摘要：为了克隆延边黄牛胆绿素还原酶(Biliverdin reductase,BVR)的CDNA序列后在大肠杆菌中表达、纯化并进行鉴定。本试验根据黄牛、马和东北虎BVR基因的cDNA序列设计引物,通过3′和5′RACE方法获得延边黄牛BVR基因全长cDNA序列。之后构建pET-28a-BVR重组质粒并转化到*** BL21(DE3)中表达并进行纯化。通过分光光度法检测BVR酶的活性。结果显示,所获得的延边黄牛BVR基因cDNA含有1个完整的开放阅读框,该cDNA序列阅读框由891个核苷酸组成,编码296个氨基酸。用BLAST和ClustalW软件进行同源性分析,与牛、马和东北虎的核苷酸相似性分别为98.0%,88.0%和87.0%。SDS-PAGE鉴定其相对分子质量为32 560。分光光度法检测BVR具有催化胆绿素还原为胆红素的活性。结果表明,通过克隆表达获得了有活性的延边黄牛BVR酶蛋白,为胆红素的进一步大量制备提供理论基础。

摘要：Calpain3(CAPN3)在肌肉组织中特异表达,其多态位点与畜禽诸多生产性状相关。本研究采用PCR-SSCP方法,设计2对基因特异性引物CAPN3-1、CAPN3-3,对96头延边黄牛CAPN3基因进行了SNPs检测,并将其与部分肉质性状进行了方差分析。试验结果显示,分别在CAPN3基因54982bp处发现A→G突变,56094bp处发现G→A突变。方差分析结果表明,2个位点中各个基因型与肉质嫩度、蒸煮损失均无显著相关性,CAPN3-3片段BB基因型仅在第3天时的pH显著高于AA纯合型个体(P<0.05)。2个位点与肉质色度方差分析结果显示,2个位点中各个基因型黄色度呈显著相关(P<0.05),与肉色中其他色度无相关性。CAPN3-1位点处,BB基因型较AA、AB基因型具有更高的黄色度值,此规律并不随时间的延续而改变,而在CAPN3-3位点处则无此规律。

摘要：试验旨在研究在日粮中添加不同分子量的缩合单宁对延边黄牛体内营养物质消化代谢和血液指标的影响。选用9头安装永久性瘤胃瘘管的延边黄牛,采用3×3拉丁方设计,分三期饲喂。结果表明:饲喂缩合单宁后,CP与NDF的消化率显著提高(P<0.05);粪氮和尿氮都显著低于对照组(P<0.05),RN、NPU和BV都显著高于对照组(P<0.05);血液指标中的免疫球蛋白、TP和ALB含量都显著提高(P<0.05),BUN含量明显降低,其中饲喂大分子量缩合单宁的B组效果比较明显。

摘要：研究了体外培养液中添加不同浓度的牛磺酸对重组胚发育率的影响。试验中设计了4个牛磺酸浓度组,分别是0、7.0、14.0、21.0 mmol/L。各浓度组之间的卵裂率没有差异,其中低浓度组7.0 mmol/L的囊胚发育率较其他组高,随着浓度的上升囊胚发育率逐渐降低。体外培养液中添加牛磺酸的最佳浓度为7.0 mmol/L,能够显著提高延边黄牛体细胞克隆牛重组胚的发育率。

摘要：试验研究红曲霉合生素对延边黄牛瘤胃内环境的影响。选择6只安装永久性瘤胃瘘管的成年延边黄牛母牛为试验动物[(325±25)kg],采用3×3完全拉丁方设计试验。分别测定瘤胃液pH值、纤毛虫数、NH3-N浓度和BCP浓度。试验结果表明:采食后各组pH值无显著影响(P>0.05)。瘤胃内NH3-N浓度均处于合成瘤胃微生物的最佳浓度范围内,红曲霉+中药组与对照组、红曲霉组相比差异显著(P<0.05)。6h纤毛虫数量对照组显著高于红曲酶组和红曲酶+中药组(P<0.05)。其它时间差异不显著。红曲霉+中药组BCP含量显著高于其它两组(P<0.05)。说明红曲霉+中药组有提高延边黄牛瘤胃微生物合成的作用,因而可促进瘤胃内养分消化代谢。

摘要：试验旨在研究富硒乳酸菌发酵秸秆对延边黄牛瘤胃发酵的影响。试验选用延边大学动物营养与饲料科学试验室自行培养的富硒乳酸菌、乳酸菌分别对玉米秸秆进行接种,获得富硒乳酸菌发酵秸秆和乳酸菌发酵秸秆,采用单因素试验设计,分别以普通玉米秸秆(对照组)、乳酸菌发酵秸秆(试验1组)、富硒乳酸菌发酵秸秆(试验2组)为底物,采用有永久性瘤胃瘘管牛的瘤胃液制得混合人工瘤胃培养液进行体外发酵,测定与瘤胃发酵相关的指标。结果表明:(1)乳酸菌发酵后玉米秸秆的干物质和粗蛋白含量显著提高(P<0.05),感官品质更好,pH、乙酸含量、氨态氮/总氮显著降低(P<0.05),乳酸含量显著升高(P<0.05)。(2)富硒乳酸菌组和乳酸菌组12~48 h产气量显著提高(P<0.05);理论最大产气量相比对照组显著增加(P<0.05);发酵48 h的甲烷产量、p H、乙酸/丙酸(A/P)显著降低(P<0.05),氨态氮含量显著升高(P<0.05),乳酸含量、总挥发性脂肪酸、丙酸含量显著增加(P<0.05);有机物消化率(OMD)显著提高(P<0.05),代谢能(ME)值、瘤胃微生物蛋白(MCP)产量、干物质体外消化率(IVDMD)显著增加(P<0.05),粗蛋白体外消化率(IVCPD)显著降低(P<0.05),且均为富硒乳酸菌发酵的玉米秸秆组效果最佳。综上,富硒乳酸菌发酵玉米秸秆对提高秸秆饲用价值效果最好,同时可减少甲烷量。

摘要：试验旨在研究基础日粮添加胡麻油和苹果酸对延边黄牛瘤胃发酵的影响。选用4头安装永久性瘤胃瘘管的延边黄牛,采用4×4拉丁方设计,1个对照组和3个试验组,对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中分别添加胡麻油475 g/d(LO组)、胡麻油475 g/d+苹果酸160 g/d(LOM组)和胡麻油475 g/d+苹果酸160 g/d+小苏打(NaHCO3)47.5 g/d(LOMS组)。试验结果表明:各试验组与对照组相比pH均有提高趋势,饲喂后9 h显著提高,且LOMS组在6 h时显著高于对照组。饲喂后1 h,LOM组和LOMS组的NH3-N质量浓度显著低于对照组,在3 h时达到最低值。各试验组的丙酸质量浓度与对照组相比都有增高的趋势,而乙酸、丁酸和总挥发性脂肪酸有降低的趋势,同时添加胡麻油和苹果酸更为明显。处理组与对照组相比,乙酸丙酸比显著降低。说明在饲粮中添加胡麻油和苹果酸有利于延边黄牛的瘤胃发酵,且同时添加效果更佳。

摘要：为了研究延边黄牛体外瘤胃发酵特性,试验采用单因素试验设计,用发酵花生壳和苜蓿草粗饲料、玉米-豆粕型精饲料进行组合,A组玉米-豆粕与苜蓿草之比为7∶3,B组玉米-豆粕与苜蓿草之比为3∶7,C组玉米-豆粕与发酵花生壳之比为7∶3,D组玉米-豆粕与发酵花生壳之比为3∶7,分别测定瘤胃微生物发酵指标。结果表明:在饲料中添加发酵花生壳的C、D组延边黄牛体外瘤胃发酵指标较优,更有利于微生物利用,发酵花生壳抑制了产气量,能显著降低气体排放量。说明添加发酵花生壳饲料更适合延边黄牛瘤胃体外发酵。

摘要：试验通过研究不同生长时期山野豌豆(Vicia amoena Fisch)的缩合单宁(condensed tan⁃nins,CT)对延边黄牛瘤胃微生物发酵特性的影响来评估山野豌豆缩合单宁的生产应用价值。选取9头体况良好、体重500 kg左右,装有永久性瘤胃瘘管的延边黄牛为试验动物,采用单因子试验设计,将9头试验牛随机分为3组,每组3头牛。分别在山野豌豆初花期和盛花期采样,并对不同生长期山野豌豆中缩合单宁的含量进行测定。饲粮中不添加山野豌豆缩合单宁提取物的为对照组,添加了1%初花期山野豌豆缩合单宁提取物的为初花期组,添加了1%盛花期山野豌豆缩合单宁提取物的为盛花期组。试验持续35 d,其中预试期15 d,正试期20 d。正试期第20 d饲喂前、饲喂后1、3、6、9 h采集瘤胃液,进行延边黄牛瘤胃微生物发酵指标——pH、氨态氮(NH3-N)含量、挥发性脂肪酸(vola⁃tile fattyacid,VFA)含量、微生物蛋白(microbial protein,MCP)浓度的测定,并利用实时定量荧光PCR(Real timePCR)测定延边黄牛瘤胃总菌及溶纤维丁酸弧菌数量。结果表明:不同生长期山野豌豆的缩合单宁含量为36.4827~38.2611 g/kg DM,且盛花期山野豌豆缩合单宁含量更高;不同生长期山野豌豆缩合单宁均使延边黄牛瘤胃内pH有上升趋势,瘤胃NH3-N含量、VFA含量和MCP的浓度有下降趋势。不同生长期山野豌豆缩合单宁对溶纤维丁酸弧菌(***)都有抑制作用,对瘤胃总菌没有影响。山野豌豆缩合单宁具有保护过瘤胃蛋白、预防酸中毒的作用,且盛花期山野豌豆缩合单宁保护过瘤胃蛋白的效果更好。

摘要：为建立一种快速、特异性和实用性强、灵敏度高的沙门氏菌检测方法,参考GeneBank中登录号为U25631的沙门氏菌基因序列,设计并合成引物,组成半套式RT-PCR,扩增片段为581bp。应用该半套式RT-PCR对标准菌株伤寒沙门氏菌、大肠杆菌、链球菌、巴氏杆菌和结核杆菌及临床伤寒分离出的沙门氏菌H1、H2株进行检测,并对延边地区牧场的产生临床腹泻的延边黄牛血液中分离培养的不同菌株进行检测。结果表明,仅伤寒沙门氏菌标准株和临床一株样品在581bp处扩增出了特异的片段;该方法检测灵敏度为1fg核酸,且重复性好。说明此半套式RT-PCR法可以准确、灵敏、快速地检测出腹泻延边黄牛血液中的伤寒沙门氏菌。