摘要：目的 为了建立一种快速、特异、灵敏检测动物源性食品中弓形虫的技术。方法根据原虫rDNA的部分序列，找出弓形虫和新孢子虫共同保守DNA片段，设计套式PCR两对引物，以Ultra Pure^TM基因组DNA快速提取试剂盒提取弓形虫和新孢子虫DNA为模板，初步建立了检测两种虫体的NestedPCR技术。将纯化的Nested PCR产物成功地克隆到pGEM-T-easy载体中，经鉴定、测序并进行同源性分析。结果 Nested—PCR的外、内引物对两种虫体rDNA基因均能进行扩增，长度分别在800～900bp、400～500bp之间。内引物扩增DNA序列与公布的同种虫体DNA序列同源性较高，弓形虫和新孢子虫分别达99.1％、97．2％，但它们两者之间差异较大，同源性仅为86．6％。用软件寻找能区别两者基因序列差异的酶切位点，挑选内切酶进行RFLP实验，结果表明新孢子虫NestedPCR扩增片段能被Vspl酶切。同时进行该分子检测技术的特异性和敏感性试验，实验证明该NestedPCR能对弓形虫和新孢子虫rDNA基因进行特异性的扩增，而对其它原虫基因未能扩增出任何片段；该Nested-PCR能检测出100个弓形虫速殖子／g猪肉。结论 本实验建立NestedPCR检测方法不仅可用于检测动物性食品中弓形虫，而且能明确区分弓形虫和新孢子虫。

摘要：目的　为了解本市育龄妇女弓形虫感染情况以及探讨弓形虫的感染途径、感染与不良生育的关系 ,方法　我们采用ELISE方法自 1998年 12月～ 2 0 0 0年 12月对 10 4 2例育龄妇女进行了TOX -IgM的筛查并按设计好的表格分类。结果　我市育龄妇女TOX -IgM平均感染率为 12 18% ,正常妊娠组及不良生育组显著高于未孕组 ,P <0 .0 5 ;效区妇女高于市区妇女 ,P <0 .0 5 ;有动物接触史及有生育习惯的妇女显著高于无接触史者 ,P <0 .0 5。结论　TOX感染的确是引起不良生育的重要原因之一。建议①对孕前及孕期育龄妇女加强TOX筛查工作 ,以及早诊治 ;②加强群众健康教育 ,改变不良生活习惯 ;③加强水源、烘便等的卫生管理。

摘要：一例麦哲伦企鹅急性死亡,经过病理解剖、实验室诊断,确诊为弓形虫感染。病程急而快,主要病变为肺实变,肝脏肿大呈黄绿色,脾脏呈大理石样花斑纹。实验室诊断主要通过PCR(聚合酶链式反应),以弓形虫B1基因设计特异性引物,对病料样本快速、精确地作出了阳性诊断。

摘要：为了采用基因工程方法大量生产高效抗原提供技术，根据已发表的弓形虫RH株P30的核苷酸序列，设计了一对加端引物，运用PCR方法，从弓形虫NT株中扩增出约800bp的片段。产物经EcoRI和XbaI酶切后，克隆进PUC19载体，经酶切和PCR鉴定，插入片段为P30基因。

摘要：本文运用随机引物聚合酶链反应技术鉴别弓形虫株，获得较满意结果。实验根据Ｍ１３噬菌体已知部分核酸序列，自行设计并合成了３条引物，在一定条件下扩增ＲＨ，ＺＳ１、ＺＳ２、ＳＨ－１等４株弓形虫基因组ＤＮＡ，扩增产物经２％琼脂糖凝胶电泳分带。扩增带型显示４株受检的弓形虫株具有株间差异。

摘要：目的　根据弓形虫表面抗原SAG2基因序列 ,设计弓形虫特异性引物一对 ,采用聚合酶链反应技术 ,进行弓形虫感染的检测。结果　从弓形虫DNA提取物中扩增出 5 93bp的基因片段 ,与预期的扩增片段大小相符 ;与弓形虫亲缘关系相近的三株恶性疟原虫、间日疟原虫、利什曼原虫和正常人全血核酸抽提物经扩增后均未见特异性的扩增条带 ;该检测体系至少可检测出相当于每 μl血样中 2个弓形虫的水平 ;将该检测体系用于临床孕妇产前诊断 ,5 6份标本中检查出 3例。结论　所建立弓形虫PCR检测体系灵敏、特异 ,适用于孕妇弓形虫感染的诊断。

摘要：目的:探讨间接原位PCR技术在弓形虫淋巴结炎病理诊断中的应用。方法:设计弓形虫B1基因1对引物进行原位扩增,选择弓形虫B1基因来源的地高辛标记探针进行扩增后原位杂交,应用间接原位PCR技术,检测三所医院共86例病理诊断为慢性非特异性淋巴结炎石蜡包埋切片组织中的弓形虫。结果:86例中47例弓形虫阳性,占54.65%。三所医院弓形虫阳性率经统计学处理无显著性差异(P>0.05)。结论:在病理诊断为慢性非特异性淋巴结炎病例中,存在被误诊的弓形虫淋巴结炎病例。

摘要：目的研究弓形虫核酸疫苗,以用于弓形虫病的防治。方法根据ROP2基因序列,设计合成能表达ROP2完整蛋白基因的扩增引物,扩增ROP2靶基因并克隆于PUCm-T载体,然后再亚克隆于真核表达载体pc-DNA3质粒中,制备弓形虫pc-DNA3-ROP2核酸疫苗;应用裸pc-DNA3-ROP2免疫小鼠,通过免疫学指标的检测,评价小鼠的免疫应答反应,最后应用弓形虫RH株攻击实验,评价出该疫苗的有效保护率、安全性和在人类及畜类的应用价值。结果以ROP2基因为模板,PCR扩增出1.7kbDNA条带,与预想结果一致;将扩增DNA回收并成功的克隆了ROP2(PUCm-T-ROP2),然后亚克隆并构建了pc-DNA-ROP2重组体,通过酶切、PCR扩增和基因测序证明亚克隆的重组子正确,ROP2扩增基因包含了ROP2蛋白基因读码框内的完整序列;在应用疫苗免疫接种小鼠结果显示,疫苗接种能使小鼠产生强烈的细胞、体液免疫反应;攻击实验结果显示,实验组小鼠的存活时间明显延长,并且开始死亡时间明显延迟(P<0.001),实验组9只小鼠中有1只长期存活;在实验的整个过程中,没有发现小鼠对免疫接种的毒性和异常反应。结论该疫苗免疫原作用强,具有很好的开发应用价值,目前可在动物群体中试验应用。

摘要：本文通过克隆的ＲＨ株弓形虫核酸ＴＧＲ４片段，设计并合成了一对长度为２０ｂｐ的寡核苷酸引物，扩增靶序列长度为７７８ｂｐ，建立了聚合酶链反应技术检测弓形虫核酸的特异敏感方法。检测７株弓形虫株及临床疑似弓形虫病患者样本，均出现特异扩增带，而其它８种病原体以及正常人及动物的ＤＮＡ均未见特异扩增带。扩增产物用地高辛素标记作探针，与以上出现特异扩增带的ＤＮＡ模板能斑点杂交，而与无扩增带的其余模板ＤＮＡ无斑点杂交。结果显示，该引物具有高度的保守性及特异性。在含１０５个人白细胞中，可检测到２个弓形虫ＤＮＡ或１ｐｇＤＮＡ。并通过人工感染弓形虫鼠血样品的检测表明，所建立的聚合酶链反应体系具有高度的敏感性，能早期检出弓形虫感染样品，在弓形虫病的临床诊断中具有重要的应用价值。

摘要：目的评价对社区居民开展弓形虫病健康教育和重点人群监测干预的效果。方法以社区卫生服务机构为服务载体,对社区居民开展有计划的多种形式的健康教育;对社区居民中育龄妇女、孕妇及宠物饲养者建立健康档案,定期监测;参照"KABP"调查标准,设计调查问卷调查,用SPSS10.0软件分析数据。结果健康教育前社区居民对弓形虫病防治知识、态度信念、行为平均得分为46.5、61.8、81.3;健康教育实施半年后平均得分分别为69.6、77.8、96.6,差异有统计学意义(P<0.001)。健康教育实施前社区居民特殊人群中育龄妇女、孕妇、宠物饲养者对弓形虫病防治知识知晓率、态度与信念、行为形成率有明显差异(P<0.01)。结论在社区居民中开展弓形虫病防治的健康教育是有效的。