摘要：目的从川西獐牙菜Swertia mussotii中克隆牻牛儿基焦磷酸合成酶(Sm GPPS)编码基因,并进行生物信息分析及该基因的表达研究。方法根据川西獐牙菜转录组Sm GPPS基因序列,设计特异性引物,通过RT-PCR扩增得到c DNA序列,通过生物信息对该序列进行分析;构建原核表达载体p ET-28a-Sm GPPS,转入大肠杆菌BL-21(DE3)中,在37℃、1 mmol/L IPTG诱导下进行表达。采用半定量RT-PCR方法检测Sm GPPS基因在川西獐牙菜不同组织中的表达强度。结果 Sm GPPS c DNA全长1 119bp,编码372个氨基酸。并对其蛋白二级、三级结构进行了分析和预测。Sm GPPS蛋白与其他植物中GPPS蛋白具有高度的相似性。SDS-PAGE结果表明所表达蛋白与预期蛋白大小一致。半定量RT-PCR结果表明Sm GPPS在叶中表达量最高。结论为进一步研究该基因的功能和利用基因工程手段提高川西獐牙菜中环烯醚萜类化合物产量提供了基础。

摘要：目的星点设计-效应面法优化川西獐牙菜的提取工艺。方法以乙醇体积分数、提取时间、溶媒比为自变量,龙胆苦苷收率和浸膏得率为因变量,通过对自变量各水平的多元线性回归及二项式拟合,用效应面法选取较佳工艺,并进行预测分析。结果确定最优提取工艺为86%乙醇12.4倍量回流提取3次,每次63 min。结论星点设计-效应面法优选的川西獐牙菜提取工艺,方法简便,精度更高。

摘要：目的了解川西獐牙菜Swertia mussotii Franch甲羟戊酸途径中的关键酶甲羟戊酸激酶基因(MK)的功能,并进一步推进川西獐牙菜中的甲羟戊酸途径的研究。方法根据川西獐牙菜的转录组信息,获得了川西獐牙菜MK(SmMK)基因的全长cDNA序列,并且设计了特异性引物,利用RT-PCR对该基因进行了克隆;利用生物信息学方法,对SmMK基因的序列进行分析;构建原核表达载体MBP-SmMK,转入大肠杆菌Rosetta(DE3)中,然后对Sm MK基因进行了原核表达,并对其进行了纯化。结果SmMK基因cDNA全长为1 164 bp,共编码387个氨基酸。SmMK与其他植物中的MK具有较高相似性。对其信号肽、跨膜区域、蛋白定位及二级结构和三维构象进行了预测分析。SDS-PAGE检测表明所纯化蛋白与预期蛋白的大小相一致,为40970。结论为进一步研究川西獐牙菜中MK的功能奠定了基础,并为进一步研究川西獐牙菜中的甲羟戊酸途径,提高川西獐牙菜中类异戊二烯化合物的产量提供了依据。

摘要：目的:建立川西獐牙菜药材的1H-NMR指纹图谱,为其质量评价提供新方法。方法:以氘代甲醇和重水为提取溶剂,采用1H-NMR分析技术建立指纹图谱,并利用相关系数法计算不同批次药材指纹图谱的相似度。结果:从川西獐牙菜提取物中共鉴定了25个初生和次生代谢产物,包括五环三萜类、环稀醚萜苷类、口山酮及其苷类、黄酮类、氨基酸类、糖类、脂肪酸类及有机酸类等成分。另外,10批药材指纹图谱的平均相似度为0.981。结论:1H-NMR分析方法具有整体性的特征,并且样品制备简单、分析快速、重复性好,建立的指纹图谱为川西獐牙菜药材的质量控制与评价提供了科学依据。

摘要：采用正交设计试验方法,研究了低频电流密度与作用时间辅助纳米TiO2光催化对川西獐牙菜种子萌发能力的影响。结果表明：影响种子萌发的主要因素是电流密度,电流作用时间是次要因素。经正交试验结果得出的优化组合为：电流密度（3-5）mA/cm^2,作用时间20 min,光催化剂浓度200 mg/kg。采用低频电流辅助纳米TiO2光催化剂处理,能够明显促进川西獐牙菜种子萌发。

摘要：目的　比较藏药“藏茵陈”原植物川西獐牙菜及近年市场出现混淆种类的ITS序列 ,为分子序列鉴定提供参照系统并为寻找新的药用植物来源提供分子证据。方法　利用PCR扩增和ABI377自动测序。结果　川西獐牙菜不同居群间的序列相同 ,与其混淆种类之间存在一定的分子序列差异 ,有其特定的分子序列 ;利用Paup程序聚类分析表明川西獐牙菜与抱茎獐牙菜聚在一起。结论　ITS序列可正确鉴定川西獐牙菜与其混淆种类 ,他们之间的分子序列差异为进一步设计特异性分子鉴定试剂盒提供了科学依据 ;抱茎獐牙菜可考虑作为“藏茵陈”药材的新植物来源。

摘要：对与藏药"藏茵陈"药材质量、真伪密切相关的药材来源进行鉴别.首先考察、鉴定市售"藏茵陈"药材伪品原植物种,通过对这些植物进行分子序列分析,来比较正品原植物与伪品植物的分子序列碱基位点和分子片段的区别,从而筛选出可靠的分子标记来鉴别"藏茵陈"原植物川西獐牙菜Swertia mussotiiFranch.的真伪.根据"藏茵陈"原植物特异性的分子片段,设计专用于鉴别川西獐牙菜的PCR引物,用该引物在不同条件下扩增正品及伪品"藏茵陈"模板DNA,建立只有正品川西獐牙菜具有阳性扩增的PCR鉴别条件.从而建立一种简便、适用的"藏茵陈"川西獐牙菜的DNA分子鉴别方法.