摘要：目的:研究补充巴戟天对训练小鼠心肌自由基代谢及运动能力的影响。方法:通过建立灌服巴戟天提取液小鼠的力竭游泳训练模型,测定小鼠心肌组织的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)以及血清谷草转氨酶(GOT)等指标。结果:药物组小鼠游泳运动能力明显提高,心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性显著高于其对照组,丙二醛(MDA)含量和血清谷草转氨酶(GOT)活性显著低于其对照组。结论:巴戟天不仅具有较强的抗自由基损伤和抗脂质过氧化损伤的作用,而且对心肌细胞膜具有保护作用。

摘要：从巴戟天中克隆MEP途径中的1-脱氧-D-木酮糖5-磷酸还原异构酶基因MoDXR及其启动子序列,并进行生物信息学分析、启动子区顺式作用元件分析,以及进行原核表达分析。根据巴戟天转录组中DXR基因原始序列和NCBI-ORFfinder分析,设计特异性引物,并进行RT-PCR扩增和生物信息学分析;采用染色体步移克隆MoDXR基因的5′端启动子序列;通过亚细胞定位分析MoDXR基因在细胞中的位置;构建原核表达载体pET-28a-MoDXR,导入BL21(DE3)表达感受态细胞后,在IPTG诱导下表达。从巴戟天中克隆的MoDXR基因,其cDNA全长2015 bp,预测的阅读框大小为1425 bp,编码474个氨基酸,分子质量为51.27 kDa;BlastP序列比对分析表明MoDXR基因与其他植物的DXR基因具有高度同源性,如:咖啡树DXR(CaDXR)、萝芙木DXR(RvDXR);系统进化发育树分析显示,巴戟天MoDXR蛋白与小粒咖啡和栀子的DXR蛋白聚为一类,其亲缘关系最近;由亚细胞定位可知MoDXR基因所编码的蛋白定位于叶绿体上;MoDXR基因5'端启动子序列长度为1493 bp,包含了与光响应、胁迫响应和激素响应有关的多种调控元件;SDS-PAGE结果表明pET-28a-MoDXR重组蛋白的大小与预期相符,但是以不容性的包涵体的形式表达。成功克隆了MoDXR基因及其启动子序列并对其进行了生物信息学分析和启动子区顺式作用元件分析;后期需要优化MoDXR原核表达体系,为进一步纯化MoDXR蛋白,研究其结构和功能奠定基础。

摘要：以巴戟天为原料,通过酶辅助浸提法提取多糖,采用化学和仪器分析法研究多糖的pH、相对黏度、溶解性、光谱特征、空间构像等理化性质,采用噻唑蓝法测定MC3T3-E1细胞增殖率,酶联免疫法测定Ⅰ型胶原蛋白(collagen typeⅠ,COLⅠ)和骨钙素(osteocalcin,OCN)分泌量及碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性,评价多糖提取物对成骨细胞增殖的影响。结果表明,巴戟天多糖属于酸性多糖,pH为6.15±0.13,相对黏度为1.26±0.12,具有糖的特性和三股螺旋结构,溶解性较好,不含蛋白质或多肽;巴戟天多糖提取物浓度为50μg/m L时,MC3T3-E1细胞增殖率极显著增加(P <0.01),达149.67%,COLⅠ和OCN的分泌量极显著增加(P <0.01),分别增加44.98%和85.01%,ALP活性极显著提高(P <0.01),提高了258.95%。表明巴戟天多糖提取物能显著促进MC3T3-E1细胞增殖与分化。

摘要：目的:对影响巴戟天中多糖的提取工艺因素进行系统考察。方法:通过单因素实验,以多糖提取率作为指标,分别考察了醇沉浓度、提取温度、液料比、提取时间、提取次数对提取效率的影响,并选取乙醇浓度(A)、提取温度(B)、液料比(C)和提取时间(D)4个因素设计正交试验。结果:影响多糖提取率的主次因素为A>C>D>B,即乙醇浓度>液料比>提取时间>提取温度,最佳提取工艺为:A2B1C2D1。即:在70℃下液料比为30∶1时提取4 h并用80%乙醇沉淀。结论:优选出的最佳提取工艺条件,为开发巴戟天多糖提供了科学依据。

摘要：为筛选适合海南产巴戟天多糖的提取方法,以得率为评价指标,在单因素实验基础上,通过正交实验优化传统水提、酶法、超声波辅助提取巴戟天多糖工艺;采用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼法、超氧阴离子自由基、2,2-联氮-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐法和还原力法比较3种提取方法的抗氧化性。结果表明,传统水提法最佳工艺条件为温度70℃,料液比1:20(g/mL),浸提时间2.0 h;酶法提取巴戟天多糖的最佳工艺条件为纤维素酶用量1500 U/g,温度50℃,pH5.0,底物质量浓度50 g/L,时间1.5 h;超声波辅助提取法最佳工艺条件为超声功率300 W,温度70℃,料液比1:35(g/mL),浸提时间30 min。3种提取方法得到的巴戟天多糖均具有较强抗氧化性,对DPPH自由基清除作用较明显,其中酶法辅助提取的多糖清除DPPH自由基、O2-自由基、ABTS自由基能力最强。巴戟天多糖提取采用酶辅助较为适宜。

摘要：利用响应面分析法(RSM),对超声波水提巴戟天多糖的工艺进行优化.在单因素实验的基础上,根据Box-Behnken中心组合设计原理,采用3因素3水平的响应面分析法,运用SAS 8.2和Design-Expert 7.1.1分析软件对实验数据进行二次响应面分析.获得巴戟天多糖的最佳提取条件:料液比(原料质量与提取液体积的比,g∶mL)为1∶13,超声波提取时间为30 min,提取次数为2次.在此最优工艺条件下,测得巴戟天多糖质量比为35.93 mg.g-1.

摘要：为确定巴戟天多糖热水浸提的最佳工艺,以多糖提取率为考察指标,选取液料比、浸提时间、浸提温度3个因素进行单因素试验和基于Box-Behnken设计的响应面试验,利用Design-Expert软件对多糖提取率的二次多项式回归模型进行分析,结果表明:浸提时间对巴戟天多糖提取率影响最为显著,巴戟天多糖提取的最佳工艺为液料比为25∶1 m L·g^(-1),浸提温度为81℃,浸提时间为3.1 h;该条件下多糖提取率为11.282 4%,与模型预测值接近,相对误差仅为0.38%,说明采用响应面法优化巴戟天多糖提取工艺合理可行。

摘要：目的优选巴戟天中水晶兰苷的纤维素酶辅助提取工艺。方法以水晶兰苷提取率为指标,通过HPLC含量测定方法,在单因素考察(酶用量、酶解温度、酶解时间、料液比、提取时间)的基础上,采用二次通用组合设计优化纤维素酶辅助提取的最佳工艺。结果纤维素酶辅助提取巴戟天中水晶兰苷的最佳工艺为:pH值5.0,酶用量0.24%、酶解2.1h、液固比22∶1、提取3次、每次76min,提取率达13.61mg·g^(-1)。结论通过二次通用旋转组合设计所筛选的巴戟天中水晶兰苷纤维素酶辅助提取工艺可显著提高水晶兰苷的提取率,为巴戟天中水晶兰苷的高效利用提供试验依据。

摘要：目的:探讨巴戟天对训练小鼠肝组织自由基代谢及血清酶活性的影响。方法:将60只健康雄性SD小鼠随机分成6组:即安静对照组、安静药物组;训练对照组、训练药物组;恢复对照组、恢复药物组,每组10只。通过建立灌服巴戟天提取液的小鼠递增游泳训练与力竭游泳实验模型。测定训练小鼠的力竭游泳时间并分析肝组织的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、丙二醛(MDA)及血清谷丙转氨酶(GPT)谷草转氨酶(GOT)的变化。结果:训练药物组小鼠较训练对照组游泳至力竭时间至显著延长,训练药物组小鼠肝组织的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性显著高于各自对照组;而训练药物组小鼠血清谷丙转氨酶(GPT)谷草转氨酶(GOT)与肝组织的丙二醛(MDA)含量显著低于各自对照组。经过24h恢复后,恢复药物组小鼠肝组织的超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性显著高于恢复对照组(P<0.05),而恢复药物组小鼠血清谷丙转氨酶(GPT)谷草转氨酶(GOT)活性与肝组织MDA含量显著低于恢复对照组(P<0.05)。结论:巴戟天能显著提高训练小鼠的运动能力和肝组织抗自由基氧化的功能,服用巴戟天可减轻运动所产生的内源性自由基对小鼠的伤害,改善运动对肝脏细胞的损伤,对肝脏具有明显的保护作用。

摘要：目的优选巴戟天盐制工艺,比较巴戟天盐制前后果糖、蔗糖、蔗果三糖、耐斯糖、蔗果五糖5种糖质量分数的差异。方法以耐斯糖质量分数为指标,采用均匀设计试验法,优选巴戟天盐制工艺;采用HPLC-ELSD法测定巴戟天盐制前后5种糖的质量分数。结果最佳巴戟天盐制工艺如下:每100 g巴戟天饮片加食盐水120 m L(含食盐2 g),浸润时间为8.5 h,蒸制时间为5.5 h;巴戟天盐制后果糖质量分数显著增加(P<0.05),蔗糖、耐斯糖、蔗果五糖质量分数均显著减少(P<0.05)。结论均匀设计法所得的优化工艺可靠、稳定,可用于巴戟天盐制工艺的优选。