摘要：为了在提高大枣粗多糖得率的同时保持其抗凝血活性,采用超声辅助提取大枣粗多糖;设计单因素和响应面优化试验探讨温度、pH值、超声功率、超声时间以及料液比对大枣粗多糖体外抗凝血活性和得率的影响。试验结果表明最佳提取工艺是:超声温度69℃,pH 7.15,超声功率80 W,料液比为1∶10(g/mL),超声时间30min。在此条件下大枣多糖既能保持良好的体外抗凝血活性,又具有较高的得率。

摘要：以5,6,7,7a-四氢噻吩并[3,2-c]吡啶-2(4H)酮盐酸盐为起始原料,设计并合成了10个新型的ADP受体拮抗剂———2-乙酰氧基-5-[2-氧代-2-(4-取代哌嗪-1-基)]乙基-4,5,6,7-四氢噻吩并[3,2-c]吡啶(4a^4j),收率51%~72%,其结构经1H NMR,IR和HR-MS表征。初步生物活性测试结果表明,4a^4j均具有一定的抗凝血活性,其中4g,4i和4j的活性明显优于阳性对照药噻氯匹定,对大鼠凝血时间增长率分别为43.5%,71.8%和58.0%。

摘要：以抗凝血活性作为评价指标,优选出抗凝活性最佳的水蛭品种和最佳的酶解工艺。采用了单因素试验法确定三种基原水蛭的酶解工艺,筛选出具有最佳抗凝血活性的品种,对活性最强的日本医蛭进行响应面优化设计,确定蛋白酶用量、酶解温度、酶解pH值三个影响因素的最优水平。结果三种水蛭抗凝血活性由高到低顺序为:水蛭>柳叶蚂蟥>蚂蟥;酶解因素影响的顺序为:酶用量>酶解温度>酶解pH值;优选的最佳酶解工艺为:最佳蛋白酶是胰蛋白酶,蛋白酶最佳用量为7657.28 u/g,最适宜温度为53.20℃,最佳酶解pH值为8.30,以此最优条件对日本医蛭进行酶解,得到的产物抗凝血活性达到558u/g。模型可靠性较高,通过对比试验优选了抗凝血活性最强的水蛭品种和最佳的酶解工艺,可以提高水蛭的抗凝血活性。

摘要：目的筛选并优化芪参还五胶囊中虫类药材的仿生酶解工艺条件,并对其抗凝血、溶栓活性进行初步评价。方法以总蛋白含量、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、血浆凝血酶时间(TT)和溶栓活性为指标,评价水煎煮、水提醇沉、匀浆、胃蛋白酶酶解、胰蛋白酶酶解和仿生酶解等不同提取方法对芪参还五胶囊中虫类药材的提取效果,并采用正交试验设计优化仿生酶解提取工艺的最佳工艺条件。结果仿生酶解提取物的总蛋白含量、APTT、PT、TT和溶栓活性均为最佳,血栓抑制率为41.97%,与阿司匹林阳性对照的抗凝血和溶栓作用相当。正交试验结果表明,加酶量和酶解时间两个因素对仿生酶解法提取效果有显著性影响(P<0.05),综合得出最佳仿生酶解工艺条件为药材粉碎粒度为80目,加酶量为2%生药量,胃蛋白酶和胰蛋白酶各自酶解时间为2 h。3次平行工艺验证结果表明该工艺条件稳定可行。结论本研究筛选的仿生酶解法工艺条件稳定可行,可作为芪参还五胶囊中三味虫类药材的最佳提取方法。

摘要：采用Alcalase碱性蛋白酶酶解蛋清粉制备食源性抗凝血肽。结果表明:底物浓度过大会抑制水解度的增长,底物质量分数为1%时蛋白质完全水解后的产物抗凝血活性最佳;高温和低温均对水解度有影响,低温酶解产物的抗凝血活性较好;pH值对水解度的影响与Al-calase的最适pH值有关;pH值为7时,抗凝血活性最好;酶/底物浓度增大,但底物不变的情况下,对水解度的提高不明显,酶/底物浓度过大,导致抗凝血活性降低。考虑交互作用经试验优化设计确定的酶解最佳工艺参数为:底物质量分数为1%,酶解温度为50℃,酶/底物质量分数为5%,酶解pH为8。在该条件下水解2h,凝血抑制率达到68.92%。

摘要：目的以延长活化部分凝血活酶时间(APTT)为指标,建立定量测定川芎抗凝血作用的方法,评价川芎及其中成药的质量。方法川芎先后用乙醇和水定量提取,以总提取物为供试品,体外测定延长APTT值。家兔心脏取血,制备血浆,加入APTT试剂后,测定凝结时间。以APTT延长率为抗凝血活性的评价指标,用阿魏酸钠标定川芎的延长APTT活性。根据量反应平行线法(2.2)计算川芎的抗凝血活性。并测定了9份川芎药材、饮片及中成药的抗凝血活性。结果阿魏酸钠和川芎总提取物均具有显著的抗凝血活性,且可靠性检验结果成立。阿魏酸钠的给药质量浓度(1~5 mg/m L)与其APTT延长率呈良好的线性关系(r=0.995 5)。供试品重复测定抗凝血活性的RSD为9.34%(n=6),可信限率为15.98%(n=6)。不同川芎样品的抗凝血活性不同,5份川芎药材的抗凝血效价分别为5.431~7.620 U/g,川芎饮片及川芎酒炙饮片分别为5.910、3.017 U/g,通脉颗粒和血府逐瘀丸分别为14.516、29.035 U/g。结论建立的方法能准确测定川芎药材、饮片及其中成药的抗凝血活性并评价其质量。

摘要：以菲牛蛭为原料,采用Alcalase 2.4 L碱性蛋白酶酶解菲牛蛭制备抗凝血肽,通过筛选显著单因素和设计正交试验,并以抗凝血活性为指标,确定酶解的最佳反应条件为:酶解温度55℃、酶解时间2 h、底物浓度12%、加酶量3%、pH 8.5,在该条件下所制备的抗凝血肽的抗凝血活性可达702AT-U/g。

摘要：酪蛋白为牛乳中主要的蛋白形式,不仅能为生物体生长发育提供必需的氨基酸,而且酶解后可得到一系列具有重要生理功能的生物活性肽,抗凝血肽就是其中一种,毒副作用小、抗凝血效果明显,可作为心脑血管疾病治疗的潜在药物。本试验以牦牛乳酪蛋白为原料,采用胰蛋白酶酶解酪蛋白制备抗凝血肽,通过筛选显著单因素和设计正交试验,确定了牦牛乳酪蛋白抗凝血肽最佳制备条件为:温度为30℃、pH为6.2、底物浓度为4%、酶底比为1.75%、反应时间为3h。在该条件下所制备的抗凝血肽的抗凝血效价单位数可达837.4U/mg。

摘要：Hirudin，凝血酵素的大多数有势力禁止者在自然发现了，在浆液有短半衰期，它显著地作为抗凝剂限制它的临床的申请。最近， PEGylation 通常被用作一个有效方法在浆液延长它的半衰期。与在随机指向离氨酸残余的基本条件下面的非特定的 PEGylation 相对照，在略微酸的条件下面的 PEGylation 地点最好指向 histidine 残余，并且仅仅在 r-hirudin 在 51 点有一 histidine 残余；因此， succinimidyl 羰基 methoxy 聚乙烯乙二醇(SC-mPEG， 20000 ) 在略微酸的 pH 被纳入 r-hirudin 赞成 mono-PEGylated r-hirudin 的形成。有高 mono-PEGylated 比率的反应混合被一步舞离子交换容易分开色析法(IEC ) 过程。约 79.71% mono-PEGylated r-hirudin 是在 His51 的 PEGylated，它证明酸的 PEGylation 操作原则上阻止了 r-hirudin 的活跃中心(Lys47 ) 的 PEGylation。有比 95% 高的纯净的 Mono-PEGylated 产品作为占优势的产品被获得，并且 34% 抗凝剂活动在 vitro 被保留。为钠 dodecyl 硫酸盐 polyacrylamide 胶化电气泳动(SDS 页) 的染色的方法被改进在不到 5min 获得完美的 electrophoretic 模式。更精确的分子的重量作为分子的重量标准由于木钉的使用被推出。