摘要：采用自行设计、选择含天然ＨＤＡｇ部分片段的人工合成２７肽建立ＥＩＡ检测抗ＨＤＶ方法，在国内８家医院检测各类人员中血清抗ＨＤＶ状况。ＨＤＶ抗原合成肽由中国科学院上海生物化学研究所合成。结果：献血员（３１５例），甲型肝炎（１１３例）和非乙型肝炎（１５４例）中２例阳性；在ＨＢＶ感染者中共检出抗ＨＤｖ（＋）为２ｌ５／１４８２（１４．５１％）。其中ＡｓＣ为１４／４１４（３．３８％）、ＡＨ为１１／７６（１４．４７％），ＣＰＨ为５／２８（１７．８６％）、ＣＡＨ为３２／１８１（１７．６８％）ＳＨ为１７／８６（１９．７７％），ＬＣ为５２／１４２（３６．６２％），ＰＨＣ为３０／１３０（２３．０８％），另５４／４２５（１２．７１％）未分型。同一单位抗ＨＤＶ的检出与已往用市售试剂结果基本一致，与Ａｂｂｏｔｔ试剂符合率为９４．９％（７４／７８）。提示本ＨＤＶ抗原２７肽具有ＨＤＶ抗原活性，能特异地为天然抗ＨＤＶ识别，可作为检测抗ＨＤＶ诊断试剂。

摘要：目的人工设计制备多价EZH2肿瘤相关抗原肽,并鉴定其抗原特性。方法设计合成编码多价EZH2肿瘤相关抗原肽的DNA序列,克隆入原核表达载体p ET-30a(+)中,构建含4个EZH2肿瘤相关抗原肽段(Aa120-128、Aa165-174、Aa291-299、Aa735-742)的重组多价抗原肽原核表达质粒p ET-30a(+)-EZH2-antigen,转化*** BL21(DE3),经IPTG诱导表达后,用Ni-NTA树脂在变性条件下对重组多肽进行亲和层析纯化,Western blot分析重组多价EZH2肿瘤相关抗原肽的抗原特性。用重组多价EZH2肿瘤相关抗原肽免疫大耳白兔,制备多克隆抗体,间接ELISA法检测血清中抗体效价,Western bolt分析多抗的特异性。结果重组原核表达质粒p ET-30a(+)-EZH2-antigen经酶切及测序证实构建正确;表达的重组多价EZH2肿瘤相关抗原肽表观相对分子质量约4 300,主要以包涵体形式存在;纯化的多肽纯度不低于90%,浓度为0.5 mg/ml,且能被兔抗EZH2多抗和兔抗His标签多抗有效识别和结合;纯化的多价EZH2肿瘤相关抗原肽能在动物体内高效诱导抗体生成,抗血清效价为1∶64×104,且能特异性识别和结合PC3人前列腺癌细胞中表达的EZH2蛋白。结论成功制备了一种多价EZH2肿瘤相关抗原肽,该多价抗原肽相对分子质量虽小,但抗原肽密度高,可能具有更强的肿瘤相关抗原的活性,具有重要的应用前景。

摘要：以曼氏血吸虫２８ｋＤａ谷胱甘肽Ｓ－转移酶的有效抗原肽Ｐ１４１为先导肽，通过分别改变在结构上、Ｃｈｏｕ－Ｆａｓｍａｎ构象参数上和亲水性上相似的氨基酸残基设计并合成了４个类似物，通过ＥＬＩＳＡ法测定了它们对血吸虫表膜抗原多克隆抗体的抗原性，通过类似物与Ｐ１４１的活性比较讨论了构效关系。

摘要：采用修饰的肽配体和佐剂增强细胞毒性T细胞（CTL）应答效应方法合成的肿瘤抗原肽疫苗，主要包括恶性黑色素瘤分化抗原来源、人表皮生长因子受体2（HER2）来源、癌胚抗原（CEA）来源、NY—ESO-1抗原等来源的肽疫苗。目前，其疫苗的修饰方法、设计原理和提高CTL的应答效应机制的研究进展迅速，且取得较为满意的临床疗效。

摘要：目的进一步认识丙型肝炎病毒（ｈｅｎａｔｉｔｉｓ Ｃ ｖｉｒｕｓ， ＨＣＶ）包膜糖蛋白高变区１（ｈｙｎｅｒｎａｒｉｂｌｅ ｒｅ－ｇｉｏｎ　１，ＨＶＲ１）序列的抗原表位。方法设计并台成ＨＣＶ－ＢＪ株（１ｂ型）ＨＶＲ１ ３９０－４１１序列共２２个氨基酸的线性表位多肽（ＬＰ）及多抗原肽（ＭＡＰ），并比较与ＨＣＶ感染者血清中抗ＨＶＲ１的反应性。结果抗ＭＡＰ的Ａ４５０为０．４６１±０．５９０，抗ＬＰ为０．１４５±０．１６６，两者差异有非常显著性（Ｐ＜０．０００１），而且两者有较好的关联性（Ｐ＜ ０００１）；５９份抗ＨＣＶ阳性血清中，抗ＬＰ及抗ＭＡＰ的阳性检出率分别为２９％和５８％；ＭＡＰ可结合ＨＣＶ １ｂ型以外其它基因型ＨＣＶ感染者血清中相应的抗体。结论ＭＡＰ与天然抗体结合的反应原性明显高于ＬＰ，且存在一定的交叉反应性；合成合ＨＣＶ ＨＶＲ１序列的ＭＡＰ可能成为分析相应区段构型抗原表位和设计ＨＣＶ分子疫苗一条可行的途径。

摘要：本研究设计并用固相法合成了丁型肝炎病毒与蛋白上的二个抗原肽,肽的纯度达到高压液相鉴定均.两种复肽均具有丁肝病毒抗原活性,在抗HDVELISA检测中有应用价值,混合包被的效果更佳.

摘要：目的　克隆人肝癌细胞系HHCC中的肿瘤相关基因MAGE 1的全长cDNA。方法　根据GenBank中MAGE 1基因编码区 ,设计PCR引物 ,用RT PCR方法 ,从人肝癌细胞系HHCC中获得MAGE 1全长cDNA ,双酶切后连接入质粒 pUC19中 ,转化入大肠杆菌DH5α。挑选阳性克隆提取质粒 ,进行DNA序列分析 ,并将测得的核苷酸序列与GenBank中的DNA序列进行BLAST同源性分析。结果　获得MAGE 1全长cDNA、MAGE 6基因 4 6 3bp片段 ,以及 1个与MAGE 6基因编码区有 93%同源性的片段 ,可能为MAGE家族中的新成员。结论　人肝癌细胞系HHCC可表达多种MAGE基因 ,可能有新的MAGE基因出现 ,为研究MAGE基因在HCC中的表达模式及其在HCC免疫治疗中的靶点提供了新的资料。

摘要：目的:利用重叠延伸PCR合成风疹病毒E1基因的抗原肽段,构建其原核表达载体并表达蛋白,为进一步获得高质量的rE1重组抗原肽奠定基础。方法:利用软件对风疹病毒E1基因进行生物信息学分析,根据大肠杆菌密码子偏爱性对其密码子进行优化;设计多对寡核苷酸引物,以重叠延伸PCR法合成相应抗原肽段,克隆后测序鉴定。再以酶切连接的方法将合成的抗原肽序列克隆导入原核表达载体pET32a;利用IPTG诱导抗原肽段的表达,SDS-PAGE和West-ern blot法分析表达产物。结果:经过6轮重叠延伸PCR扩增,成功获得与预期目的序列一致的风疹病毒E1基因抗原肽并构建获得重组质粒pET32-rE1;在37℃下分别以终浓度为1 mmol/L和0.5 mmol/L的IPTG诱导抗原肽表达,SDS-PAGE和Western blot法检测到预期的蛋白条带;且以IPTG终浓度为1 mmol/L诱导6 h后表达量最高。结论:成功合成了密码子优化的风疹病毒E1基因抗原肽段,构建其原核表达载体pET32-rE1并表达该抗原肽。

摘要：目的筛选和鉴定食管癌广泛高表达蛋白COX-2的HLA-A2限制性CTL表位。方法运用生物信息学的方法,以SYFPEITHI法初步预测,结合MHCPred 2.0和NetChop3.0 Server在线分析,设计出五条新的抗原肽。通过标准Fmoc固相合成法合成抗原肽,以流式细胞仪对其与HLA-A2分子的结合力和稳定性进行分析,并对结合力较低的P66(FI2h)。P321和P66Y1对表达COX-2的EC-9706、EC-1的杀伤率分别明显高于P66。结论源于食管癌广泛高表达抗原COX-2的抗原肽P321和P66Y1能分别有效激发HLA-A2限制性CTL的免疫应答并杀伤肿瘤细胞。

摘要：An abstraction and an investigation to the worth of dendritic cells (DCs) ability to collect, process and present antigens are presented. Computationally, this ability is shown to provide a feature reduction mechanism that could be used to reduce the complexity of a search space, a mechanism for development of highly specialized detector sets as well as a selective mechanism used in directing subsets of detectors to be activated when certain danger signals are present. It is shown that DCs, primed by different danger signals, provide a basis for different anomaly detection pathways. Different antigen-peptides are developed based on different danger signals present, and these peptides are presented to different adaptive layer detectors that correspond to the given danger signal. Experiments are then undertaken that compare current approaches, where a full antigen structure and the whole repertoire of detectors are used, with the proposed approach. Experiment results indicate that such an approach is feasible and can help reduce the complexity of the problem by significant levels. It also improves the efficiency of the system, given that only a subset of detectors are involved during the detection process. Having several different sets of detectors increases the robustness of the resulting system. Detectors developed based on peptides are also highly discriminative, which reduces the false positives rates, making the approach feasible for a real time environment.