摘要：目的建立优化的ｍＲＮＡ差示ＰＣＲ条件；运用建立的条件及ＧＱＳ９６００分离胃癌ＧＣ７９０１与胃粘膜ＧＥＳ１细胞株之间的差异表达基因片段；根据获取的序列，设计引物并运用于胃癌组织、血、活检胃粘膜标本检测，拟从中筛选出检出率与符合率高的数对引物，建立胃癌基因诊断方法．方法以胃癌ＧＣ７９０１与胃粘膜ＧＥＳ１细胞株为研究对象，探索ｍＲＮＡ差示ＰＣＲ的最佳反应条件，运用优化的条件分离细胞株之间的差异表达基因片段；以回收的片段作探针，打点杂交证实为真正的差异片段后，对纯化产物进行直接序列分析及ＧｅｎＢａｎｋ同源性检索，同源性低的序列递交给ＧｅｎＢａｎｋ；设计引物，采用ＲＴＰＣＲ方法对胃癌组织、血、活检胃粘膜进行检测，筛选出检出率与符合率高的５对引物建立多重ＰＣＲ诊断胃癌方法．结果①优化的差示ＰＣＲ条件为：前５轮ＰＣＲ循环采用９４℃３５ｓ，４０℃２ｍｉｎ，７２℃３０ｓ，后３５轮ＰＣＲ循环采用９４℃４５ｓ，５５℃２ｍｉｎ，７２℃１ｍｉｎ，最后在７２℃延伸７ｍｉｎ；②确认并分离出差异条带１５４条，胃癌细胞株泳道中存在而胃粘膜细胞株泳道中缺失的有８２条，胃粘膜细胞株泳道中存在而胃癌细胞株泳道中缺失的有３５条，胃癌细胞株泳?