摘要：目的探讨干扰素-γ（IFN-γ）基因＋874位点、白细胞介素-10（IL-10）基因．1082位点单核苷酸多态性（SNP）及其与环境危险因素交互作用以及基因-基因交互作用对食管癌发病的影响。方法采用病例-对照研究设计，以120例食管癌患者和122例对照为研究对象，应用PCR法检测IFN-γ／＋A874T及IL-10-A1082G单核苷酸多态性；运用叉生分析，计算IFN-γ＋874位点基因型与部分环境因素以及两种基因间的交互作用定量分析指标。结果病例组IFN-γ＋874位点T等位基因频率为37．92％，高于对照组的28．7％（x^2=4．6414，P=0．0312）；IFN-γ＋874AT基因型携带者患食管癌的风险是IFN-γ＋874AA型者的1．729倍（95％CI：1．015～2．947），IFN-γ＋874TT基因型携带者患食管癌的风险是IFN-γ＋874AA型者的2．923倍（95％CI：1．227～5．214），而IFN-γ＋874AT＋TT患食管癌的风险是IFN-γ＋874AA基因型的1．821倍（95％CI：1．081～3．069）；IFN-γ＋874AT＋TT与饮酒指数、霉变食品摄入和三餐时间不规律存在正相加模型的协同作用，S值依次为1．909、4．154和5．026，人群归因危险度PAR％依次为51．10％、31．72％和25．37％；基因-基因交互作用分析显示，IFN-γ＋874AT＋TT与IL-10—1082AG＋GG两者之间交互作用差异没有统计学意义。结论IFN-γ＋874AT和IFN-γ＋874TT基因型可能增加食管癌患病易感性，T等位基因可能为食管癌发生的遗传危险因素。IFN-γ＋874AT＋TT基因型携带者如减少相应的环境危险因素暴露可有效降低食管癌的发病率。

摘要：根据GenBank上发表的牛干扰素γ基因序列设计引物,从牛外周血淋巴细胞中提取基因组RNA,采用RTPCR技术,扩增出干扰素γ基因并进行序列分析。琼脂糖凝胶电泳显示牛干扰素γ扩增片段约为500bp。序列分析结果表明,牛干扰素γ基因序列全长517bp,开放阅读框架内501个核苷酸,共编码166个氨基酸,分子质量19.4ku,与参考序列完全一致。克隆序列经BamHⅠ/EcoRⅠ双酶切后连接到经同样双酶切的PBV220质粒中,转化入大肠杆菌DH5α中,筛选阳性克隆进行温度诱导表达,经SDSPAGE分析,在约19.4ku处有表达的蛋白带,表达产物经免疫荧光染色鉴定为阳性。

摘要：根据Genebank中已发表的INF-γ蛋白cDNA序列保守区设计一对特异性引物,应用RT-PCR技术从Con A活化的牛外周血单核细胞中扩增到编码牛INF-γ蛋白基因,其大小为510 bp左右。将该基因克隆到pMD18-T载体中,测序结果与Genebank上发表的INF-γ基因序列进行比较,其同源性为99.8%。将该基因从重组pMD18T-IFN质粒中克隆到表达载体pcDNA3.1(+)质粒中,构建真核表达重组质粒,经酶切和PCR鉴定后表明构建的重组质粒为阳性。

摘要：目的获得印度尼西亚食蟹猴的干扰素-γ基因,为常用实验猕猴干扰素-γ的基因工程生产奠定基础。方法根据GenBank上公布的恒河猴干扰素-γ基因序列设计特异性引物,从印度尼西亚食蟹猴的外周血液中分离单核淋巴细胞,利用Trizol试剂,提取淋巴细胞的总RNA,通过RT-PCR的方法获得干扰素-γ基因片段,并对该片段进行克隆、鉴定和序列分析。结果扩增到一498bp的目的片段,经序列测定证实为印度尼西亚食蟹猴的干扰素-γ基因,与恒河猴、人及狒狒的干扰素-γ基因相比,同源性分别为100%、96%、99%。结论常用的两种实验猕猴食蟹猴与恒河猴的干扰素-γ基因完全相同。

摘要：目的探讨VX2骨肿瘤模型兔血清干扰素(interferon, IFN)-γ和白细胞介素(interleukin, IL)-4水平变化及意义。方法 40只日本大耳白兔随机分为骨肿瘤模型组和对照组各20只,其中骨肿瘤模型组采用VX2肿瘤组织块种植于兔胫骨建立兔VX2骨肿瘤模型,对照组采取同样手术操作但不植入VX2肿瘤。植瘤后第7天采用自主设计通道内置式骨肿瘤病理组织取出装置验证成瘤率;植瘤后第7、14天采用ELISA法检测2组兔血清IFN-γ和IL-4水平,处死兔后取胫骨组织行组织病理学检查。结果 37只实验兔纳入最终实验,骨肿瘤模型组18只,对照组19只。经穿刺活检装置证实成瘤率100%,穿刺成功率100%。骨肿瘤模型组植瘤第7天肿瘤组织在胫骨髓腔内生长,骨皮质未见肿瘤细胞;植瘤第14天肿瘤组织于胫骨髓腔内生长面积增大,骨皮质发现肿瘤细胞,5只实验兔穿刺孔处软组织触及肿块并发现肿瘤细胞。骨肿瘤模型组植瘤第14天血清IFN-γ水平[(697.3±39.1)ng/L]低于第7天[(734.7±27.6)ng/L](P0.05)。骨肿瘤模型组植瘤第7天血清IFN-γ、IL-4水平与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05),植瘤第14天血清IFN-γ水平低于对照组(P<0.05),IL-4水平高于对照组(P<0.05)。结论 VX2肿瘤种植于兔胫骨后,随着肿瘤的生长机体抗肿瘤免疫反应受到抑制,表现为IFN-γ水平下降,IL-4水平上升。

摘要：目的了解玻璃化冷冻羊皮异种移植到大鼠创面后,大鼠血清中白细胞介素4(IL-4)和干扰素-γ(IFN-γ)的表达特点。方法 80只大鼠背部设计制作4cm×4cm大小全层皮肤缺损创面,将玻璃化冷冻羊皮与大鼠自体微粒皮混合移植于大鼠创面上作为实验组,40只大鼠异体皮与自体微粒皮混合移植作为对照组,对比观察两组创面愈合情况,分别于术后1、2、3、4周末收集大鼠血清,检测IL-4和IFN-γ的值进行对比。结果 4周后对照组的微粒皮均扩展覆盖创面,而实验组大部分创面愈合,微粒皮虽有扩展但没有完全覆盖创面。大鼠血清中IL-4和IFN-γ的表达方面,实验组和对照组施行移植术后血清IFN-γ和IL-4均随时间逐渐增高,术后至2周末,两组血清IFN-γ和IL-4表达差异均无统计学意义(P>0.05),术后3周末,实验组血清IL-4和IFN-γ表达明显高于对照组,两组间差异有统计学意义(P0.05)。对比IFN-γ/IL-4的值在四周内两组间无统计学意义(P>0.05)。结论羊皮移植于大鼠体表创面后两周的时间内,冷冻羊皮与异体皮有相似的免疫排斥反应特点,其对微粒皮的保护与异体皮有相似的效果。

摘要：目的:分析肺炎支原体肺炎(MPP)患儿支气管肺泡灌洗液(BALF)中白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-6(IL-6)、干扰素-γ(IFN-γ)水平与病情和肺功能的关系。方法:选取徐州市儿童医院2019年5月至2020年10月收治的109例MPP患儿(研究组)和102例急性支气管异物患儿(对照组),均实施支气管肺泡灌洗术。研究组MPP患儿根据病情分为轻症组(85例)和重症组(24例),并根据患儿肺功能损伤程度分为肺功能正常组(26例)、轻度损伤组(32例)、中度损伤组(30例)和重度损伤组(21例)。取入组患儿BALF,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测IL-4、IL-6、IFN-γ水平并进行比较;比较研究组不同病情、不同肺功能损伤患儿BALF中IL-4、IL-6和IFN-γ水平:两组间比较采用成组设计资料t检验;多组间整体比较采用方差分析后组间两两比较采用LSD-t检验。应用Pearson相关分析研究组患儿BALF中IL-4、IL-6、IFN-γ水平与肺功能的关系。结果:研究组患儿BALF中IL-4、IL-6、IFN-γ水平均高于对照组[IL-4:(142.4±24.7)pg/ml vs.(73.2±13.0)pg/ml,t=25.159、P<0.001;IL-6:(56.4±10.3)pg/ml vs.(11.2±2.3)pg/ml,t=43.399、P<0.001;IFN-γ:(90.2±16.3)pg/ml vs.(41.8±6.8)pg/ml,t=27.857、P<0.001]。研究组中重症组患儿BALF中IL-4、IL-6、IFN-γ水平分别为(200.7±36.7)pg/ml、(103.3±16.8)pg/ml和(113.5±21.9)pg/ml,均显著高于轻症组[(125.9±22.4)pg/ml、(43.1±7.8)pg/ml和(83.6±14.1)pg/ml](IL-4:t=12.378、P<0.001,IL-6:t=25.010、P<0.001,IFN-γ:t=8.035、P<0.001),差异有统计学意义。研究组中肺功能正常组患儿BALF中IL-4、IL-6和IFN-γ水平分别为(81.6±15.5)pg/ml、(20.4±4.2)pg/ml和(74.7±11.9)pg/ml,轻度损伤者分别为(102.5±19.9)pg/ml、(48.9±8.2)pg/ml和(89.2±11.1)pg/ml,中度损伤者分别为(145.7±25.2)pg/ml、(60.2±10.2)pg/ml和(95.4±12.8)pg/ml,重度损伤者分别为(273.7±42.1)pg/ml、(106.9±17.6)pg/ml和(103.2±13.2)pg/ml。肺功能轻度、中度、重度损伤组患儿BALF中IL-4、IL-6和IFN-γ水平均高于肺功能正常组(P均<0.05),肺功能中度、重度损伤组患儿以上指标水平均高于肺功能轻度损伤组(P均<0.05),肺功能重度损伤患儿均高于肺功能中度损伤者(IL-4:t=13.581、P<0.001,IL-6:t=11.956、P<0.001,IFN-γ:t=2.117、P=0.039),差异均有统计学意义。研究组患儿BALF中IL-4、IL-6、IFN-γ水平与1秒用力呼气容积(FEV_(1))、用力肺活量(FVC)、呼气流量峰值(PEF)均呈负相关(IL-4与FEV_(1)、FEV_(1)/FVC、PEF相关性:r=-0.834、P=0.025,r=-0.810、P=0.009,r=-0.901、P=0.002;IL-6与FEV_(1)、FEV_(1)/FVC、PEF:r=-0.816、P=0.003,r=-0.795、P=0.012,r=-0.743、P=0.007;IFN-γ与FEV_(1)、FEV_(1)/FVC、PEF:r=-0.756、P=0.012,r=-0.738、P=0.010,r=-0.725、P=0.017)。结论:MPP患儿BALF中IL-4、IL-6和IFN-γ水平均偏高,且3个指标水平与病情、肺功能均有关。

摘要：芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor,AhR)是一种配体激活的转录因子,它在包括免疫细胞和上皮细胞在内的多种细胞中调节基因表达。AhR信号通路在健康和疾病状态下的免疫系统中均发挥着重要作用。Tapinarof目前是全球首个且唯一被批准用于治疗银屑病的小分子外用治疗性AhR调节剂。为了提高Tapinarof的活性和光化学稳定性,本研究设计并合成了一系列2-苯基-色烯-4H-酮衍生物,并评价了该系列化合物作为新型AhR激动剂的潜力。其中,化合物5a、5c、5e和5f显示出良好的AhR激活作用,其EC_(50)值分别为7、9、6和6 nmol·L^(-1),比Tapinarof高10~14倍。化合物5a和5e对干扰素-γ产生的抑制效果与Tapinarof相当。此外,化合物5a~5f相较于Tapinarof具有更好的光化学稳定性。本研究为后续新型AhR激动剂的开发提供新的分子骨架。

摘要：变性蛋白表面的疏水氨基酸残基有与疏水色谱固定相（STHIC）颗粒相互作用的倾向,两者之间的疏水相互作用能够抑制变性蛋白分子间的相互聚集.同时疏水色谱固定相还能在分子水平上给变性蛋白分子提供足够高的能量,使其瞬时脱水并折叠成其天然构象或不同的折叠中间体.变性蛋白在疏水界面上的折叠不仅取决于其氨基酸之间的特异性相互作用及疏水色谱固定相的结构,而且还取决于固定相和流动相之间的协同作用.同时,还提出了高效疏水相互色谱（HPHIC）进行蛋白折叠的机理及其进行蛋白折叠时能实现质量控制的原理.在适当的色谱条件下,HPHIC可使几种变性蛋白一步实现复性及同时纯化.此外,还设计制造出了直径比柱长大得多的实验室型和制备型“变性蛋白复性及同时纯化装置,USRPP”,该“装置”具有完全除去变性剂、使蛋白质复性,与杂蛋白分离及易于回收变性剂的“一石四鸟”功能.该“装置”对变性蛋白的复性和纯化效率与通常使用的长柱相当.在制备规模情况下,该“装置”可以在低压梯度条件下简便、快速、而经济地应用于重组蛋白药物的制备.文中以重组人干扰素-γ为例,说明了制备型“装置”在其复性及同时纯化生产工艺中的应用.

摘要：目的观察补肾方治疗肝肾阴虚兼湿热未尽型慢性乙型肝炎的免疫调控作用机制。方法收集HBV DNA阳性、ALT异常的肝肾阴虚兼湿热未尽型慢性乙型肝炎患者35例,其中治疗组22例给予补肾方治疗,对照组13例给予α-2b干扰素,疗程6个月,分别于用药前后检测患者谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)和HBV DNA水平,用流式细胞法检测外周血自然杀伤细胞(NK)的免疫效应分子穿孔素(PF)、颗粒酶B(GrB)、颗粒溶素(GNLY)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)的表达情况。结果两组治疗后ALT及AST均低于治疗前(P<0.05,P<0.01),治疗后组间比较差异无统计学意义。两组治疗后中医证候总积分都明显下降(P<0.01);治疗后治疗组总积分明显低于对照组(P<0.05)。治疗组治疗后的中医证候疗效总有效率明显高于对照组(P<0.05)。治疗组治疗后PF(%)34.86±31.60和GNLY(%)25.72±24.98均低于治疗前69.62±27.58,64.54±25.96(P<0.05),与对照组治疗后比较差异无统计学意义。结论补肾方治疗肝肾阴虚兼湿热未尽型慢性乙型肝炎的免疫调控作用机制在于降低NK细胞的相关免疫效应分子的表达,促进受损肝脏的痊愈。