摘要：干扰素基因刺激因子(stimulator of interferon genes,STING)作为参与固有免疫反应的关键信号转导分子,被来自病原体和宿主的胞质DNA触发,在诱导Ⅰ型干扰素和促炎性细胞因子分泌、防御病毒及胞内细菌感染、调节体内自发性抗肿瘤免疫反应产生过程中发挥重要功能。STING激动剂能够有效治疗病原体感染和癌症。近10年来,对STING及其激动剂的研究发展迅速。本文从STING的结构和激活、cGAS-STING通路的机制等方面概述了STING的最新研究进展,尤其对STING激动剂进行了概述,重点分析了STING与其激动剂复合物的晶体结构以及STING激动剂的构效关系,并总结了研发STING激动剂所面临的严峻挑战,试图为设计和发现小分子STING激动剂提供思路。

摘要：研究干扰素基因刺激因子(STING)基因敲除对猪伪狂犬病病毒(PRV)复制的影响。用CRISPR/Cas9技术敲除猪肺巨噬细胞系(3D4/21)的STING基因,用T7核酸酶检测靶基因敲除效率,用细胞计数试剂盒检测基因敲除细胞的活力,用表达绿色荧光蛋白(GFP)的重组病毒PRV-GFP感染基因敲除细胞,用流式细胞术检测感染细胞的荧光强度,用定量RT-PCR检测PRV的gB、TK基因表达及其感染细胞的IL-1β、IFN-β、ISG15基因转录,用Western blot检测PRV gE蛋白表达水平,用病毒滴定法测定子代病毒滴度。结果显示:设计的3个STING基因外显子2特异sgRNA均能切割3D4/21细胞的靶序列,其中sgRNA3的基因编辑效率最高;对sgRNA1介导STING基因敲除系进行克隆化,获得基因敲除细胞系3株,基因敲除对细胞活力无影响;亲本细胞培养的PRV-GFP感染阳性细胞占80.77%,STING基因敲除细胞培养的PRV-GFP感染阳性细胞占95.55%;STING基因敲除对PRV基因表达具有促进作用,亲本3D4/21细胞的病毒滴度为106.2 TCID50·0.1 mL^-1,STING基因敲除细胞的病毒滴度为108.3TCID50·0.1 mL^-1,病毒感染细胞的IL-1β、IFN-β和ISG15转录下调明显。STING基因敲除能促进PRV在3D4/21细胞中复制,可能与感染细胞的IL-β、IFN-β和ISG15表达抑制有关。

摘要：干扰素基因刺激因子（Stimulator of interferon genes,STING）是病毒感染后机体抗病毒固有免疫反应过程中的重要蛋白分子。为了寻找STING新的剪接异构体,我们抽提了人类胚胎肾（Human embryonic kidney,HEK）293细胞RNA,用全长STING的mRNA（NM-198282.82）序列设计引物,作cDNA末端快速放大（RACE）及RTPCR,生物信息学方法比较新序列,亚克隆STING野生型（wt）及STING剪接异构体（sv）至真核表达载体pEGFPC1和pcDNA 3.1中。质粒EGFP-STING（wt）和EGFP-STING（sv）转染HEK 293细胞,用抗EGFP抗体作Western blot分析;质粒pcDNA-STING（wt）和pcDNA-STING（sv）转染HEK 293细胞,作荧光素酶功能分析以检测新剪接异构体对病毒诱导的干扰素β启动子荧光素酶活性的影响。我们发现了STING 3′端新的剪接异构体,与野生型相比,它缺失了第7外显子,导致阅读框架移位,相应蛋白质的C端30个氨基酸不同于野生型。Western blot出现相对分子质量（Mr）为58×103的STING（sv）蛋白强阳性条带。STING（sv）荧光素酶功能分析显示,该剪接异构体能明显抑制病毒诱导的干扰素β启动子活性。STING（sv）在多数组织和不同细胞系中都能表达。STING（sv）的发现为STING这一重要分子的功能调节提供了新的线索,它可能是病毒感染通路中干扰素的显性负性抑制剂,提示其为干扰素产生的精细调节成分,在人类病毒感染性疾病中的病理意义值得探究。

摘要：干扰素基因刺激因子(stimulator of interferon genes,STING)是一种内质网膜蛋白,在外源或内源DNA介导的免疫应答中发挥重要作用。STING依赖的信号通路激活能促进I型干扰素分泌与抗病毒和抗肿瘤免疫相关的蛋白的表达,从而阻断病毒复制、促进对癌细胞的免疫反应。本文介绍了STING激动剂的研究进展,综述了环二核苷酸类、氨基苯并咪唑类、呫吨酮类和吖啶酮类、苯并噻吩类及苯并二茂类等结构类型的STING激动剂,以期为STING激动剂的进一步研究提供参考依据。