摘要：FIASCO是一种高效构建微卫星富集文库的方法。本研究采用FIASCO(fast isolation by AFLP sequences containing repeats)方法成功构建了巴东木莲(Manglietia patungensis)微卫星AC富集文库。我们对AC富集文库中的119个阳性克隆进行测序,其中57个含有微卫星序列。设计并合成了其中40对微卫星引物进行PCR扩增检测,有6对引物扩增出目的片段,然而没有位点都呈现多态性。最后对巴东木莲微卫星位点的分离效率低下的原因进行了初步探讨。

摘要：以贮藏和萌发过程中的巴东木莲种子为材料,采用非变性聚丙烯凝胶电泳技术分析其种子中淀粉酶(AMY)、酯酶(EST)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)同工酶酶谱,并测定其酸性磷酸酶(ACP)和POD的活性,以探讨巴东木莲种子休眠和萌发过程中的生理生化变化特征.结果表明:巴东木莲种子在贮藏和萌发过程中,EST和SOD同工酶在萌发过程中表达增强,并不断有新酶的合成;AMY同工酶在萌发初期表达强度高且酶带数较多,到后期表达水平较低,其可能启动并控制种子萌发快慢;POD同工酶在萌发后期酶的活性增强,且酶的种类也增加,与EST和AMY同工酶的变化相适应.巴东木莲种子ACP和POD活性在储藏条件下以干藏种子最低,在萌发过程中总体上随发育进程呈升高的趋势,与同工酶电泳的结果吻合.因此,EST、AMY、SOD和POD同工酶酶谱变化及表达强弱可作为巴东木莲种子萌发各阶段转变的重要标志.

摘要：研究确定了提取巴东木莲基因组DNA的方法,采用正交试验设计法对影响SRAP-PCR反应的引物浓度、Taq DNA聚合酶的用量、Mg2+和dNTPs浓度及PCR扩增程序中的退火温度及循环次数进行了比较、优化,同时对DNA模板浓度进行了筛选。结果表明,Mg2+、dNTPs、Taq酶及引物的不同水平均对PCR反应结果有显著的影响。建立了巴东木莲20μL SRAP-PCR的反应体系为1×buffer、Mg2+浓度为2.0 mmol·L-1、dNTPs浓度为0.25 mmol·L-1、引物浓度为0.45μmol·L-1、Taq酶为0.5 U和模板DNA 40ng。适宜的扩增程序为94℃预变性1 min,94℃变性1 min,33℃复性1 min,72℃延伸1 min,10个循环;94℃变性1 min,55℃复性1 min,72℃延伸1 min,30个循环;最后72℃延伸5min。试验表明,该体系重复性好、稳定性强。

摘要：利用正交设计建立和优化适合于濒危植物巴东木莲的ISSR-PCR分子标记技术体系。对影响ISSR-PCR反应的多个因素,包括引物和DNA模板浓度、Taq酶用量、Mg2+和dNTPs浓度以及PCR扩增的退火温度、退火时间及循环次数等进行了优化。结果表明,适于巴东木莲ISSR-PCR反应的分子标记技术体系为:反应总体积20μl,含2μl 10×buffer、1μl 20 mmol/L MgCl2、4μl 2μmol/L引物、0.4μl 10 mmol/L dNTPs、0.8μl 5 U/μlTaq酶及40 ng模板DNA;PCR扩增程序为:94℃预变性5 min,94℃变性30 s,54℃复性45 s,72℃延伸1.5min,35个循环,最后72℃延伸7 min。本研究建立的ISSR分子标记技术体系稳定性强,重复性高。

摘要：巴东木莲是国家二级保护植物,仅分布于湖北、湖南和四川等地海拔700~1000m的常绿阔叶林局部地区中^([1])。生物量是生态系统基本特征、物质循环、信息交换和能量流动的评价指标^([2])。因此,生物量的测定是生态系统中生产力评估的一个重要方面。通过对幼苗成长生物量分析,不仅有助于理解基本的濒危机理,而且能为稀有物种的保护提供重要的信息。具体目标是量化植物生物量分配确定影响种子发芽及幼苗成长的因素。

摘要：采用美产Li-6400P便携式光合作用测定仪首次比较测定了濒危植物华木莲与乳源木莲、巴东木莲的光合生理生态特征和光合日进程。其中4年生华木莲的净光合速率为(9.75±0.73)μmolm-2s-1,蒸腾速率为(2.59±0.34)mmolm-2s-1,水分利用效率为(3.81±0.37)μmolCO2mmol-1H2O,光饱和点约为900μmolm-2s-1,光补偿点约20μmolm-2s-1,CO2饱和点为1000μmolmol-1,补偿点为43.79μmolmol-1,表观量子产额为0.0498,羧化效率为0.059。与乳源木莲、巴东木莲相比,华木莲净光合速率、蒸腾速率、表观量子产额、羧化效率、光补偿点高;水分利用效率、光饱和点、CO2饱和点和补偿点低。华木莲要求较高的水湿条件,与其濒危机制有关。