摘要：作者设计合成一对ＤＮＡ引物，经ＰＣＲ扩增出Ｋａｒｐ及ＣＭＹ株恙虫病立克次体ｓｔａ５８主要抗原基因片段，分别建立其无性繁殖系，构建了表达质粒ｐＢＶＲＫ５和ｐＢＶＲＣ４５，在国内首次应用大肠杆菌成功表达了恙虫病立克次体抗原。其意义在于为我国恙虫病立克次体研究提供特异性核酸探针，为恙虫病基因工程诊断试剂的研制奠定物质基础。

摘要：目的为了进一步完善恙虫病立克次体的株型鉴定技术，并且为临床提供诊断试剂。方法本文采用ＮＰＣＲ技术，参考并自行设计两对寡核苷酸引物（Ｐ１、Ｐ２、Ｐ３、Ｐ４），从恙虫病立克次体Ｋａｒｐ株基因组ＤＮＡ中特异扩增出编码Ｓｔａ５６抗原的部分基因片段，经纯化后用ＢａｍＨⅠ和ＨｉｎｄⅢ双酶切后，克隆到质粒ＰＵＣ１８中，转化大肠杆菌ＴＧ１，经ＰＣＲ和双酶切鉴定。结果与结论构建了重组质粒ＰＵＣ１８－ＲＫ，从而为该基因片段的表达奠定了基础。

摘要：目的　研制用于东方体检测的基因芯片 ,建立快速、灵敏、特异的恙虫病诊断方法。方法　根据东方体 5 6kD外膜蛋白基因序列 ,设计群特异性引物及探针 ,制备寡核苷酸芯片。用Cy3标记的引物 ,利用不对称PCR技术扩增DNA片段 ,将扩增的DNA片段与芯片上的探针杂交 ,用荧光扫描仪检测并分析信号。结果　建立的基因芯片能够检测恙虫病东方体标准株DNA的特异性荧光信号。具有特异、灵敏、快速的优点。结论　成功制备的基因芯片有望应用于恙虫病东方体多种样本的检测 ,为恙虫病提供最为理想的诊断方法。

摘要：从恙虫病立克次体（Ｒｔ）Ｋａｒｐ株的群特异性抗原基因序列设计两对引物建立套式ＰＣＲ检测现场鼠体采集的恙螨幼虫体内及恙虫病现症病人外周血单核细胞内的ＲｔＤＮＡ。除一份已用过药病人标本外，其余９份均可检见８８ｂｐＤＮＡ扩增产物；检测结果表明：现场鼠体采集的地里纤恙螨（Ｌｅｐｔｏｔｒｏｍｂｉｄｉｕｍｄｅｌｉｅｎｓｅ）幼虫的Ｒｔ携带率是１３．３％，证实套式ＰＣＲ可用于急性期恙虫病的诊断和媒介恙螨流行病学的调查。

摘要：目的从分子水平探讨山东地区不同季节优势恙螨自然感染恙虫病东方体(Ot)情况及其作为恙虫病传播媒介的可能性。方法根据Ot-Sta56 kDa外膜蛋白基因部分序列设计Ot种和型特异性引物,对标本提取的DNA先采用种特异性引物扩增,然后再采用型特异性引物扩增分型,并对部分标本进行序列测定。结果从不同季节优势恙螨幼虫共得到11株Ot分离株和16份恙螨匀浆,从这27份标本提取的DNA经首轮PCR扩增后,18份标本有预期的目的带。对首轮PCR产物采用nested PCR扩增分型,结果17份为Kawasaki型,1份(LHGM2株)为Karp型。序列同源性分析结果证实了nested PCR分型结果:XDM2株首轮PCR产物碱基序列与。Kawasaki型相应DNA片段的碱基序列同源性最高,为97．00％,在系统发育树上与Kawasaki株位于同一分支,应属于Kawasaki型; LHGM2株首轮PCR产物碱基序列与Karp型相应DNA片段的碱基序列同源性最高,为96．45％,在系统发育树上与Karp株位于同一分支,应属于Karp型。结论山东地区不同季节优势恙螨中存在Ot自然感染,Ot主要基因型为Kawasaki型。

摘要：目的通过分析海南省琼中黎族苗族自治县(简称“琼中”)98例不明原因发热患者的恙虫病流行特点,了解该地区恙虫病东方体菌株流行的情况,为该地区制定恙虫病防治策略和控制措施提供科学依据。方法收集2019年1月1日至2019年12月31日琼中黎族苗族自治县人民医院诊断为疑似恙虫病和不明原因发热患者血液样本,利用胶体金免疫层析法和巢式PCR方法对样本进行恙虫病东方体特异性IgM、IgG抗体和恙虫病东方体56kD型特异性抗原基因检测,同时使用预先设计的样本信息表收集患者的临床表现及流行病学信息。针对巢式PCR检测结果为阳性的样本,进行克隆及Sanger测序。对获得的患者临床信息及检测结果进行流行病学分析,将测序得到的序列进行基因遗传进化分析。结果98例样本中,恙虫病IgM抗体阳性率为24.49%(24/98),恙虫病IgG抗体阳性率为46.94%(46/98),恙虫病PCR阳性率26.53%(26/98),焦痂或皮疹13.27%(13/98)。根据诊断标准,最终诊断为恙虫病的患者为33例。感染人群主要以31~50岁的青壮年为主,职业主要为农民。该地区恙虫病的流行以营根镇、长征镇和红毛镇为主并涉及9个乡镇。流行时间有明细的季节性,以7月和11月为主要高发期。流行的基因型主要为Karp型和Gilliam型。结论琼中为恙虫病的自然疫源地,该地区流行的恙虫病东方体基因型主要为Karp和Gilliam型,具有基因多态性。

摘要：目的建立基于“染料-蜡丸”的目视LAMP检测恙螨中恙虫病东方体的方法,为恙虫病的防治提供新工具。方法选择Ot GroEL基因作为检测靶序列,在线设计并合成LAMP引物。构建r Ot-GroEL重组质粒作为阳性对照。建立基于SYBR Green I的“染料-蜡丸”目视LAMP,并联合便携式LAMP仪使其利于现场应用。结果新设计的引物针对Ot GroEL基因的237 bp靶区域,所构建的重组质粒r Ot-GroEL测序结果正确。在便携式LAMP仪上运用“染料-蜡丸”目视LAMP法,其检测下限为1×10^2拷贝质粒。结论成功建立了一种可与便携式LAMP仪联合使用的检测恙螨体内恙虫病东方体的“染料-蜡丸”目视LAMP法。

摘要：目的了解深圳市南山区恙虫病的流行特征,为制定和完善恙虫病防控措施提供参考依据。方法通过中国疾病预防控制信息系统收集2011—2021年南山区恙虫病报告病例信息,对该病的三间分布及病例就诊方式、临床症状、暴露方式等特征进行描述,并采用时空扫描分析方法分析时空聚集情况。结果2011—2021年南山区共报告恙虫病病例181例,年均报告发病率为1.08/10万,年报告发病率为0.58/10万~2.28/10万;报告病例集中在5—11月(91.16%,165/181)。男性报告病例100例,女性81例,性别比为1.23∶1;40~49岁年龄组病例占比最高(26.52%,48/181);职业以工人最多(28.73%,52/181)。发病时首选综合医院就诊的病例占60.77%(110/181),首诊即诊断为恙虫病/疑似恙虫病的比例为51.38%(93/181)。病例主要症状有发热(100.00%,181/181)、特异性焦痂或溃疡(97.79%,177/181)和头痛(65.19%,118/181)。暴露方式前3位的为户外散步(43.65%,79/181)、野外作业(29.28%,53/181)和坐卧草地(22.65%,41/181)。疫点主要分布在南山区的招商、西丽和南头等3个街道(78.45%,142/181)。时空扫描显示,2017—2019年招商街道的文竹园社区为Ⅰ级聚集区。结论南山区恙虫病呈散发流行,建议积极开展虫媒监测与防制,加强对人群的健康教育,并提高临床医务人员对于恙虫病的诊疗水平。

摘要：目的:探讨恙虫病患者血清中降钙素原水平,并探讨血清降钙素(PCT)与恙虫病预后的关系。方法:本研究收集信宜市人民医院2013年7月到2015年7月恙虫病患者72例作为观察组,选择72例健康者作为对照组,两组人员在年龄等方面无差异。采用回顾性调查研究,前瞻性设计,用半定量的固相免疫测定法测定其血清内PCT水平并进行统计学分析;对观察组进行跟踪调查,观察其预后与血清内PCT水平的关系。结果:观察组患者血清中PCT水平明显高于对照组,恙虫病患者血清PCT阳性率90.28%,健康者全部为阴性,两组差异有统计学意义(χ~2=118.481,P=0.014);血清PCT水平与恙虫病预后呈显著正相关(r=0.883,P=0.023)。结论:血清内PCT水平可以作为恙虫病的一项敏感指标,同时对恙虫病的鉴别诊断、治疗及预后具有一定指导意义。

摘要：目的:利用基因芯片技术对平潭岛春季恙虫病疫区的恙虫病疑似病人、宿主、媒介标本进行检测,证实疫源地的存在,采取有针对性的防制措施控制流行。方法:现场采集恙虫病疑似病人外周静脉血和捕鼠采集体表恙螨。根据Ot56kD外膜蛋白基因序列,设计群特异性引物及探针,制备寡核苷酸芯片。PCR技术分别扩增样本OtDNA片段,与芯片上的探针杂交,用荧光扫描仪检测并分析信号;加强卫生宣传,做好个人防护,搞好环境卫生,做好灭鼠、灭螨等防制措施。结果:对疑似病人血块3份、野鼠脾脏40份、恙螨5份DNA进行基因芯片检测,其中病人血3份,野鼠脾脏4份,恙螨2份检出阳性;经过2年防制,该地区2004年无恙虫病病例报告。结论:基因芯片检测样本具有特异、灵敏、快速的特点,从基因水平证实平潭岛春季恙虫病存在,所采取的防制措施切实有效。