摘要：为建立检测小麦中链格孢菌（Alternaria alternata ）的方法，从河南省小麦黑胚籽粒上分离得到7个优势 *** 病原菌株，对其 rDNA 的内部转录间隔区序列（ITS）进行测序，序列比较表明，分离到的病原菌株与 GenBank 公布的 *** 的 ITS 区序列一致性达到99％～100％。根据 Alternaria 属菌株（***、***、***）和麦类根腐离蠕孢菌（Bipolaris sorokiniana ）的 ITS 序列比对结果，设计出1对 *** 特异性引物 Aa1F/Aa1R。利用多种河南省小麦的主要病原真菌对该引物的特异性进行验证，只有在 *** 中能特异性地扩增出1条443 bp 的 DNA 片段。以真菌通用引物 ITS1/ITS4为外侧引物、特异性引物Aa1F/Aa1R 为内侧引物进行巢式 PCR 扩增，能检测到 *** DNA 的最低质量浓度为50 pg/μL。因此，建立的巢式 PCR 方法能够快速、特异地检测小麦中的 ***。

摘要：为研究巢式PCR检测奶牛隐性乳房炎链球菌的灵敏度,以本实验室从新鲜奶样中分离并经过生理生化鉴定的乳房链球菌、无乳链球菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌为研究对象,提取细菌DNA,采用巢式PCR技术,根据细菌16S rRNA序列保守区设计通用引物进行第1次PCR扩增,再在乳房链球菌16S rRNA保守区内的可变区设计特异引物对4种病原菌进行第2次PCR检测。结果表明:巢式PCR技术能检测出乳房链球菌16S rRNA保守区的可变区序列,与生理生化鉴定结果一致。该方法能快速有效检测出奶牛隐性乳房炎乳房链球菌。

摘要：目的:建立巢式逆转录聚合酶链式反应(nestedreversetranscriptase-polymerasechainreaction,nestedRT-PCR)扩增MMP-7mRNA,检测大肠癌淋巴结微转移.方法:据MMP-7基因序列设计两对引物,建立巢式RT-PCR扩增体系,检测MMP-7mRNA在30例行根治性手术大肠癌患者187个淋巴结中及10例良性肠道疾病患者25个淋巴结中的表达,并与传统组织学检查相比较.结果:大肠癌患者30例187个淋巴结中97个MMP-7mRNA表达,阳性率51·87%(97/187),病理学检查仅57个淋巴结有肿瘤转移;10例良性肠道疾病25个淋巴结扩增结果阴性.结论:巢式逆转录聚合酶链式反应检测淋巴结MMP-7mRNA的表达是诊断大肠癌微细胞转移灵敏的指标,其结果较常规病理组织学检查敏感,可对精确大肠癌的临床分期、判断患者预后及治疗提供一定理论依据.

摘要：目的　了解新型肝炎病毒输血传播病毒 (transfusiontransmittedvirus,TTV)在原发性肝癌 (PLC)患者中的感染状况。方法　在TTV长的ORF保守区设计引物 ,建立巢式聚合酶链反应 (PCR)技术 ,检测了 15 1例原发性肝癌患者血清中TTVDNA。结果　 15 1例原发性肝癌患者中有 2 8例TTVDNA阳性 ,阳性率为 18 5 % ;而同时检测 12 5例正常人血清只有 3例TTV阳性 ,阳性率为 2 4 %。结论　TTV在原发性肝癌患者中存在 。

摘要：目的　调查西安地区职业献血员及血透患者和不同类型肝炎患者ＴＴＶ（ｔｒａｎｓｆｕｓｉｏｎ ｔｒａｎｓｍｉｔｔｅｄ ｖｉｒｕｓ） 感染状况．方法　在ＴＴＶ ＯＲＦ１ 区设计两套引物，用巢式聚合酶链反应（ｎｅｓｔｅｄＰＣＲ） ，检测我院有偿献血员２０８ 例，血液透析患者３０例及我院住院的非肝炎患者１２８ 例，不同类型肝炎患者１４７ 例ＴＴＶ 感染率．结果　西安地区职业献血员ＴＴＶ 阳性率１６－８ ％ （３５／ ２０８） ，血透患者ＴＴＶ 阳性率４７ ％ （１４／ ３０） ，非肝炎患者ＴＴＶ 阳性率２－２ ％ （３／ １２８ ） ， 前两组与后一组统计处理（χ２ ＝ １４－２６ ）（χ２ ＝ ４７－２８） （χ２ ＝ ４９－４８ ，Ｐ＜ ０－００１） ，整体比较（χ２ ＝ ４１－８８６ ，Ｐ＜ ０－００１） ． 非甲－ 戊型肝炎６０ ％ （９／ １５） ， 庚型肝炎组为５０ ％ （６／ １２） ，乙型肝炎组为２６ ％ （２１／ ８０） ，丙型肝炎组为１９ ％（６／ ３１） ，甲型肝炎组０（０／ ９） ．结论　西安地区与血液紧密接触人群中存在严重的ＴＴＶ 感染，其分布支持ＴＴＶ 以输血传播为主特性． 不同类型肝炎患者中，除甲肝外均有ＴＴＶ 重叠感染，其中以非甲－ 非戊型肝炎和庚型肝?