摘要：【目的】探索建立一种有效制备昆虫非典型嗅觉受体Orco抗原的方法,为Orco蛋白组织定位及功能研究奠定基础。【方法】设计带有Bam H I和Hind III酶切位点的引物,采用RT-PCR方法扩增家蚕Bombyx mori Orco第4-5跨膜区之间的基因片段,将其与原核表达载体p ET-28a(+)双酶切处理后进行连接,然后转化大肠杆菌Escherichia coli感受态细胞DH5α,重组质粒再转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,用IPTG诱导表达,用SDS-PAGE检测诱导蛋白,用His Trap HP亲和层析对诱导表达的大量蛋白进行纯化。【结果】在大肠杆菌原核表达系统中,用IPTG诱导获得了与预测蛋白大小相符的目的蛋白,经SDS-PAGE检测发现目的蛋白以包涵体形式表达,在变性条件下经His Trap HP亲和层析获得大量可用于抗体制备的纯化蛋白。【结论】利用原核表达系统可获得制备家蚕Orco抗体的抗原蛋白。

摘要：【目的】研究发酵、酶解和物理处理方式对豆粕大豆抗原蛋白分解和酸溶蛋白含量的影响,为筛选合适的豆粕加工处理方式提供依据。【方法】采用4因素3水平正交试验设计,研究菌种组合、发酵水分、发酵温度和发酵时间对豆粕抗原蛋白和酸溶蛋白含量的影响,确定最佳发酵方案。采用4因素3水平正交试验计,研究蛋白酶用量、酶解水分、酶解温度和酶解时间对豆粕抗原蛋白和酸溶蛋白含量的影响,确定最佳酶解方案。采用单因素试验研究烘焙(温度设置为160,200,240℃)、微波(火力设置为小火、中火、高火)和蒸汽蒸制(时间设置为15,20,25 min)对豆粕抗原蛋白和酸溶蛋白含量的影响。【结果】豆粕发酵最优方案:以枯草芽孢杆菌和产朊假丝酵母作为发酵菌种、发酵水分40%、35℃发酵72 h,该方案所得的发酵豆粕酸溶蛋白含量为17.36%,且抗原蛋白分解较好。豆粕酶解最优方案:蛋白酶添加量为0.3%、水分含量为60%,40℃酶解48 h,该方案所得酶解豆粕酸溶蛋白含量为8.76%,且抗原蛋白分解效果较好。与未经处理的对照相比,烘焙、微波和蒸汽处理的豆粕酸溶蛋白含量均显著升高(P0.05)。微波对豆粕抗原蛋白分解最好,烘焙和蒸汽对抗原蛋白也有一定的降解作用。【结论】发酵、酶解和物理处理均能提高豆粕酸溶蛋白含量,降低豆粕中的抗原蛋白。

摘要：分别选用18日龄和24日龄断奶的长太杂交仔猪,采用单因子试验设计,分两个试验研究了复合酶体外预处理、不预处理去除抗原蛋白的豆粕和生大豆不同类型日粮对不同断奶日龄仔猪生产性能和生化参数的影响。结果表明:酶解预处理能有效去除豆粕抗原蛋白,极显著提高18日龄断奶仔猪生长速度和饲料利用效率(P0 05);生大豆加酶预处理不宜作为18日龄断奶仔猪饲料的唯一蛋白源补充料;18日龄和24日龄断奶仔猪用酶解预处理大豆蛋白作单一蛋白补充料均不产生过敏反应。酶解预处理去除抗原蛋白是一种合理利用大豆产品资源的有效方法。

摘要：在鱼虾类饲料中应用合成氨基酸已经得到大多数配方师的认可,特别是羟基蛋氨酸由于在体内需要经过两步酶的作用生成蛋氨酸,从而具有生理缓释作用,因此是不需包被的缓释蛋氨酸源,是最为经济有效的水产用蛋氨酸。在不同消化结构的鱼虾上都可以按照与完整蛋白来源蛋氨酸完全相同的生物学效价进入配方设计。

摘要：转基因土豆,可以吃的乙肝疫苗 乙肝病毒侵袭肝脏,每年夺去约50万人的生命。但传统 的乙肝疫苗需要冷藏保存,这在许多边远地区很难做到,并且 价格不菲的乙肝疫苗很可能会在运输过程中,因意外受热而失 效。科学家设计了一种无需冷藏的、可以吃的疫苗--土豆。 他们从乙肝病毒中取出一个基因,植入土豆植株,后者因此产 生病毒抗原。人吃下这种土豆后。

摘要：经脂质体介导共表达中国流行株HIV 1gag gp12 0基因与IL 2基因的核酸疫苗质粒 pGPIL 2转染BHK 2 1细胞 ,以间接免疫荧光法鉴定其表达。取 pGPIL 2免疫鼠脾细胞 ,检测 pGPIL 2诱导的细胞毒性T细胞杀伤活性。杀伤实验结果证明 ,经基因免疫获得的CTL效应细胞 ,可杀伤HIV 1CN嵌合基因转染的靶细胞。提示pGPIL 2可有效诱导CTL的产生 ,该研究结果为进一步设计中国流行株HIV 1核酸疫苗提供了重要实验依据。

摘要：为探讨菌酶协调发酵豆粕适宜的发酵条件,试验选用本实验室筛选得到产乳酸能力强的乳酸菌菌株LP-4、降解大豆抗原蛋白效果佳的蛋白酶进行菌酶协调发酵豆粕,采用单因素试验设计,考察物料水分、乳酸菌接种量、发酵温度、物料粒径、蛋白酶添加量和发酵时间对发酵豆粕酸溶蛋白和大豆抗原蛋白含量的影响。结果表明,物料水分、乳酸菌接种量、发酵温度、物料粒径、蛋白酶添加量和发酵时间均对发酵豆粕品质(包括其酸溶蛋白含量和抗原蛋白降解情况)有显著影响,在物料水分40%、乳酸菌接种量1×10^6cfu/g、发酵温度35℃、物料过10目筛(2mm)、蛋白酶添加200u/g,厌氧发酵72h时发酵豆粕品质较佳,即酸溶蛋白含量达到8.78%(占豆粕比例),抗原蛋白降解率均达到60%以上(其中,大豆球蛋白含量为55.21mg/g,β-伴大豆球蛋白含量为60.33mg/g)。

摘要：根据GenBank上公布的鸡传染性贫血病毒VP1的基因序列设计一系列引物,通过基因扩增得到了鸡传染性贫血病毒(CAV)VP1基因的全长片段和一系列不同N末端截断的VP1基因片段,分别将这些片段插入表达质粒载体pET28a的多克隆位点上,构建成4种重组表达工程菌(*** BL21/pET-28-CAVVP1、*** BL21/pET-28-CAVVP1Nd29、*** BL21/pET-28-CAV VP1Nd56、*** BL21/pET-28-CAV VP1Nd137),研究了4种不同长度VP1片段在重组大肠杆菌中的表达,并通过SDS-PAGE电泳筛选最佳表达方式。结果表明:*** BL21/pET-28-CAVVP1Nd29能表达分子质量为44ku的可溶性蛋白,*** BL21/pET-28-CAV VP1Nd56能表达分子质量为40ku的不可溶性蛋白,而在*** BL21/pET-28-CAV VP1和*** BL21/pET-28-CAV VP1Nd137的诱导表达产物中未见明显的表达蛋白出现。其中可溶性的CAV VP1Nd29蛋白将有可能用于研制CAV诊断抗原和亚单位疫苗研究。