摘要：目的探究沉默乙酰肝素酶(Heparanase)基因对心肌缺血再灌注(I/R)大鼠心肌细胞凋亡及氧化损伤的影响及机制。方法选取60只SD大鼠,随机分为Control组、I/R组、I/R+shRNA-NC组和I/R+Heparanase-shRNA组各15只。除Control组外,其余各组制备I/R模型;设计Heparanase靶向RNA干扰序列合成靶序列的双链DNA,转染至大鼠体内;采用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western印迹检测Heparanase mRNA及蛋白表达,确定干扰成功;分别检测各组胱天蛋白酶心脏功能及心肌损伤标志物、氧化应激物质及炎症因子指标;采用苏木素-伊红(HE)和TUNEL染色观察各组心肌病理变化;采用Western检测凋亡蛋白胱天蛋白酶(Caspsae)-3,B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达。结果Control组心肌组织、心肌纤维及其肌外膜均结构完整且形态正常;I/R组和I/R+shRNA-NC组心肌纤维呈现弯曲状态,肌红蛋白出现溶解,同时心肌肌细胞核固缩、溶解,肌束膜出现明显破裂;I/R+Heparanase-shRNA组心肌组肌外膜较为完整、心肌纤维弯曲显著改善。相比Control组,I/R组肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌红蛋白(Mb)、肌钙蛋白(cTn)I、心肌细胞凋亡指数、切割后Caspase-3/Caspase-3(cleaved cas3/cas3)、Bax/Bcl-2比值、丙二醛(MDA)、白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α水平显著升高,心率(HR)、左心室射血分数(LVEF)、左室壁厚度(LVWT)、超氧化物歧化酶(SOD)水平显著降低(P<0.05);相比I/R+shRNA-NC组,I/R+Heparanase-shRNA组CK-MB、Mb、cTnI心肌细胞凋亡指数、cleaved cas3/cas3、Bax/Bcl-2比值、MDA、IL-6、TNF-α水平显著降低,HR、LVEF、LVWT、SOD水平明显升高(P<0.05)。结论沉默Heparanase基因可缓解I/R大鼠心肌细胞凋亡情况,其作用机制可能是通过抑制氧化应激及炎症反应,下调Caspase-3、Bax表达,上调Bcl-2表达,从而减轻心肌细胞凋亡。

摘要：目的探讨脂联素参与七氟醚预处理后心肌缺血再灌注(MIR)小鼠的认知功能保护作用的机制。方法将野生健康成年SPF级雄性C57BL/6小鼠随机分为sham组、MIR-Control组、MIR-SevoPre组,每组10只。将健康成年SPF级雄性脂联素基因敲除(APN KO)小鼠随机分为KO-sham组、KO-MIR-Control组、KOMIR-Sevopre组、KO-MIR-Sevopre-AdipoRon组,每组10只。检测3组C57BL/6小鼠在模型复制或对照处理后12 h血浆的高、中和低分子量脂联素浓度;使用Morris水迷宫实验检测3组C57BL/6小鼠在模型复制或对照处理后24 h的游泳速率和潜伏期;检测4组APN KO小鼠在模型复制或对照处理后第1天、第2天、第4天的潜伏期。结果3组C57BL/6小鼠模型复制后第1天、第2天和第4天的游泳速率比较,采用重复测量设计的方差分析,结果:①不同时间点的小鼠游泳速率无差异(P>0.05);②3组小鼠游泳速率无差异(P>0.05);③3组小鼠游泳速率的变化趋势无差异(P>0.05)。3组C57BL/6小鼠模型复制后第1天、第2天和第4天的潜伏期比较,采用重复测量设计的方差分析,结果:①不同时间点的小鼠潜伏期有差异(P0.05)。Sham组小鼠的潜伏期与血浆脂联素水平呈负相关(r=-0.480,P=0.033),MIR-Control组小鼠的潜伏期与血浆脂联素水平呈负相关(r=-0.300,P=0.040),MIR-Sevopre组小鼠的潜伏期与血浆脂联素水平呈负相关(r=-0.730,P=0.019)。4组APN KO小鼠模型复制后第1天、第2天和第4天的潜伏期比较,采用重复测量设计的方差分析,结果:①不同时间点小鼠潜伏期有差异(P0.05),与KO-MIR-Sevopre组比较,KO-MIR-Sevopre-AdipoRon组潜伏期缩短(P0.05)。结论血浆脂联素参与七氟醚预处理对小鼠心肌MIR损伤后的认知保护作用,口服AdipoRon后可代替部分脂联素的保护作用。

摘要：目的观察恩格列净(EMPA)对大鼠心肌缺血再灌注(MI/R)损伤的保护作用,并从核转录因子E2相关因子2(Nrf2)信号探讨其可能的机制。方法40只成年SD大鼠随机分为4组:对照组(control)、MI/R组、EMPA(2.5μmol/L)处理MI/R组(EMPA+MI/R)以及EMPA联合Nrf2抑制剂ML385(10μmol/L)处理MI/R组(EMPA+ML385+MI/R)。采用大鼠离体心脏缺血40 min再灌注2 h建立缺血再灌注模型,用氯化三苯基四氮唑(TTC)、苏木素-伊红(HE)染色、乳酸脱氢酶(LDH)活性和肌钙蛋白I含量(cTnI)检测心脏损伤程度,以左室收缩峰压(LVSP)和左室舒张末压(LVEDP)评价心脏功能,超氧化物阴离子荧光探针(DHE)观察活性氧(ROS)含量,ELISA检测心肌中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性,Western blot检测cytochrome C、cleaved Caspase-3、Nrf2、HO-1和NQO-1蛋白表达。结果与control组比较,MI/R组心肌梗死面积、LDH活性和cTnI含量增加,心肌纤维断裂,LVSP降低,LVEDP升高,ROS含量、MDA含量、cytochrome C和cleaved Caspase-3表达均增加,而SOD和CAT活性、Nrf2、HO-1和NQO-1表达降低(均P<0.01)。与MI/R组相比,EMPA+MI/R组心肌梗死面积、LDH活性和cTnI含量降低,心肌纤维断裂减轻,LVSP增加,LVEDP降低,ROS含量、MDA含量、cytochrome C和cleaved Caspase-3表达均降低,而SOD和CAT活性、Nrf2、HO-1和NQO-1表达增加(均P<0.01)。与EMPA+MI/R组比较,EMPA+ML385+MI/R组心肌梗死面积、LDH活性和cTnI含量增加,心肌纤维明显断裂,LVSP降低,LVEDP升高,ROS含量、MDA含量、cytochrome C和cleaved Caspase-3表达均增加,而SOD和CAT活性、Nrf2、HO-1和NQO-1表达降低(均P<0.01)。结论EMPA可通过调控Nrf2信号抑制氧化应激减轻MI/R损伤。

摘要：目的研究生长激素预处理对大鼠心肌缺血再灌注后心肌细胞凋亡及能量代谢的影响。方法42只大鼠采用完全随机设计方法分为3组，假手术组14只（假手术24h）、心肌缺血再灌注组14只、生长激素组14只，后2组均缺血30min，再灌注24h，其中生长激素组的每只大鼠术前皮下肌肉注射生长激素1 U／kg，连续7d，其中第7次皮下注射于手术前进行。前2组每只大鼠相应皮下肌肉注射生理盐水0．5ml／d。每组中均抽取8只大鼠，以TUNEL法检测缺血区心肌细胞凋亡情况，每组中剩余的抽取5只大鼠，以高效液相色谱法测定缺血区心肌三磷酸腺苷（ATP）并进行心肌组织病理、电镜超微结构观察。结果与假手术组比较，心肌缺血再灌注组再灌注24h后缺血区心肌细胞凋亡率和ATP消耗程度均明显上升（P〈0．05），心肌组织病理和超微结构改变明显；与心肌缺血再灌注组比较，生长激素组再灌注24h后缺血区心肌细胞凋亡率和ATP消耗程度均明显改善（P〈0．05），心肌组织病理和超微结构改变明显减轻。结论生长激素能减少心肌缺血再灌注后心肌细胞凋亡和ATP的消耗，说明生长激素对心肌缺血再灌注后的心肌具有保护作用。

摘要：心肌梗死时及时的再灌注是抢救梗死心肌唯一有效的途径,可以使频临坏死的危险区心肌细胞得到挽救。但是,缺血心肌的再灌注还会引发心肌更为严重的损伤,增大梗死面积,称之为心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia-reperfusion injury,MRI)。研究证实,再灌注期活性氧(reactive oxygen species,ROS)的进一步形成是造成包括心脏本身在内,机体各脏器氧化损伤的主要原因之一[1]。甲醛是日常家装后最常见的室内空气污染物,也是室内氧化剂的重要来源,吸入甲醛会导致组织器官的氧化损伤[2]。本研究将从检测脑组织超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)与谷胱甘肽过氧物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性以及丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量的变化来反映心肌缺血再灌注对脑组织产生的损伤。同时模拟心肌梗死患者生活环境中甲醛吸入对其损伤产生的影响,并使用还原型谷胱甘肽(GSH)干预期望对脑组织具有一定的保护作用。

摘要：人参单体皂苷作为人参的主要活性物质,可有效抑制心肌细胞肥大、改善心肌缺血,保护心肌缺血再灌注、促进血管再生、抑制心肌细胞凋亡和抗心律失常等。对近10年人参皂苷在心血管疾病的药理作用研究进行综述,为以人参皂苷为基础的心血管疾病保护剂的新药开发及临床用药提供参考。