摘要：背景:抑制急性排斥反应的高效免疫抑制剂为器官移植所必需,较多的中药成分具有免疫调节作用。课题组在前期实验成功建立全血供大鼠肝移植模型基础上,初步发现大黄素对大鼠肝移植后急性排斥反应具有抑制作用,而且这种抑制作用可以通过多途径达到。目的:观察大黄素对同种异体大鼠肝移植后早期急性排斥反应过程中肝细胞凋亡的影响。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2005-04/09在西安交通大学第一附属医院肝胆外科实验室完成。材料:供体选用SD大鼠80只,雌雄不限;受体选用雄性Wistar大鼠80只,制备SD→Wistar大鼠全血供肝移植模型。方法:将制备的80只大鼠模型按随机数字表法分为4组,每组20只。于移植后第1天开始按分组设计行腹腔内药物注射,模型对照组仅给予生理盐水,大黄素组给予大黄素1.5mg/(kg·d),环孢素A组给予环孢素A3mg/(kg·d),环孢素A+大黄素组给予环孢素A3mg/(kg·d)+大黄素1.5mg/(kg·d)。主要观察指标:移植后第7天各组处死10只大鼠,取肝脏标本,观察移植肝组织急性排斥反应强度、肝细胞凋亡指数、Bcl-2蛋白的表达。余受体继续应用药物干预直至死亡,记录其生存时间。结果:与模型对照组相比,大黄素组、环孢素A组、环孢素A+大黄素组大鼠移植后存活时间明显延长(P<0.05),以环孢素A+大黄素组存活时间最长。移植后第7天,与模型对照组相比,大黄素组、环孢素A组、环孢素A+大黄素组大鼠移植肝排斥反应强度、肝细胞凋亡指数显著降低(P<0.05),Bcl-2蛋白表达水平显著升高(P<0.05);大黄素+环孢素A组大鼠的移植肝排斥反应强度、肝细胞凋亡指数显著低于其他3组(P<0.05),Bcl-2蛋白表达水平显著高于其他3组(P<0.05)。结论:大黄素具有抑制同种异体大鼠肝移植急性排斥过程中肝细胞凋亡程度,改善肝功能的作用,与环孢素A具有一定的协同作用,同时又能减轻环孢素A引起的肝功能损害。

摘要：背景：对于CD40通路的研究以往多集中在器官移植，涉及异体肢体方面的报道较少。目的：探讨靶向CD40的小分子RNA干扰对大鼠异体肢体移植急性排斥反应、细胞凋亡的影响，检测CD40通路阻滞后相关基因的表达变化。设计、时间及地点：细胞基因工程体内实验，于2007—09／2008—02在哈尔滨医科大学附属第一医院中心实验室完成。材料：清洁级10～12周龄雄性Wistar受鼠、SD供鼠各27只，行同种异体右后肢移植。真核表达质粒pSilencer4．1-CMV neo为Ambion公司产品。pSilencer4．1-CD40shRNA重组质粒由哈尔滨医科大学附属第一医院中心实验室保存。梭华-Sofastr^TM in vivo体内转染试剂为厦门太阳马生物工程有限公司产品。方法：27只Wistar受鼠异体肢体移植完成后随机分为3组，9只／组。干扰组经阴茎背静脉注入梭华-Sofast（15 μL）-siCD40—2／pSilencer（100μg）载体复合物600μL，空载体组等量注入梭华-Sofast（15μL）-pSilencer4．1-CMV neo（100μg）空载体复合物，对照组等量注入生理盐水，连续注射6d，1次／d。主要观察指标：观察移植物排斥反应征象及移植肢体存活时间，检测细胞凋亡情况，免疫组织化学染色检测p53，p21，Bcl-2，Bax的表达。结果：干扰组未见排斥反应征象，且移植物发牛排斥反应的时间及存活时间均显著长于空载体组、对照组（t=3．137～3．519，P〈0．01）；空载体组、对照组于移植后近期发生排斥反应。干扰组移植后第1，3，5，7天细胞凋亡指数均明显低于空载体组、对照组（t=3．636-4．786，P〈0．01）。干扰组移植后各时间点P53，P21，Bax的表达均明显低于空载体组、对照组（t=3．586-4．531，P〈0．01）；Bcl-2的表达均明显高于空载体组、对照组（t=3．664—4．644，P〈0．01）。结论：在不应用免疫抑制剂的情况下，靶向CD40的小分子RNA干扰可以减轻大鼠异体肢体移植后的急性排斥损伤，抑制细胞凋亡，可能与其对p53，p21，bcl-2，bax基因的调节密切相关。

摘要：背景:移植后急性排斥反应是制约国内肝移植发展的主要障碍之一。目的:探索同种异基因大鼠肝移植急性排斥反应模型的建立方法。设计、时间及地点:病理学水平的实验方法改进,于2007-06/2008-11在中南大学实验动物学部完成。材料:供体选用SD大鼠,雌雄不拘;受体选用雄性Lewis大鼠,供受体各120只。方法:采用改良Kamada’s二袖套法,并在此基础上加以改良:肝上下腔静脉重建采用改良连续缝合;支架法重建肝动脉,肝脏灌注采用全自动静脉输液泵控制,建立同种异基因大鼠肝移植急性排斥反应模型。共实施大鼠肝移植120例,其中定型手术80例。主要观察指标:移植手术时间,移植成功率,大鼠精神状态,对刺激的反应,活动及进食情况,急性排斥反应Banff评分。结果:80例定型手术中,供肝热缺血时间为0～2min,冷缺血时间为80min,无肝期平均为16～21min,手术成功率为85%(68/80)。急性排斥反应出现于移植后第3天,表现为食欲不佳、精神萎靡;移植后第5天出现局部黄染;移植后第7天黄疽进行性加重,并出现明显腹水和死亡。移植后第3,5,7天的急性排斥反应Banff评分分别为3.98,4.96及6.03。结论:同种异基因大鼠采用改良Kamada’s二袖套法、重建肝动脉、改进肝上下腔静脉缝合及肝脏灌注方法可建立稳定的大鼠肝移植急性排斥反应模型。

摘要：目的评价联合使用单克隆与多克隆抗体免疫抑制诱导治疗方案对肾移植术后6个月内急性排斥(AR)发生率影响。方法采用前瞻性队列研究设计,将2002年9月～2006年11月113例同种异体肾移植术后患者,分为甲基强的松龙(MP)组(n=29)、MP+抗人T细胞免疫球蛋白(ALG)组(n=17)、MP+抗胸腺细胞球蛋白(ATG)组(n=8)、MP+赛尼哌组(n=12)、MP+ATG+赛尼哌组(n=30)、MP+ALG+赛尼哌组(n=17),各组免疫抑制诱导治疗后均联合环孢素A(CsA)+吗替麦考酚酯胶囊(MMF)+泼尼松(Pred)3联维持免疫抑制治疗。进行同期队列对照,只定期随访,观察各组急性排斥发生率。结果各组急性排斥发生率分别为MP组34.5%、MP+ALG组17.6%(RR=2.456,P>0.05)、MP+ATG组2.5%(RR=3.684,P>0.05)、MP+赛尼哌组25.0%(RR=1.579,P>0.05)、MP+ATG+赛尼哌组3.3%(RR=10.526,P<0.05)、MP+ALG+赛尼哌组5.9%(RR=8.421,P<0.05)。结论联合单克隆与多克隆抗体免疫抑制诱导治疗方案与单用MP组或单独使用单克隆或多克隆抗体治疗组比较,肾移植术后6个月急性排斥反应发生较低。单独使用单克隆或多克隆抗体治疗方案可减低急性排斥发生率,但与单用MP比较差异无显著性。

摘要：目的 观察肾移植患者与霉酚酸（MPA）作用位点相关的次黄嘌呤脱氢酶（IMPDH）基因多态性对急性排斥反应的影响.方法 对105例肾移植患者采用基因测序法进行IMPDH基因多态性检测,并随访统计上述患者移植后1年内急性排斥反应的发生率,按照IMPDH不同基因型分组,分析IMPDH基因多态性与移植后1年内急性排斥反应的相关性.结果 105例患者中,所测3个位点中IMPDH1 rs2278293 GG型35例（33.33％）,GA型49例（46.67％）,AA型21例（20.00％）;IMPDH1 rs2278294 GG型22例（20.95％）,GA型49例（46.67％）,AA型34例（32.38％）;IMPDH2 rs11706052 GA型14例（13.33％）,AA型91例（86.67％）.单因素分析显示肾移植后1年内IMPDH1 rs2278293、rs2278294位点GG型患者急性排斥反应的发生率明显高于GA＋AA型患者,差异有统计学意义（P＜0.05）.两位点联合分析显示GG-GG型患者移植后1年内急性排斥反应的发生率更高,与GA＋ AA型者比较差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 携带IMPDH1rs2278293、rs2278294的GA或AA型患者移植后1年内急性排斥反应发生率更低,对霉酚酸酯的治疗效果更好.

摘要：背景：肺移植后急性排斥反应的临床症状、胸片及动脉血气检查等综合反应，均于移植排斥反应发生后出现，可导致移植失败。目的：评估将血浆CD62L作为监测诊断肺移植急性排斥反应指标的可行性。设计、时间及地点：随机对照动物实验，于2003-07／09在泰山医学院实验室完成。材料：清洁级SD雄性大鼠32只，Wistar雄性大鼠16只。环孢酶素A为福建科瑞药业有限公司产品，批号030502。方法：设立4组：正常对照组取8只SD大鼠，进行同体原位移植；同基因移植组以8只SD大鼠为供、受鼠，进行左肺原位移植：异基因移植组取Wistar供鼠、SD受鼠各8只，进行左肺原位移植：异基因移植用药组，在前组基础上于移植后1-5d腹腔内注射环孢酶素A20mg／（kg·d）。采用三袖套管法建立大鼠左肺原位移植模型。主要观察指标：流式细胞仪检测外周血CD62L表达水平，免疫组化染色检测CD62L表达水平及血浆中CD62L达水平，苏木精-伊红染色观察肺组织急性排斥反应情况。结果：移植后5，10d与正常对照组、同基因移植组比较，异基因移植组、异基因移植用药组外周血CD62L表达明显升高（P〈0．01，P〈0．05）；各组肺组织CD62L表达水平与外周血CD62L表达基本相似。同基因移植组肺组织仅见少量单核细胞浸润；异基因移植组肺组织血管周围、支气管周围单核细胞袖套样浸润，合并血管内膜炎，可见坏死细胞、气腔出血，并存在肺实质坏死；异基因移植用药组排斥反应较前组明显减轻。移植肺组织及外周血中的CD62L表达呈正相关（r=0．766）。结论：大鼠肺移植急性排斥反应中CD62L表达增高与血浆中CD62L水平相关，提示血浆中CD62L水平有望成为诊断急性排斥反应新的辅助指标。

摘要：钙调磷酸酶抑制剂（calcineurinin—hibitor，CNI）通过与淋巴细胞内亲环素结合后再与钙神经磷酸酶结合来发挥免疫抑制作用，因其能显著降低器官移植后的急性排斥反应和感染发生率，提高移植物的存活率，故为临床上最广泛应用的免疫抑制剂。

摘要：背景:很多实验已证实,可溶性CD30可作一种除群体反应型抗体以外的新的分子标志物来评估移植受者移植前免疫状况。目的:比较sCD30与群体反应性抗体对预测肾移植后急性排斥反应发生的影响。设计、时间及地点:回顾性病例分析,于2007-01/2008-01在郑州人民医院器官移植科完成。参试者:接受肾移植的患者120例。方法:检测120例肾移植前患者血清sCD30与群体反应性抗体浓度,移植后患者接受钙调神经磷酸酶抑制剂的免疫抑制疗法。移植后6个月内的急性排斥反映判断采用肾穿刺活检,确诊患者是否发生了急性排斥反应。主要观察指标:通过检测移植前后sCD30,群体反应性抗体水平,观察患者sCD30、群体反应性抗体与急性排斥关系。结果:总的急性排斥反应发生率为15.8%(19/120),sCD30与群体反应性抗体检测均阳性患者与两项都是阴性的患者相比急性排斥反应发生率显著提高(42%和7%,P=0.001)。群体反应性抗体阴性患者中若检测出sCD30呈阳性,发生急性排斥反应的概率会显著升高(21%和5%,P=0.019)。致敏组人群检测结果阳性率较高。结论:sCD30的高表达与肾移植后急性排斥反应有关。

摘要：背景:体外实验数据表明了在同种异体移植免疫反应中存在CD30阳性的T细胞。目的:通过对肾移植手术前后患者血清溶解性CD30分子的检测,结合临床排斥反应的发生情况,分析其对于评估受者术后免疫状态、监测急性排斥反应发生以及预后判断中的价值。设计、时间及地点:临床病例分析,于2004-04/2007-03在江苏省人民医院完成。对象:肾移植患者153例,男103例,女50例,平均年龄37岁。方法:分别采集移植前(未使用免疫抑制剂)和移植后第0,1,3,5,7,14,21,28天移植受者外周血3mL,分离血清-20°C保存,使用由BenderMedSystems提供的溶解性CD30细胞因子ELISA检测试剂盒,检测各样本溶解性CD30水平。主要观察指标:移植前后溶解性CD30与排斥反应的相关性。结果:对17例发生急性排斥患者与136例未发生排斥患者的术前溶解性CD30水平进行比较,排斥组平均113.2U/mL,未排斥组83.2U/mL,两组间差异有显著性意义(P0.05);而从术后5d开始,排斥组与未排斥组具有明显差异(P0.05)。ROC曲线分析结果表明,术后5d溶解性CD30水平可以很好的诊断急性排斥反应,曲线下面积为0.850,理想的临界值为100U/mL,其特异性为85.0%,敏感性为83.6%。预后结果显示,术前溶解性CD30阳性患者移植肾存活率明显低于阴性患者(P<0.01)。结论:肾移植患者溶解性CD30水平对于预测急性排斥反应及对预后的判断均有一定的价值。

摘要：自1983年美国国家卫生研究院(NIH)正式承认肝移植是终末期肝病的一种治疗方法以来,随着以环孢菌素为主的一系列免疫抑制剂的问世和移植外科技术的成熟[1],肝移植病人的存活率有了相当提高.国内肝脏移植的发展经历了三个阶段:在20世纪60～70年代处于实验与临床探索阶段;80年代一度停滞不前的低迷阶段;90年代稳步前进,尤其是近几年来得到快速的进展,我院仅2003年就成功施行了110例肝移植(在受到SARS影响的前提下).由于肝移植涉及到多学科的理论与实践,不仅靠精湛的外科技术,而且要靠现代化的医院设备和人才以及相互间的精诚协作.目前,肝移植已成为一种定型手术,因此,移植后的成败将取决于排斥反应的诊断和治疗的艺术.肝移植后几乎总有不同程度的肝功能不全.对肝功能不全的病因诊断需要对所有的临床、影像和实验室资料等进行认真的综合分析,其中病理组织学起着排斥反应判断中的关键作用,因此,如何掌握和发挥病理组织学在肝移植中的作用,对提高肝移植的长期生存是十分迫切而实用的问题。