摘要：目的通过自行设计制作啮齿动物脑内微透析记录的清醒活动装置,并进行小鼠清醒活动的脑内微透析采样应用和验证。方法设计并利用相关材料自行制作啮齿动物脑内微透析记录的清醒活动装置,并通过小鼠黑质-纹状体神经环路的多巴胺相关神经递质进行测定和验证。向C57BL/6小鼠的黑质、纹状体埋置微透析探针,手术7 d后进行小鼠清醒活动下的黑质、纹状体的多巴胺(DA)及其代谢中间产物二羟基苯乙酸(DOPAC)两种神经递质的微透析采样。微透析流速为2μL/min,每20 min收集一管样品,共收集200 min,分析两种化学物质浓度随时间的变化。结果(1)啮齿动物脑内微透析记录的清醒活动装置可保证动物在装置内清醒活动的同时可顺利进行微透析采样。(2)啮齿动物脑内样品的可检测到稳定的神经递质含量,样品测得小鼠的多巴胺浓度为黑质(0.11±0.01)nmol/L,纹状体(0.22±0.05)nmol/L;小鼠的DOPAC浓度为黑质(3.38±0.59)nmol/L,纹状体(20.35±6.87)nmol/L。各记录时段之间无明显差异。结论啮齿动物脑内微透析记录的清醒活动装置设计实用、稳定,具有较好的时间、空间应用效果。已申请并授权获批国家专利两项:发明专利(202110525342.5),实用新型专利(202121027247.4)。

摘要：探讨S180小鼠肿瘤微环境、组织和血液中多种氨基酸类物质的含量以及环磷酰胺对其的影响。方法 24只雄性昆明小鼠随机分为正常对照组、模型组和环磷酰胺组,每组8只。模型组和环磷酰胺组腋下注射S180肿瘤腹水细胞造模。造模第二天,各组分别腹腔注射生理盐水和环磷酰胺,每日一次。给药13天后,麻醉状态下在小鼠肿瘤内埋置微透析探针并收集肿瘤组织细胞外液,透析过程中给予最后一次药物。待样品收集结束后,剥离肿瘤组织并取血。高效液相-荧光法(HPLC-FLD)检测肿瘤组织细胞外液,肿瘤组织匀浆液,血液中7种氨基酸类物质的含量变化。结果 与正常对照组相比,血清中模型组天门冬氨酸(Asp)显著升高,而甘氨酸(Gly)显著降低(P<0.01)。与模型组相比,环磷酰胺组牛磺酸(Tau)显著降低(P<0.01)。与模型组相比,活体肿瘤小鼠肿瘤微环境中环磷酰胺组的丝氨酸(Ser)和γ-氨基丁酸(GABA)分别有8个时间点和9个时间点显著升高(P<0.05或P<0.01)。但肿瘤组织中各种氨基酸没有显著性差异。结论 环磷酰胺可以通过调节肿瘤微环境中的氨基酸类物质起到抗肿瘤作用。氨基酸类物质在肿瘤微环境、组织及血液中的变化并不相同。提示在实验设计中实验取材方式对于实验结果具有明显的差异性影响。

摘要：胶质瘤是最常见的颅内肿瘤,目前尚无有效的治疗方法。深入了解胶质瘤的生理代谢特征以及化疗药物在脑内的药代动力学过程,对改善胶质瘤的治疗具有重要意义。脑微透析(brain microdialysis,B-MD)技术为中枢神经系统、生理和药理研究提供了有效手段,是目前在生理和病理情况下研究活体药物脑内分布、药物透过血脑屏障情况及监测脑内药物有效活性物质和神经递质变化的有效方法,有望为临床设计胶质瘤的个体化化疗方案提供参考依据,也为评价新型抗肿瘤药物的体内过程提供有力工具。本文将对B-MD的特点、探针的埋植及其与其他技术的比较进行归纳总结,并概述其在胶质瘤的代谢产物、药动学研究、神经递质等方面的研究进展,以了解脑微透析技术在胶质瘤研究中的应用概况。

摘要：目的设计禽类动物关节微透析固定装置,并进行痛风性关节炎鹌鹑模型的微透析采样应用和验证。方法通过对禽类动物生理习性的掌握,创建禽类动物关节微透析固定装置,并通过对实验动物关节液中的尿酸代谢相关指标进行测定和验证。固定鹌鹑使其处于屈膝状态暴露膝关节,将探针埋置关节腔中,探针进口连接推进器,出口插入收集器中,控制透析泵流速为1μL·min^(-1),采用HPLC检测方法对透析液中尿酸浓度进行定量分析。结果成功建立固定鹌鹑并暴露膝关节部位的装置结构,可顺利进行微透析采样并检测到稳定的尿酸含量。与0 d相比较,鹌鹑模型10 d、30 d膝关节液尿酸水平均具有显著差异(P<0.01,P<0.001)。结论禽类动物关节微透析固定装置结构简单、距离调节灵活、适用性强,应用于鹌鹑痛风性关节炎模型时可行性强,可为痛风性关节炎的深入研究奠定基础。

摘要：目的研究左氧氟沙星微透析探针的体内外相对回收率。方法建立高效液相色谱法(HPLC)检测左氧氟沙星的浓度,采用Kromasil-C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-10 mmol/L磷酸二氢钾溶液(15∶85),柱温30 ℃,紫外检测波长为294 nm,进样量10 μL。利用透析法、反透析法测定血管同心圆微透析探针的体外相对回收率,分析药物浓度、流速对相对回收率的影响。利用反透析法测定比格犬颈静脉、前列腺中探针的体内相对回收率,考察体内12 h的回收率稳定性。结果在0.1~50.0 μg/mL浓度范围内左氧氟沙星的HPLC分析方法线性关系良好(r=0.998 7),且专属性良好,高浓度质控样品、中浓度质控样品、低浓度质控样品、定量下限样品的精密度和准确度等均符合分析要求。体外实验中,血管同心圆微透析探针的正向回收率和反向回收率差异无统计学意义(P>0.05),药物浓度不影响体外回收率,但回收率随灌流液流速的增大而减小。体内实验中,颈静脉中探针的相对回收率为(48.46±1.94)%,前列腺中探针的相对回收率为(13.23±1.44)%,且相对回收率在12 h内稳定。结论建立的HPLC可用于左氧氟沙星微透析探针的测定,反透析法可用于测定左氧氟沙星微透析探针的体内相对回收率。

摘要：微透析技术具有连续动态微创取样优势,能实时在线研究正常生理和肿瘤病理情况下肿瘤药物在体内,尤其是肿瘤组织局部的分布、代谢和消除,利用PK/PD参数模型设计个体化给药方案,预防和减少肿瘤药物的毒性反应。同时,微透析技术还可以应用于肿瘤细胞外间质微环境中生化物质的监测以及肿瘤药物局部给药治疗,是肿瘤药物研究的重要技术手段。本文对近年来微透析在肿瘤药物研究中的应用进展进行检索和归纳,为微透析技术在取样、监测以及治疗领域的进一步研究应用提供参考。

摘要：目的建立自由活动大鼠颈静脉血管微透析技术,比较大鼠在麻醉与清醒两种状态下丹参素药动学的差异。方法设计颈静脉微透析组件,包括颈静脉导管、导管固定装置、阻塞管及软微透析探针,可预先手术将导管插入实验动物颈静脉,另一端用导管固定装置固定在动物背部。另在下肢静脉处植入给药导管,一并在背部固定。手术恢复后,将微透析探针沿导管插入血管,在动物自由活动状态下进行血液微透析采样。10只SD大鼠分两组,每组5只,作颈静脉微透析预处理后,通过给药导管按40 ***-1单剂量静注丹参素,分别在麻醉与清醒状态自由活动状态下进行血液微透析,应用HPLC紫外检测器测定透析液样品中丹参素浓度,绘制血药浓度-时间曲线,并计算药动学参数。结果成功获得清醒自由活动状态与麻醉状态下丹参素在大鼠体内的药-时曲线,计算得到大鼠在清醒与麻醉状态下丹参素药动学参数,分别为:AUC0-∞(3 517.3±7 754.5)、(10 739.8±2 458.8)***.L-1;MRT0-∞(37.0±7.7)、(67.7±3.8)min;t1/2zeta(69.6±33.4)、(123.1±16.1)min;ρmax(290.0±90.3)、(256.4±15.5)mg.L-1;CLz(11.7±2.0)、(3.9±1.0)***-1;Vssz(423.8±57.0)、(260.9±58.9)***-1。结论成功建立了自由活动大鼠颈静脉血管微透析技术。应用该技术对丹参素在清醒自由活动和麻醉大鼠体内药动学过程进行了比较研究,结果表明,两种状态下的药动参数有显著性差异。取血等强应激可能影响药动学过程,因此自由活动大鼠血液微透析技术有可能成为药动学研究的重要方法 。

摘要：应用透析原理对脑内细胞外液中神经化学物质进行取样分析的想法已有２０多年历史。对脑内细胞外液进行分析可以更好地了解中枢神经系统的生理和病理情况，而微透析技术就是一种用来测定脑内细胞外液神经递质浓度的取样方法。随着探头设计的微型化和高灵敏度的分析方法的建立，微透析技术在许多实验室已成为一种常规实验手段。近年来，以猴脑为研究对象的微透析实验呈增长趋势，并获得了一些崭新的结果。本文介绍了在猴脑上进行微透析技术的方法，并综述了微透析在猴脑研究中的应用近况及实验结果。

摘要：微透析技术作为一种新型的研究生物动态变化的活体采样技术,具有"在体、原位、实时、连续、高效"等特点。然而,该技术仍处于不断成熟的过程中,诸多问题仍待解决和完善,尤其是校正方法的稳定性和准确性。为此,该文就国内外有关微透析技术的基本装置、设计原理及其校正方法的研究概况予以综述,为相关研究工作提供科学依据和理论支持。

摘要：微透析技术是利用物质的扩散性质和半透膜选择透过原理设计的,用于测定组织和细胞外液中游离药物浓度的一种连续、实时、在体的新型生物取样技术,具有自身对照、多部位取样、动态监测等显著优势,可更清楚、更全面地反映药物在体内的代谢过程。在微透析实验中，由于无法知道细胞外液的真实浓度，因此可以通过测定透析液中药物的浓度以及探针的回收率来计算组织外液中药物的浓度。