗压缩力、椎间隙高度及做病理学观察。主要观察指标:①两组抗压缩力测试及颈椎椎间隙的高度变化。②两组椎间融合处组织病理学观察结果。结果:①两组抗压缩力测试及颈椎椎间隙的高度变化:实验组压缩载荷显著大于对照组[(358.64±15.63),(268.82±11.36)N,P0.05)。②两组椎间融合处组织病理学观察结果:实验组融合器周围组织切片有大量骨母细胞生长,与对照组无明显差别。结论:自制颈椎融合器具有很强的支撑力和良好的稳定性,可起到稳定颈椎间隙高度的作用。

摘要：试验旨在克隆山羊碱性氨基酸转运载体基因SLC3A1cDNA序列,探究其表达的组织特异性及其在小肠中的表达发育模式。参考GenBank已发表的绵羊、牛SLC3A1基因mRNA序列设计引物,克隆山羊SLC3A1基因的cDNA序列,采用实时荧光定量PCR的方法分析其在1日龄山羊11种组织及其在1日龄、6月龄、8月龄、10月龄、12月龄山羊十二指肠、空肠、回肠中的mRNA表达情况。结果表明,成功克隆得到了山羊SLC3A1基因cDNA序列,其与绵羊、牛、野猪、人、小鼠、大鼠的同源性分别为99%、97%、88%、86%、80%和79%。SLC3A1基因转录表达有明显的组织特异性,其在1日龄山羊肾脏、回肠、空肠、结肠中表达量依次降低（P〈0.05）,其他组织中表达量很低。同一月龄山羊,SLC3A1基因在不同肠段的表达量数值上回肠〉空肠〉十二指肠。SLC3A1基因在不同月龄山羊十二指肠表达量以1日龄山羊为最高（P〈0.05）,6~12月龄山羊相同肠段之间表达量无显著差异（P〉0.05）;空肠表达量随山羊年龄的增加均呈现逐步降低的趋势;回肠表达量在各个月龄山羊之间差异不显著（P〉0.05）。结果说明,山羊碱性氨基酸转运载体基因SLC3A1的主要表达部位在肾脏和肠道,推测b0,＋碱性氨基酸转运系统转运氨基酸的主要部位为肾脏和肠道。SLC3A1基因在山羊小肠受肠段和发育阶段的影响,具有不同的表达发育模式。

摘要：为研究不同精粗比日粮对山羊内脏氨基酸吸收与代谢的影响,选择6头平均体质量为40 kg的非泌乳山羊采用随机交叉试验设计评价日粮对内脏[门静脉排流组织(PDV)和肝脏]氨基酸吸收与代谢规律。分别在动物肠系膜静脉、门静脉、肝静脉与股动脉安装慢性多血管瘘用于采集血样,氨基马脲酸(PAH)用于血流量测定。试验日粮分高精料组(HC)和高粗料组(HF),2组饲料的精饲料和粗饲料分别占60%与40%和40%与60%。每个试验期的最后3 d于动物采食前(0 h)和采食后2、4、6、8 h分别从门静脉、肝静脉与股动脉采集血样。结果显示:与HF日粮相比,HC日粮显著提高门静脉与肝静脉血浆流量(P<0.05),显著提高门静脉血浆中Arg、His、Ile、Met、Thr与Val等必需氨基酸(EAA)以及Ala、Cit、Orn、Ser与Tyr等非必需氨基酸(NEAA)的浓度(P<0.05),增加门静脉支链氨基酸(BCAA)、总必需氨基酸(TEAA)(P<0.05)及趋向提高总氨基酸(TAA)(P=0.07)浓度。除Glu被PDV组织清除外,PDV组织净释放其他所有的氨基酸;并且HC日粮显著增加PDV中Leu、Lys、Met、Phe、Thr等EAA以及Ala、Cit、Ser、Tyr等NEAA流量(P<0.05),提高PDV中BCAA(P=0.05)、TEAA(P=0.05)与TAA(P<0.05)的流量。肝脏除净释放Asp、Glu与Orn外,净摄取其他氨基酸。HC日粮显著增加肝脏对His、Leu、Lys、Thr、BCAA与TEAA摄取量。结论:HC日粮能够增加动物整个内脏的BCAA、TEAA、总非必需氨基酸(TNEAA)及TAA的释放量。

摘要：本试验旨在研究不同金针菇菌渣添加比例对山羊饲粮养分表观消化率及氮平衡的影响。选用4只体重为（22.5±0.6）kg的波尔山羊×徐淮山羊（波杂山羊）,采用4×4拉丁方设计,金针菇菌渣在饲粮中的添加比例分别为0（对照）、15%、25%和40%,用于替代稻草,4组饲粮营养水平接近;试验分为4期,每期15 d,其中预试期10 d,正试期5 d。结果表明：1）与对照组比较,饲粮金针菇菌渣添加比例为15%、25%和40%时对山羊的钙、磷表观消化率无显著影响（P〉0.05）,但能够显著提高干物质、有机物、中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维以及总能表观消化率（P〈0.05）,且这些指标随金针菇菌渣比例的升高逐渐降低。2）与对照组比较,饲粮金针菇菌渣添加比例为15%、25%和40%时显著提高了山羊氮沉积率以及氮生物学价值（P〈0.05）,且这2个指标随金针菇菌渣比例的升高逐渐降低。结果提示,在饲粮中添加金针菇菌渣可以提高山羊对营养物质消化率;在本试验条件下,金针菇菌渣在山羊饲粮中的最适宜添加比例为15%-25%。

摘要：通过设计特异性引物MT-ⅢSP1和MT-ⅢSP2,采用RT-PCR方法从山羊脑组织中克隆出金属硫蛋白-Ⅲ(MT-Ⅲ)基因编码区全序列,片段长度均为207 bp,提交GenBank,登录号为:EF471976。山羊MT-Ⅲ基因编码68个氨基酸,含19个半胱氨酸,不含芳香族氨基酸和组氨酸。BLAST比对结果表明,山羊与牛、绵羊、狗、猪、人、黑猩猩和鼠的氨基酸同源性分别为99.5%、98.6%、89.4%、88.5%、88.2%、88.2%和83.8%,说明MT-Ⅲ在物种间高度同源,进化上高度保守,含有MT-Ⅲ特有的MDPET、C-X-C、C-C-X-C-C、C-X-X-C、KKS(X为非Cys外的其它氨基酸)等保守的短肽结构。系统进化树结果表明,由核苷酸序列与氨基酸序列建立的系统进化树结果一致,并与比较形态学和比较生理学分类结果一致。

摘要：本试验旨在研究饲粮中添加不同水平单宁和高单宁饲粮条件下添加聚乙二醇（PEG）对绵羊和山羊瘤胃总细菌、总厌氧真菌、原虫数量和营养物质表观消化率的影响。选取1.5-2.0岁、体重45 kg左右、安装有永久性瘤胃瘘管的绵羊和绒山羊各4只为试验动物。采用自身对照设计,共分4期进行,第1期饲喂基础饲粮（Ⅰ组,对照组）,第2、3、4期除饲喂基础饲粮外再分别添加占采食量2%单宁（Ⅱ组）、6%单宁（Ⅲ组）、6%单宁＋12%PEG（Ⅳ组）;每期试验30d,其中预试期12 d,正试期18 d。结果表明：1）山羊Ⅲ组有机物（OM）、粗蛋白质（CP）、酸性洗涤纤维（ADF）表观消化率,Ⅳ组干物质（DM）、OM、CP表观消化率均显著低于对照组（P〈0.05）。绵羊营养物质表观消化率各组之间无显著差异（P〉0.05）。2）晨饲前（0 h）山羊Ⅲ、Ⅳ组,6 h绵羊和山羊Ⅳ组瘤胃原虫数量均显著低于对照组（P〉0.05）。3）0 h绵羊和山羊试验组瘤胃总细菌数量显著低于对照组（P〈0.05）。6 hⅡ、Ⅲ组山羊瘤胃总厌氧真菌的数量显著低于对照组（P〈0.05）。结果提示,在饲粮中添加单宁会降低瘤胃总细菌和总厌氧真菌数量以及营养物质表观消化率,PEG可削弱单宁对瘤胃总细菌生长的影响;山羊的瘤胃微生物区系受单宁的影响程度比绵羊更大。

摘要：本试验旨在研究不同物理有效纤维(peNDF)水平饲粮制粒对山羊养分表观消化率的影响。选取4只体重约为25 kg的波杂公山羊(波尔山羊×徐淮山羊),采用4×4拉丁方试验设计,4只试验山羊分别饲喂4种不同的饲粮。饲粮A、B分别为peNDF水平为22.69%的粉料、颗粒料,饲粮C、D分别为peNDF水平为31.69%的粉料、颗粒料。4种饲粮的中性洗涤纤维、粗蛋白质含量及总能等相等或接近。试验分为4期,每期15 d,其中预试期10 d,正试期5 d。结果表明:1)低peNDF水平下,与饲粮A相比,饲粮B显著提高了酸性洗涤纤维、粗蛋白质、干物质、有机物、钙、磷表观消化率及氮保留量、氮保留率与氮生物学价值(P0.05)外,其余养分表观消化率均显著提高(P<0.05)。由本试验结果得出,在高和低2种peNDF水平下,饲粮经制粒均提高了山羊的养分表观消化率。

摘要：为明确羊口疮病毒ORFV129锚蛋白在细胞中的定位,参照GenBank中收录的ORFV SY 17全基因组(登录号:MG 712417.1)序列设计引物,扩增ORFV129基因完整编码框并测序鉴定,利用生物信息学软件分析该基因编码蛋白的氨基酸序列、蛋白跨膜区域,预测其亚细胞定位;并将ORFV129完整基因连接到真核表达载体pEGFP-N1,经双酶切鉴定及测序鉴定是否成功构建重组表达质粒pEGFP-ORFV129;利用LipoGeneTM 2000介导将pEGFP-ORFV129转染新生山羊睾丸原代细胞,通过Western Blot鉴定ORFV129蛋白是否正确表达,同时,经DAPI核酸染料对细胞核进行染色后,激光共聚焦显微镜观察ORFV129蛋白的亚细胞定位。结果显示,成功扩增ORFV129完整基因,该基因全长大小为1551 bp,测序鉴定其正确;生物信息学分析发现,其编码516个氨基酸,含有8种锚蛋白ANKs重复基序(ANKs),不存在跨膜区域,亚细胞定位预测其蛋白主要定位于细胞质;Western Blot结果显示,转染了pEGFP-ORFV129重组质粒的山羊睾丸原代细胞中检测到了ORFV129蛋白的表达;亚细胞定位结果表明,ORFV129蛋白主要定位于细胞质,与预测结果一致。研究结果为进一步探明ORFV129蛋白在诱导机体免疫应答中的作用奠定了基础。