摘要：以葡萄风信子常见种亚美尼亚的花蕾和叶片作为外植体,开展不同因素对葡萄风信子愈伤组织诱导和植株再生影响的研究。结果表明:亚美尼亚的花蕾和叶片愈伤组织诱导和增殖的最佳培养基配方为:MS+1.0 mg/L 2,4−D+0.1 mg/L 6−BA,其愈伤组织诱导率为100%,且继代35 d后不同培养基上的花源和叶源愈伤组织的鲜质量无显著差异;液体培养和光照培养有利于愈伤组织细胞增殖,1 g亚美尼亚花源和叶源愈伤组织经液体培养4个继代周期后,平均鲜质量最高可达(10.36±1.13)g和(10.55±2.29)g,表明不同培养基配方对亚美尼亚花蕾和叶片愈伤组织细胞增殖无显著影响,且液体培养和光照培养均有利于愈伤组织的增殖;胚性和非胚性2种愈伤组织分别通过体细胞胚发生和器官发生2种途径可再生形成完整植株,再生率均为100%。

摘要：【目的】比较不同抗褐化剂减轻福建柏组织培养过程中褐化现象的效果,以提高福建柏愈伤组织培养的增殖分化能力。【方法】以福建柏鳞叶和茎段为外植体,通过单因素试验,研究0.0~2.5 mg/L NAA和2,4-D及0.0~3.0 mg/L IBA对愈伤组织诱导率与生长状态的影响;以福建柏茎段为外植体,采用单因素和多因素组合试验,研究100~2000 mg/L聚乙烯吡咯烷酮(PVPP)、100~1000 mg/L活性炭(AC)和V C以及不同质量浓度V C与AC组合,对愈伤组织污染率、死亡或褐化率及诱导率的影响;以诱导的愈伤组织为材料,采用单因素试验,研究100~1000 mg/L PVPP、100~300 mg/L V C、200~1000 mg/L AC、30~100 mg/L V B对愈伤组织增殖生长量、增殖率、褐化率及PPO、POD活性的影响。【结果】①不同质量浓度NAA、2,4-D和IBA对福建柏鳞叶愈伤组织的诱导率总体高于茎段,各生长素对福建柏鳞叶和茎段愈伤组织的诱导率均表现为NAA>IBA>2,4-D,所有处理中以1.0 mg/L NAA对福建柏鳞叶愈伤组织的诱导率最高,为83.33%;以0.5 mg/L NAA对茎段愈伤组织的诱导率最高,为61.11%;愈伤组织生长状态和抗褐化效果优劣依次为NAA、2,4-D、IBA。②仅100 mg/L V C+200 mg/L AC处理的愈伤组织污染率低于不添加抗褐化剂的对照;死亡或褐化率仅500 mg/L PVPP处理与对照相同,均为0.00%,其余处理均高于对照;诱导率则以不同质量浓度PVPP、1000 mg/L V C、100 mg/L V C+200 mg/L AC处理与对照相当或高于对照,其余处理均低于对照;愈伤组织生长状态总体以PVPP处理表现最优。③仅300 mg/L PVPP、200和400 mg/L AC处理的愈伤组织增殖率高于对照,增殖生长量仅100和200 mg/L PVPP、100 mg/L V C、200 mg/L AC处理高于对照;所有处理中以200 mg/L AC处理的愈伤组织增殖率和增殖生长量最高,分别为70.00%和10.07 g;各抗褐化剂对福建柏愈伤组织增殖效果的优劣依次为PVPP、AC、V C、V B。④不同抗褐化剂处理的愈伤组织褐变率均呈先增加后趋于稳定的变化趋势,但变化幅度存在显著差异;各抗褐化剂的抗褐化效果优劣依次为AC、PVPP、V C、V B。⑤不同质量浓度PVPP、V C、AC处理对福建柏愈伤组织PPO和POD活性的影响具有显著差异,但各处理PPO活性均与对照无显著差异,POD活性以500 mg/L AC处理显著高于其他处理。【结论】在福建柏愈伤组织诱导阶段,愈伤组织的褐化与生长素种类有关,生长素NAA、2,4-D适用于福建柏愈伤组织的诱导,IBA诱导的愈伤组织容易褐化,添加适量抗褐化剂能减少愈伤组织的褐化情况。在愈伤组织增殖培养阶段,适宜质量浓度的PVPP、AC作为抗褐化剂能有效减缓福建柏愈伤组织的褐化进程,保持愈伤组织的正常增殖生长,但高质量浓度的抗褐化剂会抑制愈伤组织的生长。

摘要：甘薯采后贮藏过程中受机械损伤,极易被病原微生物侵害,使得甘薯腐烂变质造成极大的经济损失。基于采后高温预处理可加快果蔬受损组织的愈伤速度,该研究采用不同热激条件处理对甘薯块根,并探究其对愈伤组织形成的影响。以人工损伤甘薯为材料,采用热空气对甘薯块根进行55~70℃温度和10~20 min时间的高温短时愈伤热激处理(High Temperature Short Time Callus,HTSTC)。在13℃条件下贮藏7 d后,对甘薯块根的外观色泽、木栓层厚度、木质素含量和失重率进行测定,并观察愈伤后软木脂沉积情况。结果表明,65℃热激15 min处理后甘薯伤口部位木质素积累和软木脂沉积现象良好,木质素含量、木栓层厚度比冷库内(35±0.5)℃进行愈伤2 d的传统愈伤方式分别高出12.27%和19.41%。并且和传统愈伤相比,由于愈伤速度快,愈伤层厚度较高,使得热激处理组能有效降低损伤甘薯块根的失重率。通过响应面优化探究热激愈伤甘薯的最佳条件,计算得出最佳热激处理条件为67.01℃热激12.69 min,且此条件下愈伤效果与65℃热激15 min十分接近。综上,HTSTC处理不仅可以达到比传统愈伤更好的效果,还可以保证较低的失重率,保持外观品质,能够成为一种新型的块根类作物愈伤处理方式。

摘要：以2021年高考江苏卷第5题B选项提出的“组织培养不需经过愈伤组织”为例,结合人教版新旧教材有关内容,对植物组织培养的过程进行梳理,并对此部分内容进行了教学反思,提出教学中除介绍植物组织培养经过愈伤组织途径外,还应介绍器官发生途径等。

摘要：葡萄风信子(Muscari spp.)为百合科葡萄风信子属植物的总称,该属植物多具有稀少的正蓝色花色,是研究单子叶植物花青苷合成机理的模式材料。为开发一种高效的葡萄风信子遗传转化体系,本试验以葡萄风信子常见种亚美尼亚(***)、栽培品种‘黑眼睛’(***‘Dark Eyes’)为材料,用叶片和花蕾分别诱导获得愈伤组织,对愈伤组织的潮霉素敏感性进行测试,对根癌农杆菌介导的愈伤组织遗传转化体系进行优化。试验结果表明:葡萄风信子亚美尼亚和‘黑眼睛’愈伤组织的潮霉素临界浓度分别为150 mg·L^(-1)和120 mg·L^(-1)。GUS染色结果显示不同基因型、不同农杆菌菌株及不同功率超声处理的愈伤组织瞬时转化效率差异不显著。而液体培养的花源愈伤组织能获得更高的瞬时转化效率,为葡萄风信子遗传转化的最优受体。其最高瞬时转化效率为98.73%。试验共获得了209块抗性愈伤组织,经PCR和RT-PCR检测,阳性率可达90%。本研究为在葡萄风信子中快速有效的开展基因功能研究奠定了技术基础。

摘要：以赤苍藤(Erythropalum scandens)带芽点的半木质化枝条为材料建立赤苍藤组培快繁体系,研究外植体灭菌条件,通过正交实验,设计不同植物生长调节剂组合对赤苍藤愈伤组织诱导、愈伤组织分化、生根壮苗及移栽驯化的影响。结果表明,赤苍藤外植体消毒最佳方法是以体积浓度为75%乙醇浸泡60秒后,再以质量浓度为0.1%HgCl_2消毒10分钟,成功率为48.89%;叶片愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+0.5 mg·L^(-1) 6-BA+1.0 mg·L^(-1) 2,4-D+1.0 mg·L^(-1) IBA,培养30天,诱导率达71.11%,且绿色紧密;茎段诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+1.0 mg·L^(-1) 6-BA+0.5 mg·L^(-1) 2,4-D+1.0 mg·L^(-1) IBA,培养30天,诱导率为70.00%,且绿色紧密;诱导愈伤组织增殖以及分化的最佳培养基为MS+2.0mg·L^(-1) 6-BA+0.5mg·L^(-1)TDZ+1.0 mg·L^(-1) IBA,芽分化率达98.89%,增殖系数为3.33;生根最佳培养基为MS+1.5 mg·L^(-1) 6-BA+0.5 mg·L^(-1) IBA,生根率为100%,平均生根数为2.2条;生根苗在小颗粒泥炭土中成活率达88.89%。该研究建立了赤苍藤组培快繁体系,为赤苍藤优质种苗生产奠定了良好基础。

摘要：【目的】探究氨基酸对荔枝愈伤组织增殖及体胚诱导的影响。【方法】采用L9(34)正交设计,分别在妃子笑荔枝愈伤组织继代及体胚诱导阶段添加不同氨基酸,比较其对愈伤组织增殖及体胚诱导的影响。【结果】在愈伤组织增殖阶段培养基中添加氨基酸均显著提高愈伤组织增殖率,最优处理为基础继代培养基添加0.1 g·L^(-1)γ-氨基丁酸+0.2 g·L^(-1)谷氨酰胺,愈伤组织增殖率为初始接种量的14.04倍。与对照相比,氨基酸处理组的胚性愈伤组织淡黄,颗粒较小,细胞呈椭圆形,细胞质浓厚,多为正在分裂状态;非胚性愈伤组织浅白,水渍严重,着生于顶部或者边缘,易于剔除。在愈伤组织增殖阶段培养基中添加γ-氨基丁酸、谷氨酰胺和丙氨酸对后续的体胚发生及萌发影响极显著(p<0.01),最优配方为基础继代培养基添加0.3 g·L^(-1)γ-氨基丁酸+0.4 g·L^(-1)谷氨酰胺+0.05 g·L^(-1)丙氨酸,每克愈伤组织可获得461个体胚,77株组培苗。在体胚发生阶段培养基中添加氨基酸,获得的体胚发生及萌发最优配方为基础诱导培养基添加0.3 g·L^(-1)γ-氨基丁酸+0.4 g·L^(-1)谷氨酰胺+0.05 g·L^(-1)丙氨酸,每克愈伤组织可获得270个体胚,72株组培苗。【结论】氨基酸可调节愈伤组织胚性,提高愈伤组织增殖率,促进体胚发生及萌发。

摘要：目的建立龙葵Solanum nigrum愈伤组织最优培养体系,研究愈伤组织在不同培养时间下各生理指标变化和澳洲茄碱、澳洲茄边碱的积累,为工业化制备澳洲茄碱和澳洲茄边碱奠定基础。方法研究不同外植体及培养基对龙葵愈伤组织诱导的影响,采用响应面试验设计方法优化愈伤组织诱导的激素配比,运用考马斯亮蓝G-250法测定可溶性蛋白含量,TTC还原法测定细胞活力,邻苯二酚法测定多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)活性,氮蓝四唑光化还原法测定超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性,愈创木酚比色法测定过氧化物酶(peroxidase,POD)活性,硫代巴比妥酸显色法测定丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量,高效液相色谱法测定澳洲茄碱及澳洲茄边碱含量。结果愈伤组织诱导最佳外植体为龙葵茎段,最适培养基为MS+1.43 mg/L NAA+2.15 mg/L 6-BA+2.48 mg/L KT,愈伤组织增殖最适培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA。愈伤组织鲜质量增长量呈“S”型趋势,20 d时细胞活力达到最高峰值,可溶性蛋白含量与POD活性均呈先升高后降低的趋势,SOD活性在20 d与30 d出现2个峰值,MDA含量呈先降低后升高的变化趋势,在培养后期PPO活性下降,可能与愈伤组织褐化有关,澳洲茄碱与澳洲茄边碱含量变化趋势一致,在第30天时达到峰值。结论龙葵愈伤组织生长期为25 d,同时也为最适的愈伤组织鲜质量收获期,25 d后会出现不同程度褐化。其愈伤组织中的次生代谢产物积累和细胞生长过程通常是负相关的,次生代谢产物的合成大多在愈伤组织的生长后期。

摘要：【目的】利用楸树间接器官发生途径培养愈伤组织并诱导出芽是楸树良种繁育的高效技术方法,同时也为楸树遗传转化方面的研究提供技术参考。【方法】以楸树试管苗叶柄为外植体,采用L9(43)正交试验设计分别研究了不同基本培养基、植物生长调节剂浓度和光质等对愈伤组织诱导的影响,并对愈伤组织进行形态学和组织细胞学观察,据此筛选出适宜的诱导培养基,继而探索愈伤组织再分化的培养条件。【结果】在叶柄愈伤组织诱导过程中,基本培养基种类(MS、N6、DKW)的影响效应不显著,而6-BA浓度、NAA浓度和光质对愈伤组织的诱导均具有显著影响。极差分析结果显示,当培养条件为白光,植物生长调节剂6-BA与NAA的浓度比在10∶1时最有利于愈伤组织的诱导,即楸树叶柄诱导愈伤组织的最佳培养基为MS+1.0 mg·L^(-1)6-BA+0.10 mg·L^(-1) NAA,光质为白光;对9组愈伤组织制作石蜡切片,显微观察发现蓝光照射条件下,采用DKW+3.0 mg·L^(-1)6-BA+0.01 mg·L^(-1) NAA配方诱导出的愈伤组织细胞具有明显的拟分生组织,此愈伤组织在DKW+0.2 mg·L^(-1) TDZ+0.01 mg·L^(-1) NAA配方下可以成功诱导出不定芽。【结论】1)光照条件在愈伤组织诱导过程中具有显著的影响;2)TDZ具有较高的活性,能够高效地促进楸树愈伤组织诱导不定芽生长。本研究初步建立了楸树叶柄愈伤组织诱导方法和不定芽诱导的有效培养条件,为楸树无菌苗培育及遗传转化体系建立提供技术支撑。

摘要：为探究‘玫瑰香’葡萄生根的分子机理,将带芽茎段培养至生根期,筛选出较为合适的生根培养基。采用正交试验设计,以不同浓度IBA、NAA和蔗糖处理,得到基部生根的愈伤组织对其进行转录组学分析。结果表明,1/2B_(5)培养基较为适合‘玫瑰香’葡萄生根;转录组测序共得到高质量序列42.86 Gb,各样品88.23%以上的序列能定位到参考序列,DEGs以下调表达为主;对KEGG显著富集的4条通路进行分析,有8个DEGs可能对其生根有重要作用。通过qRT-PCR验证,DEGs的表达趋势与测序结果基本一致。转录组分析得到了‘玫瑰香’葡萄生根期中重要的通路和关键基因,为‘玫瑰香’葡萄生根提供理论和实践指导。