摘要：为了制备甘草超滤液中异甘草素,建立一种络合萃取-反萃取方法。以异甘草素萃取率为研究指标,通过单因素和析因设计实验,优选得到最佳络合萃取剂;以异甘草素的反萃取率为研究指标,优选得到最佳反萃取剂。最佳三元络合萃取剂组成为0.5%三烷基氧化膦(TRPO)+10%磷酸三丁酯(TBP)+89.5%磺化煤油,萃取率99.23%,萃取后收率100%;最佳反萃剂为0.0100 mol×L^-1 NaOH水溶液,反萃取率97.85%,反萃取后收率95.11%,总收率95.11%。结果表明:优选的络合萃取剂和反萃取剂萃取效率高,甘草超滤液中的异甘草素在络合萃取剂和反萃取剂中可以高效转移,络合萃取-反萃取法适合甘草超滤液中异甘草素的制备。

摘要：背景与目的异甘草素(isoliquiritigenin,ISL)是甘草中重要的药理成分,其具有一系列的生理和药理活性,同时具有显著的抗肿瘤活性,可以作为癌症靶向治疗的一种潜在药物。LINC01503是一种致癌基因,其与多种癌症的恶性生物学过程密切相关。本研究旨在探讨ISL通过调控LINC01503对肺鳞癌细胞增殖、凋亡、侵袭及迁移的影响。方法收集2021年1月至2022年12月于唐山市人民医院治疗的肺鳞癌患者和健康人血浆。用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测LINC01503在肺鳞癌血浆、组织及细胞中的表达情况。用不同浓度的ISL处理肺鳞癌细胞24 h,用qRT-PCR检测LINC01503表达情况。将细胞进行分组处理:si-NC组、si-LINC01503组、DMSO(0.1%的二甲基砜)组、ISL组、pc DNA3.1(+)-NC组、pc DNA3.1(+)-LINC01503组、ISL+pc DNA3.1(+)-NC组及ISL+pc DNA3.1(+)-LINC01503组。采用CCK-8法、克隆形成实验、流式细胞术、Transwell实验和划痕实验研究LINC01503对肺鳞癌细胞功能表型的影响。结果荧光原位杂交结果显示,肺鳞癌患者组织芯片中,肺鳞癌组织LINC01503的平均荧光强度高于癌旁组织(P<0.05)。肺鳞癌患者血浆中LINC01503的表达高于健康人血浆表达(P<0.05)。敲降LINC01503可以抑制肺鳞癌细胞的增殖、侵袭及迁移并促进调亡(P<0.05)。ISL可以抑制肺鳞癌细胞的增殖、侵袭、迁移并促进调亡(P<0.05)。过表达LINC01503后用ISL进行干预可逆转过表达LINC01503对肺鳞癌细胞的增殖、侵袭及迁移的促进作用及对调亡的抑制作用(P<0.05)。结论LINC01503在肺鳞癌中呈高表达,LINC01503可以促进肺鳞癌细胞的增殖、侵袭、迁移并抑制调亡,ISL可以通过调控LINC01503的表达抑制肺鳞癌细胞的增殖、侵袭、迁移,促进肺鳞癌细胞的凋亡。

摘要：目的:筛选制备异甘草素-β-环糊精(β-CD)包合物的最佳制备条件,以达到提高药物水溶性的目的。方法:采用正交设计试验以包合率和收率为指标优化最佳工艺条件,利用计算机模拟实验比较了不同包合方式和包合比的能量变化,通过IR和XRD对包合物进行表征,荧光光度法验证包合比。结果:采用饱和水溶液法制备包合物,最佳包合条件为异甘草素和β-CD的摩尔比1∶2,包合时间5 h,温度60℃。包合率>98%,可能的包合方式为异甘草素的A环进入β-CD的大口端,B环进入β-CD的小口端。结论:异甘草素制成β-CD包合物可以达到提高药物水溶性的目的。

摘要：目的探讨circ_0027107在肺腺癌发生、发展中的作用及分子机制,同时探究异甘草素(Isoliquiritigenin,ISL)通过hsa_circ_0027107对肺腺癌的影响。方法肺腺癌基因芯片筛选出显著高表达的hsa_circ_0027107,通过实时荧光定量(Quantitative Real-time PCR,qRT-PCR)检测肺腺癌患者及健康人血浆中,癌细胞和正常细胞中hsa_circ_0027107的表达情况,荧光原位杂检测hsa_circ_0027107在肺腺癌及癌旁组织中的表达情况,体外培养肺腺癌细胞A549和H1299,采用CCK-8和克隆形成检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,划痕实验检测细胞迁移能力,评估hsa_circ_0027107在肺腺癌中的功能;通过miRanda、TargetScan数据库预测circ_0027107下游的miR-651-5p,与miRDB、miRTarBase、TargetScan数据库预测miR-651-5p下游蛋白FOXN2,双荧光素酶基因实验报告确定circ_0027107与miR-651-5p、miR-651-5p与FOXN2之间的相互作用关系,并通过相关功能实验验证。结果肺腺癌基因芯片结果显示环状RNA hsa_circ_0027107差异表达明显,荧光原位杂交结果显示肺腺癌患者组织中hsa_circ_0027107的平均荧光强度为低于癌旁组织,miR-651-5p的平均荧光强度为高于癌旁组织,hsa_circ_0027107的低表达与肺腺癌患者的淋巴结转移和临床分期有关。核质分离结果显示hsa_circ_0027107、miR-651-5p都主要在细胞质中表达。过表达hsa_circ_0027107抑制肺腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,而过表达miR-651-5p可逆转circ_0027107对肺腺癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响,同时,发现在NCL-H1299、A549中FOXN2表达降低,敲低FOXN2可逆转miR-651-5p对肺腺癌细胞增殖、迁移、侵袭的影响。研究发现ISL能够明显促进Hsa_circ_0027107的表达,并明显抑制体外肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,同时,功能实验也证实敲低Hsa_circ_0027107的表达能够拯救ISL对肺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力的抑制。结论肺腺癌组织、细胞、血浆中hsa_circ_0027107低表达,hsa_circ_0027107通过调控miR-651-5p作用于FOXN2抑制肿瘤的恶性生物学表型,ISL通过hsa_circ_0027107抑制肺腺癌的恶性进展。

摘要：[目的]优化甘草苷及异甘草素的提取工艺。[方法]以2种甘草总黄酮提取物为原料,在酸性条件下用超声波提取甘草苷及异甘草素;采用正交设计优化2种成分的提取工艺;利用HPLC法检测其含量。[结果]原料Ⅱ是提取甘草苷及异甘草素的较优材料,甘草苷的最佳提取条件:酸浓度为0.5 mol/L,超声提取时间为1.5 h,提取温度为70℃,料液比为1∶20;异甘草素的最佳提取条件:酸浓度为2.0 mol/L,超声提取时间为1.5 h,提取温度为70℃,料液比为1∶10。[结论]该工艺简单、易行,重复性好,适合甘草苷及异甘草素的工业化提取。

摘要：为探讨异甘草素对人膀胱癌T24细胞糖酵解水平的影响及其作用机制。本研究采用SRB法测定异甘草素对人膀胱癌T24细胞增殖的影响;试剂盒测定T24细胞中ATP含量变化;试剂盒检测细胞培养液中葡萄糖摄取和乳酸含量影响;用比色法测定己糖激酶和丙酮酸激酶活性,酶标仪法测定乳酸脱氢酶的活性。结果显示:异甘草素对T24细胞有显著增殖抑制作用,且呈剂量依赖性(P<0.01),经异甘草素处理的T24细胞出现明显的形态改变;异甘草素可浓度依赖性的抑制T24细胞ATP的生成(P<0.05或P<0.01);异甘草素可减少T24细胞对葡萄糖的摄取和乳酸的释放(P<0.05或P<0.01);与对照组相比,经过异甘草素处理的T24细胞的HK、PK和LDH活性均明显降低(P<0.05或P<0.01)。由此可知,异甘草素可抑制T24细胞糖酵解水平,其机制可能与减少葡萄糖摄取,下调糖酵解的关键性酶的活性有关。

摘要：目的:采用制备单柱配合前后处理工艺来分离得到高纯度异甘草素。方法:采用正交设计优化前处理超声提取的条件,提取物经2次制备单柱梯度洗脱分离,浓缩后得目标产品。结果:超声提取最佳条件为:配制原料的质量浓度为30g/L,采用乙醇做提取溶剂,超声提取时间为60min,提取温度为20℃。选择适合的单柱进样浓度为100g/L,进样体积为60mL。单柱产品经浓缩得到质量分数在99%以上的异甘草素。结论:以柱色谱分离为核心,结合原料前处理和产品后处理工艺分离提纯异甘草素工艺简单易行,所得产品质量分数高。

摘要：目的建立测定逍遥丸中甘草苷、异甘草素和甘草酸含量的方法。方法色谱柱:Shim-packVP-ODS(150 mm×4.6 mm,5.0μm)。流动相:甲醇-0.5%冰醋酸梯度洗脱;流速1 *** 1;检测波长0～7 min为276 nm,7～18 min为370 nm,18 min以后为254 nm。结果甘草苷的线性范围是0.018 40～0.368 0μg(r=0.999 8,平均回收率为97.96%,RSD为0.60%);异甘草素的线性范围是0.015 2～0.304 0μg(r=0.999 9,平均回收率为97.17%,RSD为1.02%);甘草酸的线性范围是0.441 8～8.835 0μg(r=0.999 9,平均回收率为97.52%,RSD为1.06%)。结论所建立的方法简便可行、重复性好,可用于逍遥丸的质量控制。

摘要：目的 研究黄芪六一汤(Huangqi Liuyi Decoction,HLD,黄芪-甘草6∶1组成)黄酮组分的提取和聚酰胺树脂富集纯化工艺。方法 以毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芹糖甘草苷、甘草苷、芹糖异甘草苷、芒柄花苷、甘草素、毛蕊异黄酮、异甘草素、芒柄花素9个成分为评价指标,以G1-熵权法确定各指标的组合权重,进行综合评分;采用Box-Behnken设计-响应面法(Box-Behnken design-response surface methodology,BBD-RSM)对HLD黄酮组分提取的关键影响因素乙醇体积分数、乙醇用量、提取时间、提取次数进行优化;采用单因素实验考察上样药液pH值、上样药液质量浓度、上样药液体积流量、上样量、水洗脱用量、洗脱剂乙醇体积分数、洗脱剂体积流量、洗脱剂用量等因素对黄酮组分聚酰胺富集纯化工艺的影响,采用Plackett-Burman设计(Plackett-Burman design,PBD)结合BBD-RSM筛选显著影响因素并对其进行工艺优化,比较聚酰胺树脂纯化前后各指标的含量。结果 最优提取工艺为69%乙醇回流提取2次,每次10倍量乙醇提取65 min;最优纯化工艺为pH值4.8、质量浓度0.20 g/mL的上样药液以0.8 mL/min体积流量按树脂-生药1∶1的质量比上样,4个柱体积(BV)纯水以1.5 mL/min的体积流量洗脱除杂,8 BV体积分数69%乙醇以1.5 mL/min体积流量洗脱,所得黄酮组分提取物中9个指标成分含量约是纯化前的14倍。结论 优选的HLD黄酮组分的提取和富集纯化工艺稳定、可行,可为进一步成药性研究和组分中药研制奠定基础。

摘要：目的建立HPLC测定龙柴方及其组方药材甘草中5种指标成分含量的方法,控制该方药的质量。方法 ODS C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈和0.05%的磷酸水溶液,梯度洗脱;柱温为30℃;流速1 ***-1;检测波长237 nm。结果此方法可以使样品达到基线分离,阴性样品无干扰,甘草苷、异甘草苷、甘草素、甘草酸和异甘草素分别在0.156 8～1.568μg(r=0.999 7)、0.157 1～1.571μg(r=0.999 8)、0.155 8～1.558μg(r=0.999 6)、0.187 1～1.871μg(r=0.996 9)和0.158 1～1.581μg(r=0.999 5)内与各自峰面积积分值呈良好的线性关系;平均回收率分别为101.47%(RSD=1.272%)、101.09%(RSD=1.937%)、101.14%(RSD=2.388%)、100.38%(RSD=1.448%)及100.86%(RSD=1.759%)(n=5)。结论该方法分离良好、精密准确,可用于龙柴方及其组方药材甘草的质量控制。