摘要：为探讨高效制备固定化酶的方法,研究采用微波固定化的方法来提高共价固定化过程的效率。以D151树脂为载体,采用中心组合设计响应面法优化制备固定化胰蛋白酶的条件。通过二次多项式回归方程的拟合,最终确定了制备固定化胰蛋白酶的最佳条件为:吸附时间1.5 h、戊二醛质量分数1.0%、加酶量8.2 mg/mL、pH 5.0、交联温度29.0℃及交联时间3.5 min。制备的固定化胰蛋白酶在25~45℃的温度范围内、pH在4.0~5.0和9.0~10.0范围内具有良好的稳定性;重复使用8次后,酶活力保留了初始酶活力的73.1%;储藏5周后酶活力仍保留了71.1%。进一步使用固定化胰蛋白酶水解酪蛋白,其效率比使用游离胰蛋白酶的水解效率更高。结果表明,采用微波辅助固定化胰蛋白酶是一种值得尝试的高效方法,制备的固定化胰蛋白酶也具有良好的催化性能。