摘要：半乳糖凝集素-3 (galectin-3, Gal-3)属于β半乳糖苷酶结合凝集素家族,具有特异性结合半乳糖的特性。通过C端糖蛋白结合区(carbohydrate recognition domain, CRD), Gal-3可结合糖基化胰岛素受体(insulin receptor,IR)的半乳糖苷链,从而抑制IR信号通路,导致胰岛素抵抗,被视为治疗胰岛素抵抗和2型糖尿病的潜在药物作用靶点。本研究根据Gal-3结合糖基化蛋白半乳糖苷链的特性,设计了一种简便的Gal-3抑制剂筛选模型。在大肠杆菌表达Gal-3蛋白,经纯化后,用异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate, FITC)修饰,获得Gal-3-FITC。Gal-3-FITC自发绿色荧光,与表面表达有大量糖蛋白的人胰腺癌细胞(PANC-1)孵育后, PANC-1细胞带有荧光信号。若待测化合物有Gal-3抑制活性,则该化合物可降低Gal-3-FITC与细胞的结合,从而降低PANC-1细胞荧光信号。通过荧光信号变化可评价Gal-3抑制剂的抑制强度。进一步研究表明,该筛选模型简易稳定,具有良好重复性, Z’因子在0.7和0.85之间。本研究采用FITC标记Gal-3的方式在PANC-1细胞上用荧光强度反映Gal-3和糖蛋白的结合水平,构建了Gal-3抑制剂的高通量筛选模型。

摘要：设计合成了新型含有荧光基团的α-氰基丙烯酸酯单体,并与其它α-氰基丙烯酸酯单体共聚,得到产生荧光的聚氰基丙烯酸酯材料.将其包埋在小鼠背部肌肉层,可获得良好的荧光成像效果.通过对荧光强度的监测,初步研究了聚氰基丙烯酸酯材料中的侧链酯基在小鼠体内的降解情况.单体合成是以蒽合氰基丙烯酸和4,4'-二甲氧基三苯基-氨基己醇为原料,得到蒽合氰基丙烯酸(4,4'-二甲氧基三苯基-氨基己醇)酯,脱保护后再将异硫氰酸荧光素以化学键合的方式标记在末端氨基上,脱蒽还原烯双键后,得到可用于荧光标记的α-氰基丙烯酸(异硫氰酸荧光素-氨基己醇)酯单体.反应中间体及单体结构采用核磁共振氢谱和质谱进行表征.该单体及其高聚物均可在激发光(488 nm)和发射光(525 nm)条件下观察到明显荧光.

摘要：本文筛选胸腺五肽多囊脂质体(TP5-MVL)的处方和制备工艺,并进行其体外释放性能考察和大鼠体内药物代谢动力学评价。采用复乳法制备TP5-MVL,L9(34)正交实验设计进行处方筛选和优化,分别以pH7.4 PBS和血浆为释放介质考察TP5-MVL的体外释放特性。制备异硫氰酸荧光素标记的胸腺五肽(FITC-TP5)多囊脂质体(FITC-TP5-MVL),初步考察肌内注射FITC-TP5-MVL后大鼠体内的药物代谢动力学。优化后的TP5-MVL处方为水相葡萄糖,浓度为7.5%,油相中三油酸甘油酯为2.25 mol.L-1,DPPG为2.68 mol.L-1,DOPC为16.96 mol.L-1,制备的TP5-MVL包封率均在85%以上,测得的平均粒径为22μm,TP5-MVL在0.02 mol.L-1pH7.4 PBS溶液中5 d累计释放超过85%,在血浆中释放较快。在PBS(pH7.4)和血浆中TP5-MVL的释药曲线最符合Higuchi方程。大鼠肌内注射FITC-TP5-MVL后,与注射相同剂量FITC-TP5溶液相比,药物的达峰浓度显著降低,消除时间明显延长,120 h血浆中仍可检测到药物。复乳法制备的TP5-MVL工艺可行,重现性好,且包封率高,大鼠药物代谢动力学结果表明TP5-MVL具有显著的缓释特性。

摘要：目的合成丁酰半乳糖酯(butyryl galactose ester,But-Gal)并制备丁酰半乳糖酯修饰的薏苡仁组分微乳(butyryl galactose ester modified coix component microemulsions,But-Gal-CMEs),对其进行理化性质评价和体外抗肿瘤活性测定。方法采用酶催化法合成But-Gal,并通过1H-NMR与FT-IR对其结构进行表征。以薏苡仁油为油相,聚氧乙烯氢化蓖麻油(Cremophor®RH40)为乳化剂,PEG400为助乳化剂,But-Gal为肝肿瘤细胞靶配体,薏苡仁多糖水溶液为水相,水滴定法制备微乳,测定其粒径、电位和形态。通过MTT法考察薏苡仁组分微乳(CMEs)与But-Gal-CMEs对肿瘤细胞Hep G2细胞毒作用;以异硫氰酸荧光素(FITC)为荧光探针,借助荧光倒置显微镜观察Hep G2细胞对微乳的摄取行为。结果经1H-NMR与FT-IR表征确认丁酰半乳糖酯结构与设计一致。制备所得But-Gal-CMEs外观形态圆整,平均粒径为(57.68±6.65)nm,多分散指数(PDI)为0.070±0.006,Zeta电位为(-2.95±0.23)m V。MTT实验表明,But-Gal-CMEs与CMEs对Hep G2细胞增殖的半数抑制浓度(IC50)分别为62.55、71.23μg/m L。Hep G2细胞摄取结果显示But-Gal-CMEs组的荧光强度强于CMEs组。结论所制备的But-Gal-CMEs粒径小,外观圆整,稳定性好,But-Gal能增加Hep G2对CMEs的细胞摄取,并增强其对Hep G2细胞毒作用。

摘要：目的 利用二次通用旋转组合设计试验筛选枸杞多糖荧光标记的最优标记条件。 方法 枸杞多糖与酪胺氨基共价偶联后与异硫氰酸荧光素反应，实现选择性荧光标记。利用二次通用旋转组合设计试验，研究缓冲液pH值、标记时间、温度、酪胺量与标记效率之间的关系，从中筛选出最佳的标记条件。 结果 得回归方程为： Y ＝0.085 41－0.002 82 X1 －0.015 68 X2 ＋0.008 11 X3 ＋0.005 01 X4 ＋0.008 75 X1X2 －0.005 75 X1X3 －0.001 75 X1X4 ＋0.010 63 X2X3 ＋0.000 125 X2X4 ＋0.000 25 X3X4 －0.021 44 X1 2 －0.008 89 X2 2 －0.001 984 X3 2 ＋0.003 66 X4 2 ，失拟性检验 F ＝1.76 F 0.01 (11,8)＝5.74，表明二次回归模型有统计学意义。枸杞多糖荧光标记时温度在50 ℃，pH值为8.5，反应时间设为4 d时结合效率最高。 结论 在枸杞多糖荧光标记的过程中，在特定的反应温度和缓冲液pH值条件下，适当延长反应时间可提高反应效率。